《生物化学与分子生物学实验教程》PDF下载

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  • 作  者:陆红玲主编
  • 出 版 社:西安:第四军医大学出版社
  • 出版年份:2010
  • ISBN:9787810868204
  • 页数:120 页
图书介绍:本书一共分为五篇。第一篇是概论,主要介绍实验室的基本规则及生物化学实验的基本操作。第二篇是常用生物化学与分子生物学实验技术,重点介绍目前常用的生物化学与分子生物学研究技术的基本原理与应用。第三篇是基础生物化学实验,主要开设一些经典的生物化学实验,如蛋白质、核酸分离纯化、鉴定、定量方法;酶学实验;生化常规实验等,通过实验帮助学生巩固理论知识和培养学生的基本实验操作技能。第四篇是基础分子生物学实验,通过实验进一步提高学生的实践能力和培养其创新精神,完成对生物化学与分子生物学研究技术的系统认识。第五篇是附录,主要介绍化学试剂的分级和一些缓冲液的配制方法等。

第一篇 概论 1

第一章 实验室基本要求 1

第二章 生物化学实验基本常识 4

第一节 实验基本操作 4

第二节 实验误差与数据处理 11

第三节 实验样品的制备 15

第二篇 常用生物化学与分子生物学实验技术第一章 光度法的原理与分光光度计的使用 18

第二章 层析技术 25

第三章 电泳技术 34

第四章 离心技术 42

第五章 分子杂交和印迹技术 45

第六章 PCR技术的原理与应用 47

第三篇 基础生物化学实验 50

第一章 蛋白质 50

实验一 蛋白质定量分析(一):紫外线(UV)吸收法 50

实验二 蛋白质定量分析(二):BCA法 52

实验三 蛋白质定量分析(三):Folin-酚试剂法 53

实验四 蛋白质定量分析(四):考马斯亮蓝结合法 55

实验五 蛋白质定量分析(五):改良微量凯氏定氮法 57

实验六 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳 59

实验七 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离血清蛋白质 61

实验八 血清γ-球蛋白的提纯 64

第二章 酶和维生素 67

实验一 碱性磷酸酶的提取及比活性测定 67

实验二 酶促反应动力学实验 69

实验三 金氏法测定血清谷丙转氨酶活性 75

实验四 维生素C的提取与定量(2,4-二硝基苯肼法) 77

第三章 糖 79

实验一 血糖测定(葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法)及肾上腺素对血糖浓度的影响 79

实验二 高糖膳食、饥饿和激素对肝糖原含量的影响 81

第四章 脂类 83

实验一 血清总胆固醇测定(硫磷铁法) 83

实验二 血清甘油三酯测定 84

第五章 核酸 86

实验一 核酸浓度测定(一):紫外线(UV)吸收法 86

实验二 核酸浓度测定(二):二苯胺法 87

实验三 鼠肝DNA的制备 89

实验四 细胞核的分离与核酸的鉴定 92

第四篇 基础分子生物学实验 96

实验一 感受态细胞的制备 96

实验二 质粒DNA的快速提取制备及酶切鉴定 97

实验三 聚合酶链式反应(PCR)及产物鉴定 101

实验四 蛋白质印迹免疫分析 104

第五篇 附录 106

附录一 常用洗涤液的种类和用途 106

附录二 常用蛋白质分子量标准参照物 106

附录三 常用试剂等级表示法和用途 107

附录四 常用缓冲溶液浓度及pH范围 107

附录五 常用三种凝胶的种类型号及性能 108

附录六 硫酸铵饱和度的常用表 109

附录七 常用酸碱的比重与浓度的关系 111

附录八 常用缓冲液的配制方法 111

1.广范围的缓冲液pH 2.6~12.0 111

2.柠檬酸-Na2HPO4缓冲液,pH 2.6~7.6 112

3.柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液,pH 3.0~6.2 113

4.醋酸-醋酸钠缓冲液,pH 3.7~5.6 113

5.琥珀酸-NaOH缓冲液,pH 3.8~6.0 114

6.Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液,pH 5.8~8.0 114

7.Clark-Lubs缓冲液(KH2PO4-NaOH),pH 5.8~8.0 115

8.三羟甲基氨基甲烷(Tris)-盐酸缓冲液,pH 7.1~8.9(25℃) 115

9.Clark-Lubs缓冲液(硼酸-NaOH),pH 8.0~10.2 116

10.硼酸缓冲液,pH 8.1~9.0(25℃) 117

11.甘氨酸-NaOH缓冲液,pH 8.6~10.6(25℃) 117

12.Na2CO3-NaHCO3缓冲液 118

13.硼酸缓冲液,pH 9.3~10.7(25℃) 118

14.碳酸缓冲液,pH 9.7~10.9(25℃) 119

15.磷酸缓冲液,pH 11.0~11.9(25℃) 119

16.纸上蛋白质电泳常用的几种缓冲液 120

参考文献 120