第一章 落千丈绪论 1
第一节 哺乳动物胚胎学的研究内容与应用 1
一、研究内容 1
（一）个体发育时期的划分 1
1．胚前发育 1
2．胚胎发育 1
3．胚后发育 1
（二）哺乳动物胚胎学的研究内容 2
1．生殖细胞的来源和发育、成熟 2
2．受精过程 2
3．附植或着床前的胚胎发育 2
4．附植或着床后的胚胎发育 3
5．胚胎工程技术 3
二、应用前景及与其它学科的关系 5
（一）与相关学科的联系 5
1．解剖学和组织学 5
2．发育生物学 5
3．生殖生物学 5
4．产科学 6
5．病理学 6
6．分子细胞生物学 6
7．遗传学 6
（二）哺乳动物胚胎学在动物生产和生物医学上的应用 7
1．在动物生产上的应用 7
2．在生物医学上的应用 8
第二节 哺乳动物胚胎学的发展简史与研究前景 9
一、发展简史 9
（一）哺乳动物胚胎学的兴起 9
（二）哺乳动物胚胎学的复兴 9
（三）20世纪以来的哺乳动物胚胎学 11
（四）实验胚胎学与哺乳动物胚胎工程 12
二、研究前景 14
（一）基础理论研究 14
1．原生殖细胞的起源与性别分化 14
2．卵和精子的成熟机制 14
3．受精生物学的研究 14
4．卵裂开始到附植前的发育 14
5．附植前和附植早期命运图谱的研究 14
6．器官形成与组织发生的研究 14
（二）应用方面的研究 14
1．配子的培养和保存 15
2．试管动物 15
3．克隆动物 15
4．转基因动物 15
第三节 哺乳动物胚胎学的研究方法 15
一、形态学研究方法 16
（一）活体和体外培养观察法 16
1．活体颜料和荧光颜料处理观察法 16
2．缩时电影和显微录像法 16
（二）细胞和组织学观察法 16
1．生殖细胞的减数分裂分析和早期胚胎染色体检查 16
2．放射自显影技术 16
3．组织化学和免疫细胞化学技术 17
4．电子显微镜技术 18
二、机能学研究方法 18
（一）生存环境的研究方法 18
1．胚胎代谢研究法 18
2．早期胚胎子宫输卵管环境研究法 18
（二）分子生物学方法 19
1．核酸分离法 19
2．电泳技小 19
3．胚胎组织切片的原位杂交 19
4．cDNA文库的构建 19
三、实验胚胎学方法 20
（一）早期胚胎的实验胚胎学方法 20
1．显微操作 20
2．免疫手术 20
3．免疫学研究法 20
（二）后期胚胎的实验胚胎学方法 21
1．放射自显影方法 21
2．后期胚胎的分离和培养 21
第四节 中国哺乳动物胚胎学的成就 22
一、实验动物和野生动物胚胎学 22
（一）实验动物胚胎学 22
1．小鼠 22
2．大鼠 24
3．家兔 24
（二）野生动物胚胎学 25
二、家畜胚胎学 26
（一）猪 26
（二）羊 28
（三）牛 30
三、灵长类胚胎学 32
（一）猴 32
（二）人 32
1．配子形成 32
2．受精、卵裂、囊胚形成和植入 33
3．胚层分化与胚体形成 33
4．组织发生 33
5．器官发育 34
6．胚胎工程的研究 35
参考文献 35
第二章 生殖细胞 41
第一节 原生殖细胞 42
一、原生殖细胞的起源 42
二、原生殖细胞的迁移 42
三、原生殖细胞的细胞化学与结构特征 44
（一）碱性磷酸酶的活性 44
（二）过碘酸雪夫反应 45
（三）细胞器 46
1．内质网 46
2．高尔基复合体 46
3．核蛋白体 46
4．中心粒 46
5．中心致密泡 46
四、原生殖细胞的发育和分化 46
第二节 生殖细胞的结构和发育 47
一、雌性生殖细胞的结构和发育 47
（一）卵原细胞 48
1．卵原细胞的来源 48
2．卵原细胞的形态结构 48
3．细胞间的联络 49
4．卵原细胞的增殖 50
5．卵原细胞的变性 52
（二）卵母细胞 53
1．卵泡与卵母细胞发育阶段的划分 53
2．不同发育阶段卵母细胞的结构特征 54
3．细胞间的相互关系 59
（三）卵母细胞的物质合成与成熟分裂 60
1．卵母细胞成熟过程中生理生化变化 60
2．卵母细胞的成熟 62
（四）卵母细胞的老化和凋亡 67
1．卵母细胞的老化 67
2．卵母细胞的凋亡 67
（五）卵母细胞成熟过程中的基因表达 68
1．核糖核酸的转录与翻译 68
