上篇 1
第1章 生物技术药物发展现状 3
第1节 生物技术药物的开发和应用 4
一、生物技术药物关键技术的发展 4
二、生物技术药物应用现状 8
第2节 国外生物技术药物研究开发现状 11
一、美国生物技术药物研究开发现状 11
二、日本生物技术制药发展现状 42
四、古巴生物技术制药发展现状 49
三、欧洲国家生物技术制药发展现状 49
第3节 我国生物技术药物研究开发现状 50
一、基因工程药物 50
二、基因工程抗体 51
三、核酸药物与基因治疗 52
四、干细胞与组织工程 53
五、基因工程疫苗 55
一、我国生物技术药物发展的成功经验和存在的问题 60
第4节 面对新的国际形势中国生物技术药物发展战略 60
二、面对挑战应采取的战略对策 62
第5节 我国生物技术药物研究开发和注册的程序 64
第2章 基因工程药物的上游及中试研究 67
第1节 基因工程药物的上游研究 67
一、目的基因的获得和功能研究 67
二、目的基因研究的相关检测及鉴定 71
三、表达载体的构建和筛选 71
第2节 基因工程药物的中试研究 75
一、中试研究的概念及原则 75
二、发酵、纯化、复性等工艺研究 76
三、建立质控方法并形成完善的质控标准 80
四、中试样品复核检定的基本要求 82
第3章 生物技术药物质量控制 85
第1节 概述 85
一、生物技术药物分类及质量标准研究依据和现状 85
二、国外生物技术药物质量标准的制定要求 88
第2节 生物技术药物产品的质量控制 91
一、生物学活性测定和比活性 92
二、蛋白质纯度检查 99
三、蛋白质含量测定 101
四、蛋白质药物理化性质的鉴定 105
五、蛋白质的二硫键分析 111
六、对糖蛋白的特殊要求 111
七、残余杂质检测 113
八、安全性及其他检测项目 116
九、生物技术药物待测样品保存 118
第3节 其他类型生物技术药物的质量控制问题 118
一、单克隆抗体 118
二、基因药物 119
三、基因工程疫苗 120
四、特殊剂型的蛋白质药物 120
五、聚乙二醇化蛋白质和多肽药物 121
六、合成多肽类药物 123
七、小结 124
第4章 生物技术药物检测方法的验证 128
第1节 生物技术药物检测方法的特点和种类 128
一、生物技术药物及其检测方法的特点 128
二、生物技术药物检测方法的来源 128
三、生物技术药物特殊的检测方法 129
第2节 生物技术药物检测方法的验证要求 129
一、方法的专属性 129
二、线性 130
三、测定范围 131
四、准确性 131
五、精密度 132
六、检测限度 133
七、定量限度 133
八、耐用性 134
九、系统适用性试验 134
第3节 生物技术药物生物学活性测定方法的验证 135
一、生物学活性测定方法验证应考虑的几个问题 135
十、生物测定的特殊性 135
二、采用96孔板测定生物学活性方法的验证 136
第5章 生物技术药物标准物质的研究方法 139
第1节 关于药品标准物质的概述 140
一、药品标准物质的历史 140
二、药品标准物质的必备条件 142
第2节 生物标准物质的研究 143
一、生物标准品效价的表示方法 143
三、国际生物标准物质的分类与制备情况介绍 144
二、建立生物标准物质的必要性 144
第3节 生物学效价测定用国家标准物质制备 154
一、生物标准物质原料的选择 154
二、生物标准物质的分装熔封 155
第4节 基因工程药物标准品的质量要求 156
一、原料检定 156
二、成品检定 156
三、标准品制备基本要求 157
四、协作研究与协作标定 158
五、稳定性试验和保管要求 163
六、rhTNF-a 国家标准品的研究实例 163
第5节 新生物技术药物开发研究中工作标准品的制备 165
第6章 生物技术药物申报资料的要求 167
第1节 生物技术药物注册资料的技术要求(药学部分) 167
一、上游研究工作总结 167
二、生产工艺研究资料 169
三、制剂研究资料 169
四、表达产物结构确证资料 170
五、中试产品质量研究资料 171
六、中试产品制造和检定记录 172
七、制造和检定规程草案及起草说明 173
八、稳定性研究资料 173
第2节 新药受理中形式审查的要求及相关问题 174
一、新药受理中形式审查的意义 174
二、我国现行新药注册流程 175
三、新药受理的形式审查的基本要求 175
四、申报技术资料形式审查中常见问题 177
五、关于做好申报资料的建议 178
第7章 生物技术药物的生物安全性问题 180
