第一章 亲和色谱法基础 1
第一节 概述 1
一、锁匙结构络合物的形成 1
二、亲和色谱和液相色谱 2
三、高效液相亲和色谱 3
四、亲和色谱方法的分类 4
五、亲和色谱发展史 4
第二节 亲和色谱法的基本理论 7
一、锁匙结构亲和吸附络合物的化学平衡 8
二、亲和吸附等温线、吸附速度和吸附动力学方程式 11
三、亲和键合动力学 14
四、亲和色谱的质量平衡数学模型 15
五、“分裂峰”效应的研究 19
参考文献 23
第二章 流动相 25
第一节 影响亲和色谱洗脱的各种因素 25
一、锁匙络合物的离解常数 25
二、配位体的浓度 26
三、空间阻碍作用 27
四、亲和固定相的吸附容量 28
五、平衡时间 29
六、温度效应 30
第二节 缓冲溶液流动相的组成 30
一、常用的酸、碱缓冲溶液 30
二、用于生物化学研究的氢离子缓冲物 32
第三节 洗脱方法 41
一、非选择性洗脱法 41
二、特效性洗脱法（或称生物选择性洗脱法） 42
三、特殊洗脱方法 43
参考文献 44
第三章 固定相（一） 45
第一节 亲和色谱固定相的制备方法 45
一、亲和色谱固定相的组成 45
二、固定化反应及其特点 46
三、在固定化反应中使用的分析技术 46
第二节 载体材料的分类及特性 49
一、描述载体材料的基本特性参数 50
二、无机氧化物载体材料 51
三、聚合物载体材料 54
四、无机氧化物、聚合物载体的性能比较 61
五、复合物载体材料 63
六、磁性载体材料 66
参考文献 67
第四章 固定相（二） 70
第一节 载体材料的活化 70
一、无机氧化物的偶联反应 70
二、天然有机高聚物的活化反应 75
三、合成有机聚合物的功能化反应 81
第二节 间隔臂 86
一、间隔臂在亲和色谱固定相中的特殊作用 86
二、疏水性直链型间隔臂 91
三、亲水性直链型间隔臂 94
四、星形辐射-树枝状间隔臂 95
第三节 配位体 97
一、配位体的类型 97
二、配位体的键合量 99
三、配位体的键合方式 100
参考文献 102
第五章 生物特效配位体（一） 104
第一节 核碱、核苷、核苷酸、寡聚核苷酸、核酸（RNA、 DNA） 104
一、核碱 104
二、核苷 108
三、核苷酸 108
四、寡聚核苷酸、核酸及其碎片 111
第二节 氨基酸、肽、酶和蛋白质 121
一、氨基酸 121
二、肽 123
三、酶和蛋白质 127
参考文献 138
第六章 生物特效配位体（二） 140
第一节 维生素及辅酶 140
第二节 外源凝集素 144
一、豆类外源凝集素-琼脂糖，SiO2亲和固定相 145
二、蓖麻凝集素-琼脂糖亲和固定相 146
三、三重外源凝集素-琼脂糖亲和固定相 147
四、在微流路芯片上豌豆凝集素（PSA）-P（GMA-EDMA）共聚物整体亲和柱的制备 149
第三节 糖类 150
一、肝素-琼脂糖，SiO2亲和固定相 150
二、甘露聚糖-P （GMA-EDMA）共聚物整体毛细管亲和柱的制备 151
第四节 抗原和抗体 153
一、抗原及其性质 153
二、抗体及其性质 154
三、抗体与抗原相互作用的特点 155
四、免疫亲和色谱固定相的制备 156
参考文献 162
第七章 生物特效配位体（三） 165
第一节 亲和素-生物素 165
一、亲和素和链亲和素的重要性质 165
二、亲和素-生物素技术 166
三、生物素酰化衍生物（或结合体）的生成 167
四、亲和素-固相载体共轭探针的形成 167
五、亲和素-生物素技术在亲和色谱的应用 170
第二节 激素 175
一、胰岛素-琼脂糖亲和固定相 175
二、促肾上腺皮质激素-琼脂糖亲和固定相 177
三、雌二醇-琼脂糖亲和固定相 177
四、皮质醇-琼脂糖亲和固定相 178
第三节 生物细胞、生物分子组合体和微生物 178
一、生物细胞和生物分子组合体 179
二、微生物细胞 181
参考文献 182
第八章 染料配位体 184
第一节 三嗪活性染料的性质 184
一、三嗪染料的组成 184