2．某些特异性基因及其表达 68
二、雄性生殖细胞的结构和发育 70
（一）精子的发生 70
1．精子发生的规律和过程 71
2．曲细精管中的各种组成成分 72
3．生精上皮细胞组合规律 74
4．精子发生中的激素作用 74
（二）生精细胞的结构 75
1．精原细胞 75
2．初级精母细胞 75
3．次级精母细胞 75
4．精子细胞 75
5．精子 76
（三）精子的形成 80
1．细胞核的变化 80
2．细胞器的变化 80
（四）精子发生中的核酸和蛋白质合成 83
1．核酸合成 83
2．蛋白质合成 83
（五）精子发生中的细胞凋亡 83
1．精原细胞的凋亡 84
2．精母细胞的凋亡 84
3．精子细胞的凋亡 84
（六）精子发生过程中的基因表达与调控 84
1．基因表达 84
2．基因表达的调控 85
参考文献 85
第三章 受精 90
第一节 精子在附睾内成熟与排放 91
一、精子在附睾内成熟 91
（一）精子进入附睾管 91
（二）附睾管中精子的密度 91
二、精子运动能力的获得 91
（一）精子代谢活动的变化 91
（二）精子获得受精能力的部位 92
三、精子成熟过程中质膜的变化 92
（一）质膜结构的改变 92
（二）质膜化学成分的变动 93
第二节 精子获能&． 94
一、精子运行与生存时间 95
（一）精子被运送于雌性生殖道 95
（二）精子生存时间与受精能力的保持时间 96
二、精子的体内和体外获能 97
（一）精子的体内获能 97
（二）精子的体外获能 97
三、精子获能时的结构生理变化 98
（一）精子核和顶体的状态 98
（二）离子和代谢的变化 99
四、精子获能的环境条件 100
（一）精子的获能条件 100
（二）精子获能条件的体外实验 101
第三节 精子的顶体反应 101
一、顶体的结构特征和酶的分布 101
（一）精子顶体的种属结构特征 101
（二）精子顶体中酶的分布 102
二、顶体反应的形态学过程及检测方法 102
（一）顶体反应的形态学过程 102
（二）顶体反应的检测方法 104
1．光学显微镜检测方法 104
2．电子显微镜检测方法 104
三、顶体反应的时间和条件 105
（一）顶体反应的部位 105
（二）顶体反应的条件 105
四、顶体反应的分子机制与参与物质 105
（一）顶体反应的分子机制 105
（二）顶体反应的参与物质 107
第四节 精子的超激活运动 107
一、超激活运动的现象与部位 107
（一）超激活运动的现象 107
（二）超激活运动的部位 108
二、超激活运动的机制 108
（一）超激活运动的生理作用 108
（二）超激活运动的分子机制 108
第五节 精子与卵丘的相互作用 109
一、卵丘的某些特性 110
（一）卵丘基质和卵丘细胞 110
（二）卵丘的作用 110
二、精子穿入卵丘 110
（一）精子穿入卵丘与获能的关系 110
（二）精子穿卵丘的抑制 113
（三）顶体透明质酸酶的功能 113
第六节 精子与透明带的相互作用 113
一、透明带的结构功能特征 114
（一）透明带的形态结构 114
（二）透明带的化学组成 114
（三）透明带的起源 114
二、精子与透明带的结合和穿过 115
（一）精子与透明带结合 115
1．结合的过程 115
2．结合的机制 115
（二）精子穿过透明带 116
1．穿过透明带的过程 116
2．穿过透明带的机制 116
三、精子与卵融合 118
（一）精卵融合过程 118
（二）精卵融合机制 118
第七节 卵的激活 122
一、卵激活的一般情况 122
（一）卵激活的类型 122
1．精子对卵的激活 122
2．自发的卵激活 122
3．人工卵激活 122
（二）皮质颗粒的胞吐 124
（三）激活卵纺锤体和细胞骨架的变化 125
二、卵激活的分子机制 125
（一）激活卵的Ca2＋波动 125
（二）各种方法卵激活的某些区别 126
（三）卵激活的肌醇脂信号通路 127
第八节 多精受精的阻止 128
一、皮质反应 128
（一）皮质颗粒 128
（二）皮质颗粒胞吐 129
二、卵质膜对多精受精的阻止 130
（一）多精受精的阻止 130
（二）阻止多精受精的机制 130