第1节 概述 180
一、转基因生物安全性问题的由来 180
二、各国政府和国际社会对生物安全的认识和行动 182
第2节 医药生物技术及其产品的安全性问题及评价 183
一、实验室重组 DNA 试验隐含的生物危害 184
二、基因工程工业化生产的潜在危害 187
四、质粒 DNA 疫苗的安全性问题 189
三、重组活疫苗的安全性问题 189
五、基因治疗的生物安全性问题 190
六、人类细胞，组织与细胞、组织来源产品安全性问题 191
第3节 医药生物技术产品潜在危险的预防措施 192
一、重组 DNA 试验的安全控制措施 193
二、DNA 疫苗质量保证指南 194
三、基因治疗考虑要点 195
四、FDA 对人类细胞，组织及细胞、组织来源产品的安全管理 196
五、国际医药生物技术及其产品安全管理法规和技术指南 198
六、我国医药生物技术及其产品安全管理法规和技术指南 200
第4节 展望和建议 200
附1 基因工程安全管理办法 202
附2 有关生物安全的部分重要网址 206
第8章 生物技术药物生产 GMP 要求 207
第1节 概述 207
第2节 药品 GMP 的形成与发展 207
二、机构与人员 209
一、总则 209
第3节 生物技术药物生产质量管理规范的基本内容 209
三、厂房与设施 210
四、设备 214
五、物料 215
六、卫生 217
七、验证 218
八、文件 222
九、生产管理 223
十、质量管理 225
十一、产品销售与收回 227
十二、投诉与不良反应报告 227
十三、自检 228
十四、附则 228
十五、药品生产质量管理规范附录 229
第4节 药品 GMP 认证管理办法 233
一、认证申请 233
二、资料审查与现场检查 233
三、审批与发证 233
四、监督管理 234
第5节 药品 GMP 认证工作程序 234
一、职责与权限 234
二、认证申请和资料审查 234
三、制定现场检查方案 234
四、现场检查 235
五、审核与批准 235
第1节 概述 237
第9章 生物技术药物病毒清除灭活及其验证 237
第2节 潜在的病毒污染源与病毒污染的预防 238
一、潜在的病毒污染源 238
二、病毒污染的预防 239
第3节 灭活与清除病毒的方法 242
一、灭活与清除病毒方法的选择及考虑 242
二、常用的去除/灭活病毒的方法 244
第4节 去除与灭活病毒效果的验证 248
一、去除与灭活病毒验证病毒的选择 249
二、去除与灭活病毒效果验证试验的设计 250
三、关于去除与灭活病毒验证的说明 252
四、病毒清除研究的局限性 254
五、病毒清除研究的统计学分析 255
六、去除与灭活病毒方法的再验证 256
第5节 病毒检测方法及应用 256
附1 精制人白细胞干扰素低 pH 法和低温酸乙醇法灭活水泡性口炎病毒效果验证报告 259
附2 精制人白细胞干扰素低 pH 法和低温酸乙醇法灭活 SINDBIS 病毒效果验证报告 260
一、GLP 的发展历史 262
第10章 生物技术药物安全性评价及 GLP 规范 262
第1节 前言 262
二、GLP 的制定过程 263
三、发达国家 GLP 的发展及相互承认协议 264
四、中国 GLP 的发展过程 264
第2节 GLP 的概要 265
一、GLP 试验范围 265
二、规范的概要 265
三、GLP 制定的目的 267
二、生物技术药物的安全性试验指导原则 269
第3节 国际药品注册协调组织(生物技术药物安全性实验指导原则) 269
一、简介 269
第4节 生物技术药物安全性评价方案及试验要求 275
一、概要 275
二、一般性要求 275
三、安全性试验要求 275
第11章 生物技术药物的安全性评价 278
二、对受试品的要求 279
第1节 蛋白和多肽类药物的安全性评价要求及特点 279
一、主要研究目的 279
三、一般原则 280
四、各项试验 282
第2节 基因治疗的安全性评价要求及特点 287
一、研究目的 287
二、临床前研究实验设计的一般问题 288
三、动物种属的选择和替代动物的使用 288
四、体细胞和基因修饰的细胞治疗 289
五、载体直接导入 290
六、申报资料尚应涉及的内容 293
第12章 生物技术药物的药代动力学研究 295
第1节 前言 295
一、药代动力学研究的目的和意义 295
二、生物技术药物的药代动力学特点 295
第2节 生物技术药物药代动力学研究的方法学 295
一、放射性核素标记示踪法 296
二、免疫分析法 297
