绪论 1
一、园艺植物生物技术的含义和内容 1
二、植物生物技术的发展简史 3
三、园艺植物生物技术的应用 15
上篇 总论 20
第一章 细胞工程原理 20
第一节 细胞全能性 20
一、细胞全能性概念的提出及其发展 20
二、植物活细胞具有生命特征属性 21
三、离体培养条件下的细胞可以展现该物种的生命特征属性 23
第二节 培养细胞的营养及代谢 24
一、培养细胞的营养和初级代谢 24
二、培养细胞的次级代谢及产物积累 25
第三节 培养细胞的分化与形态发生 26
一、离体条件下植物细胞的脱分化 26
二、离体条件下植物细胞的再分化 28
三、器官分化和植株形成 31
四、体细胞胚胎发生 33
第四节 培养细胞的遗传变异 34
一、培养细胞的遗传与变异特点 34
二、变异增多的原因 35
三、培养细胞变异的遗传机理 36
第二章 离体培养基本技术 39
第一节 外植体的类型及其选择与处理 39
一、外植体的类型及选择依据 39
二、外植体的预处理及消毒 41
三、褐变的防止 41
第二节 培养基及其配制 43
一、培养基 43
二、培养基的制备 48
第三节 无菌技术 50
一、超净工作台 50
二、试材和器具的灭菌 50
三、接种与污染控制 53
第四节 培养条件的影响 54
一、温度 54
二、光照 55
三、氧和其他气体 55
四、湿度 55
五、培养基的pH 55
第三章 细胞培养 57
第一节 细胞分离的方法 57
一、从叶片直接分离细胞的方法 57
二、从愈伤组织分离细胞的方法 58
第二节 细胞悬浮培养 58
一、细胞悬浮培养振荡器的选择 58
二、悬浮培养细胞的特点及细胞悬浮液的制备 59
三、细胞悬浮培养方法 60
四、细胞悬浮培养的培养基 61
五、悬浮培养细胞的同步化 62
六、悬浮培养中细胞生长量的计量方法 63
第三节 单细胞培养 64
一、植物单细胞培养的意义 64
二、单细胞培养的程序 64
三、单细胞培养方法 65
第四节 影响细胞培养的因素及培养细胞活力的测定 68
一、影响细胞培养的因素 68
二、培养细胞活力的测定 69
第四章 原生质体技术 71
第一节 原生质体分离 71
一、酶解材料准备 71
二、材料预处理 72
三、酶解 72
四、原生质体纯化 73
五、原生质体活力测定 73
第二节 原生质体培养 74
一、植板密度 74
二、原生质体培养基 74
三、原生质体培养方法 74
四、原生质体再生植株过程 75
第三节 体细胞杂交 75
一、融合方法 76
二、融合方式 77
三、杂种细胞筛选 78
四、体细胞杂种鉴定 79
五、体细胞杂交的影响因素 80
第五章 生殖细胞工程 82
第一节 花药与花粉培养 82
一、单倍体的意义及应用价值 82
二、花药培养 83
三、花粉培养 86
四、影响雄核发育的因素 87
第二节 未授粉胚珠和子房培养 88
一、未授粉胚珠和子房培养及其有关因素 89
二、离体条件下的孤雌生殖 90
第三节 离体受精 90
一、离体受精的意义 90
二、离体子房授粉 91
三、胚珠试管授粉 91
四、影响离体授粉的因素 91
五、离体受精 92
第四节 胚胎培养 93
一、成熟胚培养 93
二、幼胚培养 93
第五节 胚乳培养 94
一、胚乳愈伤组织的建立 95
二、影响胚乳培养的因素 95
三、胚乳再生植株的染色体倍性 96
第六章 细胞工程应用 97
第一节 离体繁殖、人工种子与无病毒苗培育 97
一、离体繁殖 97
二、人工种子 102
三、无病毒苗培育 106
第二节 种质离体保存 112
一、限制生长保存 112
二、调控生长保存 113
三、超低温保存 113
第三节 细胞工程育种 115
一、体细胞无性系变异育种 115
二、体细胞杂交育种 116
三、杂种胚挽救 117
第四节 植物培养细胞生物反应器 118
一、植物培养细胞生物反应器的特点 118
二、植物生物反应器的生产技术 118
三、植物次生代谢物的主要类型和生物转化 120
第七章 基因工程基本原理和技术 123
第一节 基因工程的分子生物学基础 123
一、基因与基因组 123
二、真核基因的结构 124
三、基因的表达与调控 127
第二节 基因工程基本技术 131
一、核酸的分离 131
二、分子杂交 132
三、PCR技术 136
四、生物芯片技术 139
第三节 基因分离与克隆 139
一、基因工程中常用的工具酶 139
二、基因克隆策略与载体 141
三、基因分离 148
第八章 转基因植物及其应用 156
第一节 植物基因工程载体及其构建 156
一、植物基因工程载体种类及命名规则 156
二、根癌农杆菌Ti质粒的结构与功能 157
三、Ti质粒基因转化的原理 159
四、Ti质粒的改造与载体构建 159
五、植物遗传转化中常用的选择标记基因及报告基因 162
第二节 植物遗传转化方法和技术 164