三、透明带反应 131
（一）透明带反应过程 131
（三）透明带反应机制 132
第九节 原核形成和发育 133
一、精核去致密与雄原核形成 133
（一）精核中的蛋白质更替 133
（二）精核的DNA包装 133
（三）精核的去致密 134
二、减数分裂完成与雌原核形成 135
（一）减数分裂完成 135
（二）原核形成 137
（三）雌雄原核融合 139
参考文献 141
第四章 附植前的胚胎发育 144
第一节 卵裂 144
一、卵裂的类型和卵裂的机制 144
（一）卵裂的类型 144
（二）卵裂的特征与分期 145
（三）卵裂的机制 151
二、卵裂阶段卵裂球结构的变化规律 152
（一）胞质结构的变化 152
（二）细胞核的变化 154
三、卵裂胚的致密化与极性化 155
（一）卵裂胚的致密化 155
（二）卵裂胚的极性化 156
四、卵裂球的全能性与发育潜力 156
（一）卵裂球的全能性 156
（二）卵裂球的发育潜力 158
第二节 囊胚形成 159
一、囊胚形成的过程和组成 160
（一）形成过程 160
（二）组成 161
二、囊胚囊腔化和形成机制 162
三、囊胚细胞的分化 163
第三节 原肠作用 164
一、原肠作用的形态发生 164
（一）内胚层的形成和分化 164
（二）胚泡壁的结构和分化 165
（三）胚盘的结构和分化 166
二、原肠作用的细胞运动和机制 169
（一）上下胚层的形成与原基图谱 169
（二）原条处的细胞聚集 171
第四节 哺乳动物早期胚胎发育的基因表达 171
一、早期胚胎发育阶段细胞核和细胞周期的变化 172
（一）细胞核的变化 172
1．核层的改变 172
2．核仁的变化 173
（二）细胞周期的变化 174
二、母型RNA在早期胚胎发育中的变化 175
三、胚胎基因组的启动 176
（一）小鼠和兔的胚胎基因组启动 176
（二）家畜的胚胎基因组启动 177
四、早期胚胎发育的主要基因表达 177
（一）控制核功能的基因表达 177
1．转录因子 177
2．组蛋白 177
（二）细胞骨架成分的基因编码 178
1．肌动蛋白 178
2．微管蛋白 178
3．细胞角蛋白 179
（三）膜小管的基因编码与离子运输 179
1．连接蛋白 179
2．Na+、K+-ATP酶 179
（四）细胞表面蛋白和分泌蛋白的基因编码 180
1．碱性磷酸酶 180
2．细胞外基质 180
3．分泌蛋白酶 180
（五）生长因子及其受体的基因编码 181
1．胰岛素样生长因子 181
2．表皮生长因子 182
3．转化生长因子 182
（六）管家功能的基因编码 183
1．代谢酶类 183
2．金属巯基组氨酸三甲基内盐 183
第五节 附植 184
一、胚胎的间隔和定位 185
（一）胚泡的迁移和定位 185
1．胚泡的迁移 185
2．胚泡的定位 186
（二）附植类型和时期 187
1．表面或中央附植 187
2．偏心附植 188
3．壁内植入 188
二、附植过程中母体胚胎识别 189
（一）抑制黄体退化保护胚胎发育的机制 189
（二）胚胎产生的妊娠识别信号 191
（三）母体胚胎的免疫识别 191
（四）胚胎植入前后某些原癌基因的表达 192
参考文献 192
第五章 胚层分化和组织发生 197
第一节 胚胎细胞分化和胚层形成与分化 197
一、胚胎细胞分化 197
（一）细胞决定 197
（二）细胞分化 198
1．细胞分化的形态功能改变 198
2．细胞分化的调控 199
二、胚层形成与分化 202
（一）胚层形成 202
1．内胚层和外胚层的形成 203
2．中胚层的形成 206
（二）胚层分化 208
1．外胚层的分化 208
2．中胚层的分化 208
3．内胚层的分化 208
第二节 组织发生 210
一、上皮组织的发生 210
二、结缔组织的发生 210
（一）纤维结缔组织的发生 210
（二）软骨组织的发生 211
（三）骨组织的发生 211
1．膜性骨的发生 212
2．软骨性骨的发生 212
（四）血细胞的发生 213
1．卵黄囊造血期 214
2．肝脏造血期 214
3．红骨髓造血期 214
三、肌组织的发生 215