三、生物检定法 298
第3节 实验设计中的基本技术要求 298
第4节 研究报告的内容要求 299
第5节 生物技术药物评价中毒代动力学的研究方法 300
一、概要 300
二、毒代动力学研究的目的和主要参数 300
三、毒代动力学研究中实验设计的一般原则 301
一、什么是委托研究机构 305
二、为什么需要委托研究机构 305
第13章 国内外生物技术药物注册中委托研究机构的作用 305
第1节 委托研究机构的功能 305
三、委托研究机构的发展历史 306
四、委托研究机构的资源构成 307
五、委托研究机构在生物技术药物注册中的作用 308
四、制备临床用药 309
三、承担部分研究工作 309
一、药物临床研究咨询、策划与监督 309
二、承担非临床实验 309
第2节 委托研究机构的主要服务内容 309
五、新药研究方案和申报文件咨询 310
六、注册代理 310
七、其他 310
第3节 ORO 发展趋势和面临的挑战 310
一、CRO 的发展趋势 310
二、CRO 所面临的挑战 311
三、我国 CRO 的发展机遇 311
第14章 实验动物质量及动物源性药物外源病毒的检测 313
第1节 实验动物的质量控制 313
一、实验动物的质量标准 313
二、影响实验动物的生物因素及其控制 321
三、影响实验动物的环境因素及其控制 323
第2节 动物源性药物中外源病毒的检测 325
一、实验动物在药物生产中的应用 325
二、动物源性药物的安全性 329
三、动物源性药物中病毒污染的检测技术 330
四、动物源性药物的质量管理 334
第15章 生物技术药物质量研究相关仪器设备 337
第1节 高效液相色谱仪 337
一、色谱柱 337
二、检测器 339
三、柱温箱 342
第2节 电泳及相关设备 344
一、毛细管电泳仪 344
二、双向凝胶电泳仪 347
第3节 氨基酸序列测定仪 348
一、N 末端氨基酸序列测定仪 348
二、C 末端肽段分馏仪 349
第4节 质谱仪 350
第5节 聚合酶链反应技术与相关仪器 353
第6节 流式细胞仪 355
一、紫外-可见差光谱 356
第7节 用于蛋白质结构分析的部分仪器 356
二、圆二色谱仪 357
三、傅里叶红外光谱仪与激光拉曼光谱仪 357
下篇 359
第16章 基因工程细胞因子类药物 361
第1节 白细胞介素 361
一、白细胞介素-1 361
二、白细胞介素-2 365
三、白细胞介素-3 371
四、白细胞介素-4 374
五、白细胞介素-5 380
六、白细胞介素-6 385
七、白细胞介素-7 389
八、白细胞介素-8 393
九、白细胞介素-9 397
十、白细胞介素-10 400
十一、白细胞介素-11 402
十二、白细胞介素-12 408
十三、白细胞介素-13 411
十四、白细胞介素-14 413
十五、白细胞介素-15 415
十六、白细胞介素-16 420
十七、白细胞介素-17 422
十八、白细胞介素-18 424
十九、其他白细胞介素 426
第2节 干扰素 427
一、IFN 的定义与分类 427
二、α干扰素 428
三、β干扰素 433
四、γ干扰素 435
第3节 肿瘤坏死因子 437
一、肿瘤坏死因子-α 437
二、肿瘤坏死因子-β 441
第4节 造血生长因子 443
一、粒细胞集落刺激因子 443
二、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 448
三、巨噬细胞集落刺激因子 453
四、干细胞因子 456
五、红细胞生成素 460
六、血小板生成素 464
第5节 促生长因子 466
一、表皮生长因子 466
二、成纤维细胞生长因子 470
三、神经生长因子 475
四、肝再生增强因子 480
五、血管内皮生长因子 483
六、转化生长因子-β 486
第4节 其他细胞因子 490
一、巨噬细胞炎性蛋白-1α 490
二、单核细胞趋化蛋白 493
三、白血病抑制因子 496
四、抑瘤素 M 498
二、溶栓原理及溶栓特异性 504
一、基因工程溶栓药物的研究状况 504
第1节 概述 504
第17章 基因工程溶栓药物 504
三、生物来源的溶栓药物 505
第2节 各类基因工程溶栓药物 507
一、链激酶 507
二、组织型纤溶酶原激活剂 510
三、瑞替普酶 514
四、TNK-tPA 516
五、尿激酶原 519
六、葡激酶 522
七、水蛭素 525
第18章 基因工程激素类药物 531
