第一部分 基因克隆和DNA分析的基本原理 1
第1章 为什么说基因克隆与DNA分析非常重要 3
1.1 遗传学的早期发展 3
1.2 基因克隆和聚合酶链反应（PCR）的出现 3
1.3 什么是基因克隆 4
1.4 什么是PCR 5
1.5 为什么基因克隆和PCR如此重要 7
1.6 如何使用这本书 10
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第2章 基因克隆的载体——质粒和噬菌体 12
2.1 质粒 12
2.2 噬菌体 16
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第3章 从活细胞中纯化DNA 25
3.1 全细胞DNA的制备 25
3.2 质粒DNA的制备 36
3.3 噬菌体DNA的制备 41
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第4章 DNA纯化后的利用 48
4.1 DNA操作酶的范围 48
4.2 切割DNA的酶——限制性内切酶 54
4.3 连接——将DNA分子连接到一起 68
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第5章 将DNA引入活细胞 76
5.1 转化——使细菌细胞获取DNA 78
5.2 重组体的鉴定 81
5.3 将噬菌体DNA引入细菌细胞 85
5.4 重组噬菌体的鉴别 88
5.5 将DNA引入非细菌细胞 90
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第6章 大肠杆菌的克隆载体 93
6.1 基于大肠杆菌质粒的克隆载体 93
6.2 基于M13噬菌体的克隆载体 99
6.3 基于λ噬菌体的克隆载体 105
6.4 λ载体和其他高容量的载体使基因组文库得以建立 112
6.5 其他细菌的克隆载体 113
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第7章 真核生物的克隆载体 114
7.1 酵母和其他真菌的载体 114
7.2 高等植物的克隆载体 120
7.3 动物的克隆载体 129
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第8章 怎样获得特定基因的克隆 134
8.1 筛选的难题 134
8.2 直接筛选目的基因 136
8.3 从基因文库中鉴定克隆 138
8.4 鉴定克隆的方法 142
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第9章 聚合酶链反应（PCR） 154
9.1 PCR简介 154
9.2 PCR的更多细节 156
9.3 Taq聚合酶的错误率问题 164
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第二部分 基因克隆和DNA分析在研究中的应用 167
第10章 基因的位置和结构的研究 169
10.1 如何定位一个基因 169
10.2 DNA测序——预测基因的结构 175
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第11章 基因表达和功能的研究 186
11.1 克隆基因转录的研究 186
11.2 基因表达调控的研究 195
11.3 鉴定和研究克隆基因的翻译产物 202
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第12章 基因组研究 214
12.1 基因组学——怎样进行基因组测序 214
12.2 后基因组学——试着理解基因组的序列 224
12.3 转录物组和蛋白质组的研究 228
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第三部分 基因克隆和DNA分析在生物技术中的应用 233
第13章 克隆基因的表达 235
13.1 在大肠杆菌中的外源基因表达载体 237
13.2 在大肠杆菌中表达重组蛋白存在的问题 245
13.3 真核细胞中重组蛋白的表达 247
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第14章 基因克隆和DNA分析在医学中的应用 254
14.1 重组药物的生产 254
14.2 人类疾病相关基因的识别和鉴定 263
14.3 基因治疗 267
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第15章 基因克隆和DNA分析在农业中的应用 271
15.1 植物基因工程中的基因添加 271
15.2 基因消减 280
15.3 转基因植物的问题 284
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第16章 基因克隆和DNA分析在法医学和考古学中的应用 289
16.1 利用DNA分析鉴定犯罪嫌疑人 289
16.2 利用DNA指纹图谱分析血缘关系 292
16.3 通过DNA分析进行性别鉴定 295
16.4 古遗传学——利用DNA研究人类进化 297
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术语表 302
索引 315