（一）平滑肌的组织发生 215
（二）骨骼肌的组织发生 215
1．前成肌细胞期 215
2．成肌细胞期 215
3．肌管细胞期 215
4．成熟肌细胞期 216
（三）心肌的组织发生 216
四、神经组织的发生 217
第三节 胚体的形态形成 218
一、胚胎基础体形的建立 218
（一）脊索和神经管形成对胚胎体形建立的作用 218
（二）胚体的褶卷 219
（三）胚体的屈曲 219
（四）胚体的扭转 219
二、胚胎形态发生的机制 219
（一）胚胎发育的预定程序及发育调整 220
（二）胚胎发育进程中的相互作用系统和胚胎场 221
（三）胚胎发育进程中细胞骨架系统的作用 221
（四）胚胎发育进程中的细胞运动 223
（五）胚胎发育进程中细胞间的黏合性 224
（六）胚胎发育进程中的细胞相对生长速度 225
（七）胚胎发育进程中的诱导分化作用 226
（八）胚胎发育进程中的细胞凋亡 227
1．特定细胞在发育过程中的凋亡 227
2．四肢芽发育和分化过程中的细胞凋亡 227
3．人胚发育过程中腭部的细胞凋亡 228
4．无用组织退化消失过程中的细胞凋亡 228
参考文献 229
第六章 中、外胚层形成的器官系统 232
第一节 神经系统的形成与分化 232
一、神经板、神经褶和神经管 232
二、神经嵴 233
三、中枢神经系统的形成与分化 234
（一）脑的早期发育与分化 235
1．端脑 236
2．间脑 237
3．中脑 238
4．后脑 238
5．末脑 238
（二）脊髓的早期发育与分化 239
四、周围神经系统的发生 239
（一）传入神经纤维的发生 239
（二）传出神经纤维的发生 239
1．躯体性传出神经纤维的发生 239
2．内脏性传出神经纤维的发生 239
五、神经系统发生的机制 240
（一）行为活动神经网络的发生 240
（二）外周组织对神经系统发生的影响 240
（三）神经细胞的生长与凋亡 240
第二节 感觉器官的形成与分化 241
一、眼的发生 241
二、耳的发生 242
第三节 循环器官的形成与分化 243
一、心脏的发生和发育 243
（一）原始心管的发生 244
（二）心脏外形的演变 245
（三）心脏内部的分隔 247
1．房室管的分隔 247
2．原始心房的分隔 247
3．原始心室的分隔 248
4．动脉干的分隔 249
（四）静脉窦的演变 250
（五）心脏瓣膜的发生 250
（六）心脏传导系统的发生 251
二、血管的发生 251
（一）动脉形成的规律 252
1．动脉弓衍生的动脉 252
2．背主动脉的演变 254
（二）静脉的形成与演变 256
1．前主静脉的演变建成前腔静脉 256
2．后主静脉的演变建成后腔静脉 257
3．脐肠系膜静脉 259
4．脐静脉 259
（三）胎儿血液循环及出生后的变化 259
三、血细胞发生的种属特征 260
（一）卵黄囊造血期 261
（二）肝脏造血期 261
（三）脾、胸腺和淋巴结造血期 261
（四）骨髓造血期 261
四、淋巴管的形成规律 262
第四节 淋巴器官的发生 263
一、淋巴结的发生 263
二、红骨髓的发生 263
三、脾脏的发生 263
第五节 骨骼系统的发生 264
一、中轴骨骼的发生 264
（一）椎骨的发生 264
1．生骨节 期 264
2．软骨期 265
3．骨化期 266
（二）肋骨的发生 267
（三）胸骨的发生 267
（四）颅骨的发生 267
二、四肢骨骼的发生 268
三、关节 的发生 269
第六节 肌肉的形态发生 270
一、骨骼肌群的分化 270
二、心肌的发育 271
第七节 体腔的发生与分隔 272
一、体腔的发生 272
二、体腔的分隔 273
三、系膜的发生 273
第八节 泌尿器官的形成与分化 275
一、三代肾的演化过程与组织发生 275
（一）前肾 275
（二）中肾 276
（三）后肾 278
二、输尿管、膀胱和尿道的形成 281
第九节 生殖器官的形成与组织发生 281
一、生殖腺的发生与分化 282
（一）向睾丸方向分化 282
（二）向卵巢方向分化 284
二、生殖腺的位置变化 285
三、生殖管道的发生与演变 286
