第一章 吸收光谱法 1
第一节 吸收光谱 1
第二节 光吸收的基本定律——Lamber-Beer定律 5
第三节 分光光度计简介 8
第四节 吸收光谱法的应用 12
实验一 血红蛋白和氧合血红蛋白吸收光谱的测定 16
实验二 血液葡萄糖测定(邻甲胺法) 17
实验三 血白质含量的测定 20
实验四 血清胆固醇的测定(氯化铁法) 26
实验五RNA含量的测定 28
实验六 DNA含量的测定 31
实验七 血清过氧化脂质的 33
第二章 电泳技术 36
第一节 电泳的基本原理 36
第二节 影响电泳速度的因素 37
第三节 常用的电泳支持介质 39
第四节 电泳后的染色 43
实验八 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳 46
实验九 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 48
实验十 血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳 50
实验十一 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的分子量 55
实验十二 聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳测定蛋白质的分子量 59
实验十三 等电聚焦电泳测定蛋白质的等电点 63
实验十四 血清载脂蛋白B的免疫定量测定(单向火箭免疫电泳法) 66
第一节 概述 68
第三章 层析法 68
第二节 吸附层析 69
第三节 分配层析 72
第四节 离子交换层析 73
第五节 凝胶层析 76
第六节 亲和层析 80
实验十五 氨基酸的纸层析 83
实验十六 糖的薄层层析 85
实验十七 凝胶层析分离血红蛋白与鱼精蛋白 87
实验十八 离子交换层析分离混合氨基酸 89
实验十九 亲和层析法分离人因浆纤溶酶原 92
实验二十 血浆免疫球蛋白IgG的分离提纯与鉴定 95
第四章 酶学分析 101
第一节 酶的分离纯化 101
第二节 酶的活力测定 102
第三节 酶促反应动力学 104
第四节 酶法分析 106
第五节 同工酶 109
第六节 酶在医学上的应用 109
实验二十一 血清谷-丙转氨酶(ALT)活性的测定(改良Mohun法) 111
实验二十二 血清乳酸脱氢酶活性的测定 115
实验二十三 底物浓度对酶活性的影响——碱性磷酸酶Km值的测定 118
实验二十四 酶法测定血清胆固醇含量 121
实验二十五 酶法测定血液葡萄糖含量 123
实验二十六 血清乳酸脱氢酶同工酶测定——琼脂糖凝胶电泳法 125
第二节 核酸分离提取的基本方法 128
第一节 核酸分离提取的原则 128
第五章 分子生物学实验基本技术 128
第三节 核酸的鉴定 132
第四节 限制性核酸内切酶及其应用 135
实验二十七 外周血白细胞DNA的提取(NaI法) 137
实验二十八 真核基因组DNA的分离纯化 139
实验二十九 DNA的琼脂糖凝胶电泳 141
实验三十 质粒DNA的小量快速制备(碱变性裂解法) 143
实验三十一 质粒DNA的限制性内切酶消化酶解 145
实验三十二 真核组织RNA的制备 146
附录一 生物化学实验守则 148
附录二 玻璃仪器的洗涤与干燥 149
附录三 生化实验样品的制备 151
附录四 试剂的分级、配制与保存 153
附录五 常用缓冲液的配制方法 155
附录六 易变质及特殊试剂的保存方法 161
附录七 一些常见蛋白质分子量参考值 162
附录八 一些常见蛋白质等电点参考值 163