一、载体转化 164
二、直接转化 166
三、种质系统介导转化 167
第三节 转化体的筛选与检测 167
一、转化体的选择和筛选 167
二、外源基因整合的检测 168
三、转录水平的检测 168
四、蛋白质水平的检测 169
五、转基因植物性状检测与遗传分析 169
第四节 应用基因工程改良园艺植物的性状 169
一、果实耐贮运性状 170
二、抗病性状 171
三、抗虫性状 172
四、其他性状 172
五、转基因植物应用中存在的问题 172
第五节 转基因植物的环境释放及生物安全性问题 173
一、转基因植物的安全性问题 173
二、转基因植物的安全性评价和环境释放 174
第九章 分子标记技术 177
第一节 分子标记概述 177
一、遗传标记 177
二、分子标记简介 178
三、分子标记的遗传基础 179
第二节 常用分子标记原理及试验技术 180
一、RFLP 180
二、RAPD 182
三、SSR和ISSR 184
四、AFLP 186
五、SNP 189
第三节 分子标记数据收集与分析 190
一、数据收集 190
二、数据处理 191
三、分子标记分析软件简介 194
第四节 分子标记的应用 195
一、遗传多样性分析 195
二、亲缘关系和系谱分析 196
三、种质资源鉴定 196
四、遗传图谱构建 197
五、基因标记和定位 197
六、分子标记辅助选择 200
七、分子标记在园艺植物应用中存在的问题 200
下篇 各论 204
第十章 果树生物技术 204
第一节 概述 204
一、离体繁殖及其拓展应用 204
二、细胞工程在品种改良上的应用 204
三、基因转化 205
四、DNA分子标记 205
第二节 柑橘 206
一、离体培养及其应用 206
二、分子标记技术应用 208
三、柑橘基因工程 210
第三节 苹果 213
一、苹果脱毒与快繁 213
二、苹果花药培养 214
三、苹果叶片再生技术研究 214
四、苹果原生质体培养 215
五、苹果遗传转化 216
六、DNA分子标记在苹果上的应用 217
第四节 香蕉 218
一、香蕉离体快繁与脱毒技术 218
二、香蕉细胞和原生质体培养 219
三、香蕉的遗传转化 220
第五节 葡萄 221
一、葡萄快繁与脱毒 221
二、葡萄原生质体培养 222
三、葡萄遗传转化 222
第十一章 蔬菜生物技术 224
第一节 概述 224
一、细胞工程应用 224
二、基因工程应用 225
三、分子标记应用 226
第二节 番茄 227
一、细胞工程应用 227
二、番茄分子图谱构建 229
三、基因定位 231
四、分子标记辅助选择 231
五、番茄转基因研究 233
第三节 西瓜、甜瓜 236
一、细胞工程在西瓜、甜瓜上的应用 236
二、转基因技术在甜瓜作物上的应用 238
三、分子标记技术在西瓜、甜瓜上的应用 240
第十二章 观赏植物生物技术 244
第一节 概述 244
一、快繁技术和脱毒技术应用 244
二、胚培养技术应用 244
三、原生质体培养及融合 245
四、花卉基因工程的应用 245
第二节 兰花离体培养 246
一、兰花组织培养基本程序 247
二、蝴蝶兰离体培养 248
三、大花蕙兰离体培养 250
四、墨兰离体培养 251
五、兰花生物技术研究展望 252
第三节 香石竹 252
一、香石竹茎尖培养 253
二、香石竹无毒苗生产技术 254
三、组织培养技术在香石竹其他领域的应用 258
第四节 其他观赏植物的组织培养 259
一、菊花 259
二、百合 262
三、非洲菊 265
四、月季 267
第十三章 茶树生物技术 272
第一节 茶树细胞工程 272
一、茶树再生体系研究 272
二、细胞工程在天然产物生产中的应用 275
第二节 茶树重要功能基因克隆研究 276
一、与茶树儿茶素类代谢相关基因的克隆 276
二、与咖啡因合成相关基因的克隆 277
三、与芳香物质代谢相关基因的克隆 278
四、与抗逆性相关基因的克隆 278
五、与基础代谢相关基因的克隆 279
六、其他基因的分离 280
第三节 茶树重要功能基因表达研究 281
一、茶树儿茶素类代谢相关基因表达 281
二、茶树咖啡因合成基因表达 281
三、茶叶芳香物质代谢相关基因表达 281
四、茶树其他基因表达研究 282
第四节 茶树转基因研究 282
一、外源基因载体构建 282
二、外源基因转化茶树材料 283
第五节 茶树分子标记研究 284
一、茶树种质资源鉴定 284
二、茶树品种资源遗传多样性分析 285
三、茶树亲缘关系和分类学研究 286
四、茶树遗传图谱构建和基因定位 286
第六节 茶树酶工程 287
一、固定化酶发酵生产茶黄素类物质研究 287
二、固定化酶改善茶饮料品质研究 287
附录1 常用缩略词表 289
附录2 常用基本培养基 291
主要参考文献 293