（一）向雄性方向分化 286
（二）向雌性方向分化 287
四、外生殖器的演变 288
（一）向雄性方向分化 288
（二）向雌性方向分化 288
五、生殖器官的发育畸形 289
第十节 皮肤及其衍生物的形成与分化 291
一、皮肤的发生 291
二、皮肤衍生物的发生 291
参考文献 294
第七章 内、中、外胚层形成的器官系统 296
第一节 消化器官的发生和分化 296
一、面部和口腔器官的发生 298
（一）面部和唇、颊的发生 298
（二）腭的发生 301
（三）舌的发生 302
（四）齿的发生 303
1．造釉器和釉质的形成 304
2．齿乳头 305
3．齿质的形成 307
4．齿骨质的形成 307
（五）唾液腺的发生 308
二、咽及由其起源器官的发生 309
（一）鳃弓 309
（二）咽的形成及咽囊的衍生物 310
（三）甲状腺的发生 311
（四）甲状旁腺（上皮小体）的发生 311
（五）胸腺的发生 312
（六）扁桃体的发生 313
三、食管的发生 313
四、胃的形成和组织发生 314
五、肠的形成和组织发生 318
六、肝脏的形成和组织发生 322
七、胰的形成和组织发生 324
八、肛门的形成 324
九、关于类囊器官与法氏囊的发生 326
第二节 呼吸器官的发生和分化 326
一、鼻和鼻腔的形成 326
二、喉和气管的发生 327
三、肺的形成与组织发生 328
第三节 主要内分泌器官的发生 329
一、脑垂体的发生与分化 329
二、肾上腺的发生与分化 331
三、胰岛的发生与分化 332
参考文献 333
第八章 胎膜和胎盘及其生理功能 335
第一节 胎膜 335
一、羊膜和绒毛膜 335
（一）羊膜 335
（二）绒毛膜 338
二、尿囊和卵黄囊 339
（一）尿囊 339
（二）卵黄囊 340
三、脐带 341
第二节 胎盘的类型与微细结构 342
一、分散型胎盘 344
（一）猪胎盘的组织结构特点 344
（二）马胎盘的组织结构特点 345
二、绒毛叶型胎盘 346
（一）牛胎盘的组织结构特点 346
（二）羊胎盘的组织结构特点 348
三、环带状胎盘 348
四、盘状胎盘 349
第三节 胎盘的生理功能 351
一、胎盘的保护功能 351
二、胎盘的免疫功能 351
三、胎盘的新陈代谢功能 352
四、胎盘的物质转运功能 352
（一）种属间区别 352
（二）选择性的物质转运 353
1．转运方式 353
2．转运的物质种类 354
3．气体转运 360
4．胎儿代谢产物 361
5．水 361
五、胎盘的内分泌功能 361
（一）妊娠早期 362
1．孕马（驴）血清促性腺激素 362
2．人绒毛膜促性腺激素 363
3．非人灵长类绒毛膜促性腺激素 363
4．豚鼠绒毛膜促性腺激素 364
（二）妊娠中、后期 364
1．孕烯醇酮 364
2．孕酮 364
3．雌激素 365
4．胎盘促乳素 365
参考文献 366
第九章 胚胎日龄学 371
第一节 各种哺乳动物附植前发育日龄比较 371
一、受精 371
二、卵裂胚 372
三、囊胚期及其以后的发育 373
第二节 小鼠的胚胎日龄学 374
第三节 兔的胚胎日龄学 380
一、胚胎期（1～15天） 380
二、胎儿前期（16～24天） 383
三、胎儿期（25～32天） 383
第四节 绵羊的胚胎日龄学 383
一、胚胎期（1～28天） 383
二、胎儿前期（29～45天） 386
三、胎儿期（46～152天） 388
第五节 猪的胚胎日龄学 389
一、胚胎期 389
（一）受精 389
（二）卵裂 389
（三）囊胚期 390
（四）原肠胚期 390
（五）胚体形成期 391
二、胎儿前期或第一胎儿期 394
三、胎儿中期或第二胎儿期 395
四、胎儿后期或第三胎儿期 395
第六节 牛的胚胎日龄学 397
一、胚胎期 397
二、胎儿前期 398
三、胎儿期 398
第七节 人的胚胎日龄学 400
一、胚胎期 400
（一）合子到神经胚前期 401
1．合子期 402
2．卵裂期 402
3．囊胚期 402
4．原肠期 402
5．原条期 402
（二）器官发生期 404