二、三嗪染料对生物分子的特效亲和作用 186
第二节 染料配位亲和固定相的制备及分析应用 187
一、多糖基体亲和固定相 187
二、全多孔（或非多孔）硅胶基体亲和固定相 192
三、聚合物基体亲和固定相 195
四、Cibacron Blue F3G-A开管毛细管亲和柱 202
参考文献 202
第九章 定位金属离子配位体 204
第一节 概述 204
一、定位金属离子的特性 204
二、螯合官能团或螯合剂的特性 205
三、蛋白质的吸附和解吸 206
四、IMAC方法的特点 207
第二节IMAC固定相的制备方法及在生物分子分离、纯化中的应用 207
一、亚氨基二乙酸（IDA） 207
二、次氨基三乙酸（氨三乙酸，NTA） 221
三、亚氨基二乙醛肟（IDAO） 221
四、乙二胺（ED） 222
五、三（羧甲基）乙二胺（TED） 223
六、乙二胺-N,N'-二乙酸（EDDA） 224
七、丙二胺四乙酸（PDTA） 225
八、8-羟基喹啉 225
参考文献 228
第十章 包合配合物配位体 230
第一节 β-环糊精 230
一、β-环糊精的特性 230
二、β-CD包合固定相的制备及在生物分子分离、纯化中的应用 232
第二节 冠醚和穴醚 242
一、冠醚和穴醚的特性 242
二、冠醚包合固定相的制备 243
第三节 杯芳烃 245
一、杯芳烃的特性 246
二、杯芳烃包合固定相的制备 247
参考文献 252
第十一章 电荷转移配位体 2
第一节 电子给予-接受络合物 254
一、电子给予-接受络合物的特性 254
二、芳烃、多环芳烃配位体电荷转移亲和固定相 255
第二节 电子给予配位体电荷转移固定相 256
一、苯基烯丙基醚-硅胶电荷转移固定相 256
二、2-氯喹唑啉（CQZ）-硅胶电荷转移固定相 256
三、8-羟基喹啉（8-HQ）-硅胶电荷转移固定相 256
四、吖啶黄素-葡聚糖电荷转移固定相 258
第三节 电子接受配位体电荷转移固定相 258
一、二硝基苯（DNP）-葡聚糖（硅胶）电荷转移固定相 258
二、五氯巯基酚（PCP）-葡聚糖电荷转移固定相 260
三、4-氨基-1,8-萘二甲酰亚胺（ANA）-葡聚糖电荷转移固定相 260
四、2,3-二氰基-5,6-二氯代苯醌 （DCBQ）-葡聚糖电荷转移固定相 261
五、四氯邻苯二甲酰亚胺（TCPI）-硅胶电荷转移固定相 261
六、二硝基苯-甘氨酸（DNP-Gly）-P（S-DVB）或PMA电荷转移固定相 261
第四节 卟啉配位体电荷转移固定相 263
一、卟啉及其衍生物 263
二、卟啉电荷转移固定相的制备及分析应用 264
第五节 酞菁配位体电荷转移固定相 271
一、酞菁及其衍生物 271
二、四磺酸化铜酞菁-硅胶固定相 272
三、其他金属离子酞菁衍生物的应用 274
参考文献 275
第十二章 共价、分子印迹和疏水作用配位体 277
第一节 共价配位体 277
一、常用的共价配位体 277
二、共价配位体亲和固定相的制备 277
第二节 分子印迹（模板）配位体 285
一、分子印迹聚合物的特性 285
二、共价键合分子印迹聚合物 287
三、非共价键合分子印迹聚合物 289
四、苯丙氨酰苯胺-P[AA（或MAA）-EDMA］共聚物分子印迹整体柱 292
五、表面涂渍分子印迹聚合物的固定相 293
第三节 疏水作用配位体 298
一、疏水作用原理 298
二、疏水作用亲和固定相的制备 302
参考文献 305
第十三章 亲和色谱法实验技术及其进展 307
第一节 亲和色谱法实验技术 307
一、亲和色谱固定相的制备技术 307
二、亲和色谱分析操作技术 309
三、生物样品的保存和制备 313
第二节 亲和色谱方法的进展 314
一、亲和色谱分离材料的设计 315
二、新型高选择性药物的研制 319
三、亲和色谱的发展前景 320
参考文献 323
附录 325
I活化和偶联配位体到HPLAC载体的反应条件 325
Ⅱ亲和色谱固定相制备中常用的偶联剂、活化剂 327