第一章 绪论 1
第一节 酶工程是生物技术的重要组成部分 1
第二节 酶工程的内容 1
第三节 酶和酶工程研究的重要意义 3
第四节 酶和酶工程研究进展 4
第二章 酶作用基本原理 8
第一节 酶促反应动力学 8
一、前稳态酶促反应动力学 8
二、单底物酶促反应稳态动力学 9
三、双底物酶促反应稳态动力学 14
第二节 酶的抑制剂及其作用 16
一、概述 16
二、可逆抑制作用 18
三、不可逆抑制作用 24
第三节 酶的作用机理 25
一、活性部位 25
二、酶作用专一性机理 25
三、酶的高效催化机理 26
第四节 酶的调节 机理 30
一、酶的别构效应和别构酶 30
二、同工酶及其调节 35
三、共价调节 和共价调节 酶 35
四、酶的聚合与解聚调节 37
第三章 酶的生产 38
第一节 酶的生产菌种 38
一、产酶菌种要求 40
三、菌种培养 42
二、菌种分离 42
一、培养基的营养成分 43
第二节 酶的发酵技术 43
二、发酵条件对产酶的影响 44
三、发酵方法 45
第三节 提高酶产量的方法 47
一、酶合成的调节 机制 47
二、打破酶合成调节 机制限制的方法 48
第四节 动植物细胞培养生产酶和有用次生代谢产物 49
一、动植物细胞的特点 51
二、植物细胞的培养 51
三、提高植物细胞产物产量的途径 54
四、培养系统和生物反应器技术 55
一、酶生物合成的模式 57
五、动物细胞发酵 57
第五节 酶发酵动力学 57
二、细胞生长动力学 59
三、产酶动力学 60
第四章 酶的分离纯化 63
第一节 酶活性测定 63
一、酶活力单位 63
二、mol催化活性或分子活性、转换率 63
三、比活力（性） 63
四、酶活力的测定方法 64
五、酶活力测定中应注意的几个问题 65
第二节 酶溶液制备 66
一、 材料预处理及破碎细胞 66
二、抽提 67
三、酶溶液的净化与脱色 68
四、浓缩 70
第三节 酶分离纯化的基本过程 71
一、酶分离纯化方法的选择 71
二、酶分离纯化过程中一些数据的处理 72
三、结晶 72
四、酶的制剂与保存 73
第四节 根据分子大小轻重建立的分离纯化方法 74
一、透析与超过滤 74
二、离心分离 77
三、凝胶过滤 78
第五节 调节 溶解度的分离方法 81
一、盐析法 81
二、降低介电常数方法 83
三、等电点沉淀法 84
四、共沉淀法 84
五、选择性沉淀法 85
第六节 按分子电荷的正负多少设计的分离方法 85
一、吸附交换分离法 85
二、电泳（Electrophoresis） 89
三、高效毛细管电泳（High-Performance Capillary Electro phoresis,HPCE） 89
四、聚焦层析 90
第七节 根据亲和作用建立的纯化方法 91
一、亲和层析法 91
二、亲和电泳 97
三、其他 98
三、表面变性法 99
二、酸碱变性法 99
一、热变性法 99
第八节 根据稳定性的差异建立的分离纯化方法 99
第九节 蛋白质（酶）的高效液相色谱分离分析法 100
一、高效液相色谱法简介 100
二、体积排阻色谱 101
三、离子交换色谱 102
四、反相色谱法 103
五、高效疏水作用色谱 104
第五章 固定化酶与固定化细胞 106
第一节 酶和活细胞的固定方法 106
一、固定化酶与固定化细胞的优缺点 106
二、酶的固定化方法 107
三、吸附法 107
四、包埋法 109
五、共价键结合法 111
六、交联法 119
第二节 微生物细胞的固定化方法 120
一、包埋法 121
二、吸附法 121
三、不用载体法 122
第三节 辅酶的固定方法 122
一、辅基的固定方法 122
二、辅酶的固定方法 124
第四节 动植物细胞固定化 125
一、植物细胞固定化 125
二、动物细胞固定化 126
一、固定化酶活力 127
三、原生质体固定化 127
第五节 固定化酶的性质 127
二、固定化酶的稳定性 128
三、固定化对酶反应系统的影响 129
四、酶反应动力学分析 130