1．早体节 期 404
2．四肢发生期 405
3．后胚胎期 405
二、胎儿期 405
（一）胎儿早期 405
（二）胎儿中期 405
（三）胎儿晚期 406
三、围产期 406
参考文献 406
第十章 分娩 408
第一节 分娩的一般规律 408
一、决定分娩过程的要素 408
（一）产力 408
（二）产道 409
1．软产道 409
2．硬产道 409
（三）胎儿与母体产道的关系 411
1．分娩时胎儿与母体产道的相互关系 411
2．产出前的胎向、胎位和胎势 411
3．产出时胎位、胎势的改变 412
二、分娩过程 412
（一）开口期 412
（二）产出期 413
（三）胎衣排出期 414
第二节 种属间的差异 415
一、牛和羊分娩的特征 415
二、马和驴分娩的特征 416
三、猪分娩的特征 417
四、犬分娩的特征 417
五、猫分娩的特征 418
六、人分娩的特征 418
第三节 分娩的机制 419
一、胎儿的作用 419
（一）胎儿垂体－肾上二腺轴的作用 419
（二）胎儿垂体的功能 420
（三）胎儿肾上腺的功能 422
（四）低等灵长类动物胎儿的作用 423
（五）人胎儿的作用 424
二、胎盘的作用 426
（一）孕酮 426
1．绵羊 426
2．低级灵长类动物 427
3．人 427
（二）雌激素 428
1．绵羊 428
2．恒河猴 429
3．人 429
4．黄体依赖性妊娠的动物 430
三、前列腺素的作用 430
四、子宫肌膜和子宫颈的作用 432
（一）子宫肌膜的结构 433
（二）子宫颈的结构 433
（三）分娩时子宫肌膜的变化 433
（四）分娩时子宫颈的变化 434
（五）类同醇类激素对子宫肌膜和子宫颈的作用 434
1．孕酮 434
2．雌激素 435
（六）前列腺素对子宫肌膜和子宫颈的作用 435
（七）松弛素的作用 436
（八）催产素的作用 436
参考文献 437
第十一章 哺乳动物胚胎生物工程 444
第一节 配子操纵 444
一、精子 444
（一）采精 444
1．人工阴道法 444
2．电刺激法 445
（二）精液的处理 445
1．一般性状检查用精液 445
2．受精用精液 445
3．分析用精液 445
（三）精液的保存 446
1．精液的常温保存法 446
2．精液的低温保存法 446
3．精液的超低温保存法 447
（四）有关精子的其它实验技术 447
1．精子的获能方法 447
2．精子的体外获能检查法 448
3．精子的顶体反应检查法 449
4．精子的电子显微镜检查法 449
二、卵母细胞 450
（一）人工采卵 450
1．诱导采卵 450
2．超数采卵 450
3．采卵方法 450
（二）卵母细胞检查法 452
1．检查标准 452
2．卵母细胞的显微镜检查法 452
3．卵的核相检查法 453
第二节 胚胎操纵的一般方法 453
一、胚胎收集 454
（一）小鼠的胚胎收集 454
1．合子的收集和处理 454
2．2～8细胞胚胎的收集 454
3．桑椹胚和囊胚的收集 454
（二）牛的胚胎收集 455
二、胚胎培养 456
（一）培养系统 456
1．培养用具清洗 456
2．培养条件 456
3．培养液 456
（二）培养过程 458
1．微滴培养法 458
2．输卵管培养法 458
3．中间受体培养法 458
（三）哺乳动物早期胚胎培养现状 458
1．小鼠 459
2．仓鼠 459
3．羊 460
4．猪 460
5．牛 461
6．人 461
三、哺乳动物早期胚胎的某些一般研究方法 462
（一）细胞遗传学研究方法 462
1．精子细胞的染色体制备 462
2．卵母细胞的染色体制备 462
3．原核期胚胎的染色体制备 463
4．附植前各期胚胎的染色体制备 463
5．附植后胚胎的染色体制备 464
6．染色体带型制作 464
（二）胚胎细胞计数法 465
1．空气干燥法 465
2．荧光染色法 465
（三）电子显微镜细胞化学方法 466
1．蛋白质细胞化学 466
2．核酸的细胞化学 466
3．多糖类的细胞化学 466
4．脂类的细胞化学 467
5．酶的细胞化学 467
（四）胚胎显微工具的制作 467
