第一部分 实验室基本知识 1
一、实验室规则 1
二、实验报告 2
三、实验室基本操作 3
四、实验样品的制备 7
第二部分 基本实验技术 11
一、生物大分子的基本制备技术 11
二、分光光度法(Spectrophotometry) 13
三、层析技术(chromatography) 18
四、电泳技术(electrophoresis) 23
五、离心技术(Centrifugalization) 27
第三部分 生物化学实验 32
实验一 蛋白质沉淀凝固 32
一、实验材料、器具和试剂 33
二、实验步骤 34
思考与讨论 36
实验二 氨基酸纸层析 37
一、实验器材和试剂 38
二、实验步骤 38
三、结果处理 39
思考与讨论 39
实验三 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳 40
一、实验器材和试剂 41
二、实验步骤 41
三、临床意义 43
思考与讨论 44
实验四 核酸的提取与鉴定 45
一、实验器材和试剂 46
二、实验步骤 47
思考与讨论 48
实验五 血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性的测定——赖氏比色法 49
一、实验材料、器具和试剂 50
二、实验步骤 51
思考与讨论 52
实验六 碱性磷酸酶分离纯化及比活性测定 53
一、碱性磷酸酶的分离纯化 54
二、碱性磷酸酶的比活性测定 56
思考与讨论 59
实验七 葡萄糖氧化酶法测定血清(浆)葡萄糖 60
一、实验材料、器具和试剂 60
二、实验步骤 61
三、结果计算 61
思考与讨论 61
实验八 脂类的薄层层析 62
一、实验材料、器具和试剂 63
二、实验步骤 63
思考与讨论 63
实验九 酮体的生成和利用 64
一、实验材料、器具和试剂 65
二、实验步骤 65
三、结果处理 66
思考与讨论 66
实验十 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 67
一、实验材料、器具和试剂 68
二、实验步骤 68
思考与讨论 69
第四部分 分子生物学实验 70
实验一 感受态细胞的制备(化学法)和转化 70
一、实验材料、器具和试剂 71
二、实验步骤 71
三、结果辨析 73
思考与讨论 73
实验二 质粒DNA的提取 74
一、实验材料、器具和试剂 75
二、实验步骤 76
三、结果辨析 76
思考与讨论 77
实验三DNA琼脂糖凝胶电泳 78
一、实验材料、器具和试剂 79
二、实验步骤 79
三、结果辨析 80
思考与讨论 81
实验四 聚合酶链式反应(PCR)体外扩增DNA 82
一、实验材料、器具和试剂 84
二、实验步骤 84
三、结果辨析 85
思考与讨论 86
实验五DNA体外重组、筛选与鉴定 87
一、实验材料、器具和试剂 89
二、实验步骤 90
三、结果辨析 92
思考与讨论 92
实验六SDS-PAGE测蛋白质的分子量 93
一、实验材料、器具和试剂 94
二、实验步骤 95
三、结果辨析 96
思考与讨论 97
实验七WESTERN BLOT检测蛋白 98
一、实验材料、器具和试剂 98
二、实验步骤 99
三、结果辨析 99
思考与讨论 100