《生物化学实验》PDF下载

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  • 作  者:史锋主编
  • 出 版 社:杭州:浙江大学出版社
  • 出版年份:2002
  • ISBN:7308030253
  • 页数:196 页
图书介绍:本书是高等院校生物化学课程的实验用书,内容包括糖、蛋白质、酶、核酸、维生素、代谢等六部分。每个实验包括实验目的和要求、基本原理、实验步骤、结果与计算、实验教材、仪器与试剂、思考题等。

第一部分 糖类 1

实验一 3,5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖和总糖 1

实验二 蒽酮比色定糖法 4

实验三 费林(Fehling)试剂热滴定定糖法 6

实验四 SHS 碱性铜试剂法滴定还原糖 9

实验五 Somogyi 铜试剂比色法测定还原糖 14

实验六 血糖的测定 17

实验七 糖的分离鉴定——硅胶 G 薄层层析法 20

第二部分 蛋白质 27

实验一 蛋白质的基本性质 27

Ⅰ.蛋白质的两性反应和等电点的测定 27

Ⅱ.蛋白质的沉淀、变性反应 29

实验二 从牛奶中分离制备酪蛋白 33

实验三 氨基酸的分离与鉴定——滤纸层析法 35

实验四 乙酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白 38

实验五 蛋白质相对分子质量(Mr)的测定——凝胶层析法 43

实验六 葡聚糖凝胶层析法分离蛋白质 54

实验七 聚丙烯酰胺凝胶电泳 57

Ⅰ.聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离血清蛋白 61

Ⅱ.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的相对分子质量(Mr) 65

Ⅲ.聚丙烯酰胺凝胶平板等电聚焦电泳测定蛋白质等电点 72

实验八 蛋白质浓度的测定 83

Ⅰ.凯氏定氮法测定蛋白质含量 83

Ⅱ.双缩脲法测定蛋白质含量 86

Ⅲ.福林-酚试剂法测定蛋白质含量 88

Ⅳ.紫外吸收法测定蛋白质含量 91

Ⅴ.考马斯亮蓝法测定蛋白质含量 92

第三部分 酶 94

实验一 酶的基本性质 94

Ⅰ.酶的特性——底物专一性 94

Ⅱ.影响酶活性的因素(1)——激活剂和抑制剂 97

Ⅲ.影响酶活性的因素(2)——pH,最适 pH 测定 99

Ⅳ.影响酶活性的因素(3)——温度,最适温度测定 102

实验二 用正交法测定几种因素对酶活力的影响 106

实验三 蛋白水解酶活力的测定 111

实验四 不同植物不同生长发育期蛋白质组学研究 114

Ⅰ.不同植物 SOD 提取及其同工酶的分离与活性染色 115

Ⅱ.植物不同生长发育期过氧化物酶同工酶谱分析 123

第四部分 核酸 129

实验一 核酸的提取 129

Ⅰ.肝脏 DNA 的提取 129

Ⅱ.酵母 RNA 的提取——苯酚法 132

Ⅲ.酵母 RNA 的提取——浓盐法 133

实验二 核酸含量的测定 135

Ⅰ.紫外吸收法测定核酸含量 135

Ⅱ.二苯胺显色法测定 DNA 含量 137

Ⅲ.定磷法测定 RNA 含量 138

Ⅳ.苔黑酚法测定 RNA 含量 140

实验三 质粒 DNA 的提取及鉴定 143

Ⅰ.质粒 DNA 的小批量提取 143

Ⅱ.DNA 的琼脂糖凝胶电泳 146

Ⅲ.质粒 DNA 限制性酶消化 148

实验四 植物材料基因组 DNA 多态性分析 151

Ⅰ.水稻基因组 DNA 的提取纯化 151

Ⅱ.随机扩增多态性 DNA 技术 153

Ⅲ.基因组 DNA 多态性分析 158

第五部分 维生素 161

实验一 维生素 C 的定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法) 161

实验二 维生素 B1的定量测定 165

第六部分 代谢 175

实验一 生物氧化(一) 175

Ⅰ.脱氢酶的一般性质鉴定 175

Ⅱ.多酚氧化酶的性质鉴定 176

实验二 生物氧化(二) 178

Ⅰ.需氧脱氢酶的性质鉴定 178

Ⅱ.琥珀酸脱氢酶及丙二酸的抑制作用 178

实验三 脂肪酸的 β-氧化作用 181

实验四 肌糖元的酵解作用 184

实验五 血清谷丙转氨酶(SGPT)测定(King 氏法) 187

实验六 氨基移换反应及其产物的鉴定 191

参考文献 194