第一篇 植物生理生化实验原理 1
第一章 植物生理生化实验技术的一般原理 1
1.1 植物材料的种类 1
1.2 植物材料的采取 1
1.3 分析样品的前处理和保存 3
1.4 待测组分的提取、分离和纯化技术 4
1.5 样品中待测组分的测定 7
1.6 实验结果的数据处理与分析 8
第二章 离心技术 11
2.1 基本原理 11
2.2 离心机的类型及主要构造 12
2.3 常用离心技术 15
2.4 分析性超速离心技术的应用 17
第三章 层析技术 20
3.1 层析原理 20
3.2 分配层析 22
3.3 吸附层析 25
3.4 凝胶层析 28
3.5 离子交换层析 29
3.6 亲和层析 31
3.7 高效液相色谱 33
3.8 气相色谱 34
3.9 层析技术的应用 36
第四章 电泳技术 40
4.1 电泳基本原理 40
4.2 影响迁移率的主要因素 42
4.3 凝胶电泳 43
4.4 电泳的应用 58
第五章 红外线C02气体分析技术 61
5.1 红外线C02气体分析仪的工作原理 61
5.2 红外线CO2气体分析仪的类型 65
5.3 红外线CO2气体分析技术的运用 68
第六章 光学分析技术 70
6.1 紫外光和可见光分光光度法 70
6.2 旋光分析法 74
6.3 原子吸收分光光度法 77
6.4 火焰光度法 80
6.5 荧光分光光度法 82
第七章 气体测压技术 87
7.1 气体测压技术的类型及其基本原理 87
7.2 气体测压技术的应用 90
第八章 电化学分析技术 95
8.1 电化学分析技术的类型及其基本原理 95
8.2 电化学分析技术的应用 98
8.3 DDS-12A型数字式电导率仪的基本原理及使用方法 98
第九章 免疫化学技术——酶联免疫吸附测定法（ELISA） 100
9.1 ELISA的原理 101
9.2 设计和合成特定的免疫原 101
9.3 抗体的制备 102
9.4 标记抗原的制备 103
9.5 ELISA测定程序的设计 103
第二篇 植物生理生化实验技术 105
实验技术 105
实验1植物组织中自由水和束缚水含量的测定 105
实验2植物组织水势的测定 109
Ⅰ．小液流法 109
Ⅱ．折光仪法 111
Ⅲ．压力室法 111
实验3植物细胞渗透势的测定（质壁分离法） 114
实验4钾离子对气孔开度的影响 116
实验5植物伤流液中糖和氨基酸的鉴定 117
实验6植物根系活力的测定（TTC法） 119
实验7植物组织中金属元素的测定（原子吸收分光光度法） 121
实验8植物体内硝态氮含量的测定 123
实验9植物体内硝酸还原酶活力的测定 125
Ⅰ．离体法 125
Ⅱ．活体法 127
实验10用真空渗人法测定环境因子对光合作用的影响 128
实验11 叶绿体色素的提取、分离和理化性质 130
Ⅰ．提取与分离 130
Ⅱ．理化性质 132
实验12 叶绿素含量的测定 134
实验13希尔反应的观察 138
实验14核酮糖－1,5－二磷酸羧化酶活性的测定 138
Ⅰ．分光光度法 139
Ⅱ．同位素法 141
实验15 乙醇酸氧化酶活性的测定 142
实验16红外线C02气体分析仪法测定植物光合速率与呼吸速率 144
Ⅰ．密闭系统斜率法 144
Ⅱ．密闭系统落差法 150
实验17氧电极法测定植物光合速率和呼吸速率 151
实验18 叶绿体光诱导荧光强度的测定 156
实验19 叶绿体中甘油醛－3－磷酸脱氢酶活性的测定 157
实验20微量定容测压法测定种子的呼吸速率 160
实验21小篮子法（广口瓶法）测定植物的呼吸速率 162
实验22过氧化物酶活性的测定 164
实验23过氧化氢酶活性的测定（高锰酸钾滴定法） 165
实验24氮蓝四唑（NBT）法测定超氧物歧化酶（SOD）活力 167
实验25淀粉酶活性的测定 169
实验26脲酶Km值的测定 172
实验27植物过氧化物酶同工酶的测定（凝胶圆盘电泳） 175
实验28蛋白质相对分子质量的测定（SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳法） 178
实验29植物组织中可溶性蛋白质含量的测定 182
Ⅰ．斐林－酚试剂法 182
Ⅱ．考马斯亮蓝G-250染色法 184
Ⅲ．紫外吸收法 185
实验30植物组织中总氮、蛋白氮含量的测定（微量凯氏法） 186
实验31植物组织中游离氨基酸总量的测定（茚三酮溶液显色法） 192
实验32植物组织中糖含量的测定 194
Ⅰ．蒽酮比色法测定可溶性糖 195
Ⅱ．3,5－二硝基水杨酸法测定还原糖 197
Ⅲ．苯酚法测定可溶性糖 199
Ⅳ．斐林试剂比色法测定还原糖 201
实验33谷物淀粉含量的测定（旋光法） 203
方法Ⅰ 203
方法Ⅱ 205
实验34植物种子生命力的快速测定 207
Ⅰ．TTC法 207
Ⅱ．染料染色法 208
Ⅲ．碘化钾反应法 209
Ⅳ．荧光法 210
实验35植物组织中纤维素含量的测定 211
实验36苯丙氨酸解氨酶（PALase）活性的测定 213
实验37植物组织中DNA的提取与测定 214
实验38 DNA的琼脂糖凝胶电泳 217
实验39 RNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳 218
实验40植物组织ATP酶活性的测定 220
实验41植物种子中主要不饱和脂肪酸的分离（反相纸层析法） 223
实验42种子粗脂肪含量的测定 225
实验43气相色谱法测定植物样品膜脂中脂肪酸的含量 227
实验44气相色谱法测定乙烯含量 229
实验45酶联免疫吸附检测法（ELHSA）测定植物激素含量 231
实验46植物体内脱落酸、赤霉素的分离和测定 234
实验47赤霉素对α－淀粉酶的诱导形成 238
实验48植物激素对愈伤组织的形成和分化的影响 239
实验49类似生长素对种子萌发的影响 242
实验50植物春化和光周期现象的观察 244
Ⅰ．植物春化现象的观察 244
Ⅱ．植物光周期现象的观察 245
实验51抗坏血酸（维生素C）含量的测定 246
Ⅰ．滴定法 246
Ⅱ．比色法 248
实验52谷类作物种子中赖氨酸含量的测定 250
Ⅰ．茚三酮显色法 250
Ⅱ．染料结合法（DBL） 252
实验53脯氨酸含量的测定 258
实验54植物组织中丙二醛含量的测定 260
实验55植物抗逆性的测定（电导仪法） 261
附录 264
附录1硫酸铵饱和度常用表 264
附录2实验中常用酸、碱的比重和浓度的关系 265
附录3常用固态酸、碱、盐的物质的量浓度配制参考表 266
附录4常用酸、碱指示剂 267
附录5常用缓冲溶液的配制 267
附录6植物组织培养常用培养基 272
附录7标准计量单位 273
附录8常见的植物生长调节物质及其主要性质 275
附录9植物激素与生长调节剂在农业生产中的应用 276
主要参考文献 279