第一章 概论 1
第一节 实验室基本常识 1
一、生物化学实验室安全与防护常识 1
二、生物化学实验的基本要求 2
第二节 生物化学实验基本操作 6
一、实验室常用仪器的使用 6
二、生物化学的分离、纯化、分析技术概述 15
第二章 基础生物化学实验 20
第一节 生命物质化学实验 20
实验1 糖的呈色反应和定性鉴定 20
实验2 植物中还原糖和总糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法 23
实验3 种子粗脂肪的提取 26
实验4 血清胆固醇的测定——磷硫铁法 28
实验5 纸层析法分离鉴定氨基酸 30
实验6 谷物种子中赖氨酸含量的测定 32
实验7 蛋白质的性质实验 34
实验8 蛋白质含量测定——双缩脲法、考马斯亮蓝法、紫外分光光度法 41
实验9 血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳 46
实验10 正交法测定几种因素对酶活力的影响 48
实验11 枯草杆菌蛋白酶活力测定 52
实验12 脲酶Km值的简易测定 54
实验13 细胞色素c的制备及测定 57
实验14 核酸含量的测定 61
实验15 维生素A的测定——比色法 68
第二节 生命物质代谢实验 70
实验16 脂肪酸的β-氧化 70
实验17 多酚氧化酶的纯化和活力测定 72
实验18 酪蛋白的制备 73
实验19 SDS-PAGE电泳测定蛋白质相对分子质量 75
实验20 胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响 80
实验21 肝糖原的提取与鉴定 82
第三节 核酸化学实验 84
实验22 离子交换柱层析分离核苷酸 84
实验23 酵母RNA的提取及组分鉴定 89
实验24 DNA的琼脂糖凝胶电泳 91
实验25 质粒DNA的微量提取、纯化 94
实验26 植物中DNA的提取 100
实验27 聚合酶链式反应 101
第三章 综合性实验 105
实验28 血清γ-球蛋白的分离、纯化与鉴定 105
实验29 酪氨酸酶的提取及其酶促反应动力学研究 110
实验30 固定化酵母细胞及蔗糖酶的检测 116
实验31 发酵过程中无机磷的利用和ATP的生成(ATP的生物合成) 118
实验32 兔抗人血清抗体的制备和效价测定 120
实验33 有机废水的COD测定 122
第四章 设计性实验 125
实验34 蛋白质的制备及其含量的测定 125
实验35 茶叶中茶多酚类物质的提取与含量测定 126
实验36 天然产物中多糖的提取、纯化与鉴定 127
实验37 蛋白质的表达、分离、纯化和鉴定 129
附录 135
一、试剂配制的一般注意事项 135
二、玻璃仪器的洗涤方法 136
三、实验样品的准备 138
四、常用缓冲液的配制 141
五、实验室中常用参数 145
参考文献 151