目 录 1
附页：彩图 1
第一章 基因工程的理论依据与发生发展 1
一、分子生物学与基因工程（Genetic Engineering）的概念和意义 2
二、基因工程诞生的历史背景 3
三、基因工程的理论依据和技术特点 4
四、基因工程的研究成就与展望 13
五、诺贝尔奖（Nobel Prize）与分子生物学 19
第二章 基因工程实验室的装备 21
一、实验室的基本要求 22
二、水的净化装置 22
三、离心机实验室 22
四、电泳技术（Electrophoresis） 25
五、层析技术（Chromatography） 28
六、DNA合成仪 29
七、DNA测序仪 29
八、PCR仪 30
九、核素实验室 30
十、细胞培养室 30
十一、其他 32
第三章 核酸的结构、功能与纯化 33
一、核酸的种类、结构、分布与功能概述 34
二、DNA、基因与染色体的分子解剖学 34
三、核仁、核糖体与RNA 39
四、DNA的纯化、浓缩、沉淀、定量、贮存 45
第四章 DNA的复制、修复与分离、提取 48
一、DNA的复制—半保留复制（Semiconservative Replication） 49
二、DNA的损伤与修复 58
三、逆转录（ReverseTranscription） 60
四、核酸的分离提取 62
五、从全血中提取白细胞DNA 62
六、真核细胞染色体DNA的制备 63
七、质粒和噬菌体DNA的提取与纯化 64
八、DNA片段的分离与纯化 66
九、真核细胞RNA的分离与纯化 67
十、mRNA的分离与纯化 68
十一、核酸的快速分离与纯化 68
第五章 基因克隆技术 71
一、概述 73
二、基因克隆（Gene Cloning）的概念 73
三、制备目的基因 74
四、DNA的切断与连接—DNA限制性内切酶（Restriction Enzymes） 76
五、目的基因和载体连接，制成DNA重组体 79
六、将DNA重组体导入宿主细胞 88
七、DNA重组体的筛选与鉴定 90
八、基因克隆的应用 92
九、基因组文库（genomic library）的构建 93
十、eDNA文库的构建 94
第六章 DNA的变性复性与聚合酶链反应（PCR） 95
一、DNA的变性与复性 97
二、PCR技术的概念与意义 98
三、PCR的基本原理和标准条件 99
四、PCR反应模板的准备 100
五、PCR反应引物设计 102
六、耐热DNA多聚酶（Taq DNA polymerase） 102
八、 PCR反应条件的选择与自动化操作 103
七、PCR反应缓冲液及核苷酸底物 103
九、PCR扩增产物的分析与鉴定 104
十、预防假阳性与假阴性—PCR污染问题 105
十一、PCR技术的种类与发展 105
十二、PCR技术的应用 111
第七章 核酸分子探针的标记 116
一、核酸探针与分子杂交的概念 117
二、核酸分子探针的种类、特性及其制备方法 117
三、标记物的种类及其特性 119
四、各种标记方法及其选择 121
五、标记探针的结合率、产量及比放射活性的测定 131
六、标记探针的纯化 131
第八章 核酸分子杂交技术 132
二、固相液相杂交亦称膜上印迹杂交 133
一、概念 133
三、核酸原位杂交技术 142
第九章DNA序列测定 149
一、概述 150
二、Maxam-Gilbert化学降解法 151
三、Sanger的酶法 152
四、利用PCR及银染法测序 163
五、杂交测序（SBH）和套式链杂交测序（SNSH） 163
六、RNA序列测定 164
七、DNA序列的计算机处理 165
第十章DNA的人工化学合成 168
一、概述 169
二、DNA的酶促合成 170
三、DNA化学合成原理 171
四、DNA的合成方法、纯化及鉴定 176
五、DNA化学合成的应用 178
第十一章 原核与真核基因表达 181
一、概述 182
二、基因的转录与转录后加工 182
三、基因的翻译或蛋白质的生物合成 190
四、外源基因在原核细胞中的表达 195
五、外源细胞基因在真核细胞中的表达 201
第十二章 转基因动物 204
一、概述 205
二、建立转基因动物的方法 205
三、转基因鼠系的建立与鉴定 212
四、转基因动物的应用 213
第十三章 基因工程抗体技术 216
二、嵌合抗体的制备 217
一、概述 217
三、小分子抗体的制备 223
四、噬菌体抗体库技术（Phage antibody library technique） 226
第十四章 基因诊断技术 234
一、基因诊断的概念与特点 235
二、基因诊断的理论基础与内容 236
三、基因诊断的方法 238
四、基因诊断在临床医学中的应用 242
第十五章 人类疾病的基因治疗技术 250
一、概述 251
二、基因转入的方法 253
三、基因治疗方法的设计 257
四、遗传病的基因治疗 259
五、肿瘤的基因治疗 261
六、病毒性感染的基因治疗 263