1．固定吸管的制作 468
2．注射吸管的制作 468
四、有关胚胎工程研究的几项分子生物学技术 469
（一）小鼠早期胚胎蛋白质变化的定性分析 469
1．早期胚胎蛋白质标记 469
2．聚丙烯酰胺凝胶电泳 470
3．凝胶电泳分离蛋白的分析 471
（二）培养胚胎细胞的同位素标记 472
1．卵和合子的同位素标记 472
2．同位素标记的定位显示 473
（三）脊椎动物整装胚胎的原位杂交 473
1．探针的制备 473
2．小鼠胚胎的预处理和杂交 473
3．后杂交水洗与抗体孵育 474
4．胚胎干粉的制备 474
5．后抗体洗涤与组织化学 474
（四）附植前小鼠胚胎cDNA文库的构建 474
1．附植前小鼠胚胎RNA含量 474
2．总RNA的分离 475
3．文库的构建和筛选 475
第三节 胚胎移植 476
一、超数排卵和同期发情 477
（一）超数排卵 477
1．实验动物的超数排卵 477
2．家畜的超数排卵 477
3．灵长类的超数排卵 478
（二）同期发情 478
1．小鼠 479
2．羊 479
3．猪 479
4．牛 479
5．人 479
（三）胚胎活力鉴定 479
1．形态学标准 479
2．台盼蓝染色 480
二、胚胎移植 480
（一）受体动物的预处理 480
（二）移植 480
1．小鼠的胚胎移植 481
2．家畜的胚胎移植 482
3．灵长类的胚胎移植 482
第四节 卵母细胞和胚胎的保存 485
一、非冷冻保存法 485
（一）异种动物体内（禽卵内）保存法 485
1．琼脂包埋移植法 485
2．直接移植法 486
（二）卵和胚胎的37℃保存法 486
（三）卵和胚胎的冷藏保存法 486
二、超低温冷冻保存法 487
（一）超低温冷冻保存原理 487
（二）超低温冷冻保存的一般程序 487
（三）超低温冷冻保存方法的种类 488
1．慢速冷冻、慢速解冻法 488
2．快速冷冻、快速解冻法 488
3．一步冷冻法 488
4．快速冷冻法 488
5．玻璃化法 488
（四）几种哺乳动物胚胎超低温冷冻保存方法 489
1．小鼠 489
2．兔 489
3绵羊 489
4．山羊 489
5．马和猪 489
6．牛 490
7．人 490
（五）哺乳动物卵母细胞超低温冷冻保存方法 491
1．A法 491
2．B法 491
第五节 胚胎分割与同卵多胎 492
一、卵裂球分离培养法 493
二、致密化前各期胚胎的分割 493
三、桑椹胚至囊胚期胚胎的分割 493
四、分割胚的发育 494
五、分割胚的移植 495
第六节 胚胎性别鉴定 495
一、性别决定的早期研究 496
（一）Y染色体短臂研究的初始时期 496
（二）H-Y抗原研究时期 496
（三）ZFY研究时期 496
二、SRY研究时期 497
（一）SRY的发现 497
（二）SRY的结构 498
（三）SRY是TDF的证据 498
1．Sry表达与睾丸分化 498
2．转基因小鼠证据 498
3．XY女性的SRY突变分析 499
三、胚胎性别鉴定方法 499
（一）性染色体检查法 499
（二）H-Y抗原检测法 499
1制造抗血清 500
2．检测H-Y抗体效价 500
3．胚胎细胞的性别鉴别 500
（三）SRY检测法 500
1．基因组DNA的制备 500
2．引物的合成 501
3．用PCR扩增体细胞DNA与检测 501
4．胚胎DNA的扩增与检测 501
第七节 体外受精 502
一、体外受精的一般操作过程 502
（一）收集卵母细胞 502
（二）受精与合子的培养 503
（三）体外受精胚胎的移植 504
二、动物和人的体外受精 504
（一）实验动物的体外受精 504
1．小鼠的体外受精 504
2．大鼠的体外受精 505
3．仓鼠的体外受精 505
4．兔的体外受精 506
（二）家畜的体外受精 506
1．卵巢卵母细胞体外成熟培养现状 506
2．卵巢卵母细胞的培养 507
3．精子获能和受精 507
4．腔前卵泡的收集和培养 509
（三）人的体外受精 511
1．人体外受精的发展过程 511
2．人体外受精的方法 511
第八节 显微受精 512