第六章 酶分子的化学修饰 136
第一节 酶分子的修饰方法 136
一、酶的表面修饰 136
二、酶分子的内部修饰 139
三、与辅因子相关的修饰 139
第二节 酶化学修饰的基本要求 140
一、被修饰酶的性质 140
三、酶蛋白修饰反应的主要类型 146
二、修饰反应的条件 146
第三节 酶蛋白肽链的大分子修饰 148
一、聚乙二醇及其修饰反应 148
二、糖类的修饰反应 151
三、合成大分子多聚物修饰酶 154
四、天然大分子对酶的修饰反应 156
第四节 修饰酶的性质 158
一、修饰酶的热稳定性 158
二、修饰酶的抗原性 159
三、修饰酶对各类失活因子的抵抗力 160
四、修饰酶在体内的半衰期 160
五、最适pH 161
六、Km的变化 161
一、半合成酶 162
第一节 化学人工酶 162
第七章 化学人工酶、酶的非水相催化 162
二、全合成酶 163
第二节 辅酶模型化合物 163
一、四氢叶酸 163
二、烟酰胺辅酶 164
三、黄素辅酶 165
四、生物素 166
五、焦磷酸硫胺素 167
六、磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺 168
第三节 抗体酶及分子印迹 168
一、抗体酶的理论基础 168
二、半抗原与催化性抗体 170
三、抗体酶的制备方法 171
五、分子印迹 173
四、抗体酶的发展及其辅因子 173
第四节 非水介质中的酶催化反应 174
一、水的作用 174
二、有机溶剂的选择 177
三、酶在有机溶剂中的催化特点 179
四、酶的应用形式 182
第八章 生物酶工程 186
第一节 克隆酶 186
一、目的基因的获得 186
二、选择载体 187
三、重组体DNA的连接 189
四、重组DNA的转化 191
五、克隆酶基因的表达系统 192
第二节 突变酶 196
一、盒式诱变 197
二、寡核苷酸引物诱变 198
三、PCR诱变 198
第三节 超自然的优质酶——新酶 201
第九章 酶反应器和酶传感器 203
第一节 酶反应器 203
一、生物反应器概述 203
二、固定化酶反应器的类型及特点 204
三、对固定化酶反应器的选择 207
四、固定化酶反应器的操作 208
一、生物传感器概述 209
二、酶传感器的结构与工作原理 209
第二节 酶传感器 209
三、酶传感器的制备及性能 210
四、酶传感器的应用 213
第十章 酶及固定化酶的应用 214
第一节 酶在医疗保健方面的应用 214
一、酶在治疗疾病中的应用 214
二、酶在疾病诊断中的应用 217
第二节 酶在食品工业中的应用 222
一、酶在淀粉加工中的应用 222
二、酶在乳品加工中的应用 223
三、酶在水果加工中的应用 224
四、酶在酒类酿造中的应用 224
六、酶在面包与烤焙食品制造中的应用 225
七、酶在甜味剂制造中的应用 225
五、酶在肉、蛋、鱼类加工中的应用 225
第三节 酶在轻化工业中的应用 226
一、酶在氨基酸工业中的应用 226
二、酶在有机酸合成工业中的应用 227
三、酶在皮革和裘皮制造中的应用 228
四、酶在纺织和印染工业中的应用 228
五、酶在日用化工中的应用 228
六、酶在农副产品和饲料加工中的应用 229
第四节 酶在动物饲料中的应用 229
一、饲用酶对动物的作用 230
二、饲用酶的种类和来源 231
三、饲用酶制剂的种类、特性和要求 232
四、合理使用酶饲料添加剂 232
二、酶用于半合成青霉素生产 233
第五节 酶在半合成抗生素工业生产中的应用 233
一、概述 233
三、酶用于半合成头孢菌素生产 234
第六节 酶在环境保护中的应用 235
一、概述 235
二、应用微生物细胞净化污水 236
三、应用固定化酶净化污水 237
四、对环境中毒物的监测 237
第七节 酶在能源开发中的应用 237
一、概述 237
二、由纤维素发酵生产乙醇 238
三、由葡萄糖发酵生产氢 238
四、微生物发酵生产甲烷 238
五、生物化学电池 239