第1节 重组人胰岛素及类似物 531
一、重组人胰岛素 531
二、重组人胰岛素类似物 537
第2节 重组人生长激素 538
一、生物合成高血糖素 542
第3节 生物合成高血糖素及类似肽 542
二、生物合成高血糖素类似肽 545
第4节 重组鲑鱼降钙素 546
第5节 重组人甲状旁腺激素 548
第6节 重组人促卵泡刺激素 a 549
一、理化性质和结构功能 553
二、生物学功能 553
第1节 重组激活的人凝血因子Ⅶ 553
第19章 基因工程凝血因子类药物 553
三、临床应用 554
四、质量控制标准 554
第2节 重组人凝血因子Ⅶ 555
一、生产工艺 556
二、理化性质与结构功能 556
三、生物学功能 557
四、临床应用 557
五、质量控制标准 558
第3节 重组人凝血因子Ⅸ 559
一、生产工艺 560
二、理化性质和结构功能 560
三、生物学功能 561
四、临床应用 561
五、质量控制标准 562
第20章 肿瘤血管生成抑制剂类药物 565
第1节 肿瘤与血管生成 565
第2节 血管生成抑制剂对肿瘤的抗血管生成治疗作用 566
第3节 血管抑素和内皮抑素 568
一、基本结构 568
二、抗肿瘤作用 569
三、来源和作用机制 570
四、临床应用前景 571
第4节 血管生成抑制剂类药物的质量控制 571
三、生物学功能 576
二、结构和理化特性 576
一、来源 576
第1节 超氧化物歧化酶 576
第21章 其他生物技术药物 576
四、生物学活性测定 577
五、质量标准 577
六、临床研究 578
七、分子修饰和脂质体研究 579
第2节 重组人肿瘤坏死因子受体-Fc 融合蛋白 579
一、来源 579
二、结构和理化特性 579
三、生物学功能 580
四、生物学活性测定 580
五、质量标准 582
六、临床研究 583
第3节 人降钙素基因相关肽脂质体 583
一、结构和理化特性 583
三、生物学活性 584
四、质量标准 584
二、生物学功能 584
五、临床研究 586
第4节 骨形成蛋白 586
一、BMP 的产生 586
二、BMP 基因 586
三、分子结构和理化特性 587
四、BMP 受体 587
五、生物学功能 588
六、生物学活性测定 589
七、rhBMP2的质量标准 590
八、临床应用 591
九、BMP 的基因工程药物研究 592
第5节 脑利钠肽 592
一、BNP 基因 592
二、分子结构 593
三、生物学活性 593
四、生物学活性的测定 593
五、rhBNP 的临床研究 594
六、rhBNP 的质量标准 595
第6节 心钠素 596
一、ANP 的产生 597
二、分子结构 597
三、生物学功能 597
四、生物学活性测定 598
五、rhANP 的质量标准 598
六、临床应用 599
第22章 基因治疗药物 604
第1节 腺病毒类基因治疗药物 606
一、国内外利用腺病毒进行基因治疗药物研究的现状 606
二、腺病毒的结构与生物学特性 607
三、重组腺病毒载体的产生原理 608
四、重组腺病毒产品的生产工艺举例 609
五、腺病毒类基因治疗药物的质量控制 610
第2节 腺相关病毒类基因治疗药物 613
一、国内外利用腺相关病毒进行基因治疗药物研究的现状 613
二、腺相关病毒的理化特性和制备 613
三、重组腺相关病毒类基因治疗制品的质量控制 616
第3节 反义核苷酸类基因治疗药物 618
一、反义寡核苷酸的作用机制 618
二、反义寡核苷酸的修饰及其用途 619
三、国内外反义寡核苷酸药物开发研究的现状 619
四、反义寡核苷酸药物的质量控制 623
五、小结 630
第4节 裸 DNA 类基因治疗药物 630
一、VEGF 基因治疗药物的国内外研究现状 631
二、VEGF 特性及 VEGF 基因缝线的制作 632
三、VEGF 基因缝线的质量控制 633
第23章 治疗用抗体 638
第1节 绪论 638
第2节 治疗用抗体的种类 639
一、多克隆抗体 639
二、单克隆抗体 639
三、嵌合抗体 639
第3节 治疗用抗体的研究现状 640
四、人源化抗体 640
五、修饰抗体 640
第4节 治疗用抗体的应用 643
一、细菌毒素抗体 643
二、病毒抗体 644
三、抗排斥反应抗体 645
四、其他用途的抗体 645
第5节 治疗用抗体的临床前研究 645
一、药理、毒理学研究 646
二、安全性试验 647
第6节 治疗用抗体的质量控制 648
一、细胞株的质量控制 648