一、显微受精的基本方法 513
（一）显微工具的制备和配子的处理 513
1．显微工具的制备 513
2．配子的处理 513
（二）几种显微受精方法的基本过程 513
1．卵母细胞质内注射 513
2．透明带下注射 513
3．透明带钻孔 514
4．透明带部分切口 514
二、实验动物和人的显微受精 514
（一）小鼠 514
1．精子与卵母细胞的准备 514
2．精子注射 515
3．注射卵的体外培养与移植 515
（二）兔 515
1．精子与卵母细胞的准备 515
2．精子注射 515
3．注射卵的体外培养与移植 516
（三）人 517
三、影响显微受精的一些因素 517
（一）对操作技术的要求 517
（二）精子与卵母细胞 517
（三）注射部位的选择 517
四、单倍体球形精子细胞的显微受精 518
五、显微受精技术的应用前景 519
（一）研究受精机理 519
（二）治疗和改善人和动物的生殖不育 519
（三）其它方面的应用 520
第九节 胚胎嵌合 520
一、胚胎嵌合体的制作方法 521
（一）聚合法 522
1．胚胎与胚胎聚合 522
2．卵裂球或细胞与胚胎聚合 522
3．两组细胞间聚合 522
（二）注射法 522
二、胚胎嵌合体的标记与分析 522
（一）色素分析法 522
（二）同工酶分析法 523
（三）其它分析方法 523
三、嵌合体不同细胞的发育特性 523
四、胚胎嵌合技术的应用 524
（一）在发育生物学领域的应用 524
（二）对生理功能分析的应用 524
（三）在动物生产上的应用 524
第十节 胚胎干细胞 524
一、ES细胞的生物学特性 525
二、ES细胞的建立方法 526
（一）饲养层细胞的制备 526
1．STO饲养层细胞的制备过程 526
2．从初级胚胎成纤维细胞制备饲养层 527
（二）胚胎的收集与胚胎干细胞的分离 527
1．胚胎的收集 527
2．胚胎的培养 527
3．ES细胞的分离 528
三、ES细胞的维持和保存 528
（一）细胞悬液的制备 528
（二）ES细胞的培养 529
（三）ES细胞的保存 529
四、ES细胞的检测 529
（一）诱导分化 529
1．类胚体形成 529
2．囊状胚体形成 529
3．类胚体贴壁分化 530
（二）核型分析 530
（三）体内分化能力 530
（四）嵌合能力的测定 530
五、ES细胞的应用前景 530
（一）发育突变体 531
（二）胚胎发育 531
（三）外源基因或突变基因嵌合体的研究 531
（四）在其它胚胎生物工程上的应用 531
第十一节 细胞核移植 531
一、细胞核移植研究的历史与现状 532
二、细胞核移植方法 533
（一）重组胚的制作过程 534
1．受体胞质去核法 534
2．注核方法 535
（二）供体核与受体胞质融合 536
1．化学介质融合法 536
2．电融合法 536
（三）重组胚的中间受体培养 537
三、克隆绵羊“多利”的培育过程 537
四、影响细胞核移植的因素 538
五、细胞核移植技术的应用前景 539
第十二节 哺乳动物基因转移技术 540
一、哺乳动物转基因技术的研究历史与现状 540
二、转基因动物的操作过程 540
（一）目的基因的分离与重组 541
1．目的基因的获取方法 541
2．目的基因的筛选方法 542
（二）目的基因导入卵或胚胎 542
1．原核注射法 542
2．反转录病毒转染法 545
3．精子载体法 545
（三）基因导入胚胎的培养和移植 545
（四）转基因动物外源DNA的检测 546
1．取检测组织 546
2．抽提样品DNA 546
3．外源基因的Southern印迹分析 546
4．基因转录检测的Northern印迹分析和PCR技术 546
5．蛋白质分析检测转移外源基因 547
三、转基因动物的应用前景 547
（一）研究基因的结构和功能 547
（二）应用于动物生产 547
（三）作为动物生物反应器 548
（四）建立动物模型研究和治疗人类某些疾病 550
（五）应用于动物的抗病育种 552
（六）转基因动物在人类组织器官移植中的应用 552
参考文献 553
中文名词索引 561
英文名词索引 575