二、鼠源性单克隆抗体的质量控制 650
三、重组人源化和嵌合性单克隆抗体的质量控制 651
第24章 基因工程病毒疫苗 653
第1节 前言 653
一、传统疫苗 654
第2节 病毒疫苗的分类 654
二、现代生物技术疫苗 655
第3节 基因工程病毒疫苗的抗原结构 657
第4节 基因工程病毒疫苗的现状 659
第5节 基因工程病毒疫苗的质量控制 663
第6节 新技术在疫苗检定中的应用 667
第25章 基因工程细菌疫苗 669
第1节 传统细菌疫苗与基因工程细菌疫苗 669
一、传统细菌疫苗介绍 669
二、基因工程细菌疫苗的优势 670
三、基因工程细菌疫苗的生产方法 670
第2节 国内外基因工程细菌疫苗的开发研究进展 671
一、沙门菌为载体的重组活疫苗 671
二、幽门螺杆菌疫苗 672
第3节 基因工程细菌疫苗的质量控制要点 672
二、抗原性检测 673
三、抗体产生试验(免疫力试验) 673
一、质粒 DNA 检测 673
四、豚鼠角结膜毒力试验 674
五、生物学特性 674
六、其他 674
第4节 研制基因工程细菌疫苗需要考虑的几个问题 674
一、致病机制和宿主抗感染免疫机制的研究 674
二、抗原的纯化性及其保护性抗原的复杂化 674
四、细菌疫苗的安全性和有效性 675
五、基因工程技术和传统疫苗研究生产相结合 675
三、选择适当的疫苗免疫预防途径 675
附1 家兔抗体产生试验 676
附2 豚鼠角结膜毒力试验 677
第26章 微生态制剂 678
第1节 国内外微生态制剂发展现状 678
一、概念 678
二、分类 678
三、国外微生态制剂研制及发展 679
四、国内微生态制剂的研制和发展 679
二、发酵培养 681
一、生产用菌种 681
第2节 微生态制剂生产工艺过程及产品的特点 681
三、菌粉制备 682
四、半成品配制 682
五、分包装 682
第3节 微生态制剂成品的质量控制要点及意义 682
第27章 肿瘤疫苗与肿瘤诊断试剂 685
第1节 肿瘤疫苗 685
一、肿瘤疫苗的研究现状 686
三、肿瘤疫苗的质量控制 689
二、肿瘤疫苗的发展趋势 689
第2节 肿瘤标志物检测试剂 691
一、肿瘤标志物的定义 692
二、肿瘤标志物的分类 692
三、肿瘤标志物检测在临床上的应用 692
四、肿瘤标志物检测试剂的质量控制 693
第3节 肿瘤的基因诊断试剂 696
一、干细胞工程 698
第1节 干细胞产品 698
第28章 干细胞工程和体细胞治疗 698
二、干细胞研究的进展和现状 700
三、干细胞的临床应用前景 703
四、干细胞产品的质量控制研究 704
第2节 体细胞治疗产品 705
一、体细胞治疗产品的管理 705
二、体细胞治疗产品的研究现状和质量控制 705
第2节 血液代用品的研究开发现状 711
一、概述 711
第1节 概述 711
第29章 血液代用品 711
二、血红蛋白的化学修饰与血液代用品 712
三、红细胞类代用品 715
四、血红蛋白类血液代用品的临床研究进展 715
第3节 血红蛋白类血液代用品的特性与制造 715
一、结构与特性 715
一、血液代用品质量评价与控制的现状 716
二、制造 716
第4节 血红蛋白类血液代用品的质量评价与控制 716
二、产品质量评价与控制的原则 717
三、血红蛋白类血液代用品评价与控制的指标与方法 718
第30章 生物芯片 724
第1节 生物芯片的定义和分类 724
一、定义 724
二、分类 724
第2节 生物芯片技术的基本原理 726
一、基本原理(以基因芯片为例) 726
二、生物芯片制备流程 727
第3节 基因芯片的应用 727
一、基因表达检测 727
二、寻找新基因 728
三、DNA 测序 728
四、突变体和多态性的检测 729
五、基因诊断 730
六、药物(中药)筛选 731
第4节 国内外研究进展 732
一、基因芯片 732
二、蛋白质芯片 734
三、芯片实验室 735
第5节 医用生物芯片的质控要点 735
一、载体的要求 735
二、被固定于芯片上生物活性物质的质量要求 735
三、芯片制作过程的控制 736
四、待检样品处理的控制 737
五、样品与芯片结合过程的控制 738
六、检测结果的分析和判定 738
七、医用生物芯片全过程质量控制 740
第6节 当前研究开发中存在的问题 742
附录1 rhEndostatin 临床前药代动力学研究报告 745
附录2 理化特性一览表 762
附录3 缩略语 791
附录4 索引 801