第一篇 柽柳及其研究进展 1
第1章 柽柳 3
第2章 柽柳抗逆生理机制 5
第3章 柽柳抗逆分子机制 9
第二篇 柽柳抗逆机制的功能基因组学研究 11
第4章 cDNA文库的构建及EST分析对柽柳叶基因表达研究 13
4.1 NaHCO3胁迫下柽柳叶部cDNA文库的构建 13
4.2 NaHCO3胁迫下柽柳叶部基因表达谱 14
4.3 讨论 26
第5章 cDNA文库构建及EST分析对柽柳根基因表达研究 34
5.1 刚毛柽柳根部cDNA文库的构建 34
5.2 柽柳根部基因表达谱分析 36
5.3 讨论 47
第6章 实时定量RT-PCR技术对柽柳不同基因家族抗逆表达分析 57
6.1 过氧化物酶(ThPOD)基因家族的克隆与分析 58
6.2 ThPrx基因家族的克隆与分析 66
6.3 柽柳ThNAC基因家族的克隆和分析 71
6.4 讨论 84
第三篇 柽柳抗逆相关调控基因的功能分析 89
第7章 柽柳bZIP转录因子的抗逆功能分析 91
7.1 ThbZIP1基因及启动子克隆 91
7.2 ThbZIP1上游表达调控基因研究 95
7.3 柽柳ThbZIP识别的顺式作用元件的研究 100
7.4 过表达ThbZIP基因拟南芥抗逆性功能分析 104
7.5 ThbZIP调控的下游基因的研究 109
7.6 柽柳ThbZIP转录因子互作蛋白的研究 119
7.7 讨论 123
第8章 柽柳ERF转录因子的抗逆功能分析 125
8.1 ERF家族基因表达模式分析及ThERF1的亚细胞定位 125
8.2 转ThERF1基因拟南芥的抗逆能力分析 127
8.3 柽柳ThERF1基因的互作蛋白研究 134
8.4 柽柳ThERF1基因上游调控因子的研究 135
8.5 ThERF1所识别的元件及调控的下游基因研究 142
8.6 讨论 145
第9章 柽柳DREB转录因子的抗逆功能分析 149
9.1 ThDREB基因时空表达分析 149
9.2 重组酵母INVSc1-pYES2-ThDREB抗逆性分析 151
9.3 转ThDREB基因烟草的抗逆能力研究 152
9.4 讨论 156
第10章 柽柳eIF5A基因的抗逆功能分析 158
10.1 柽柳eIF5A基因的表达及亚细胞定位 158
10.2 柽柳eIF5A基因的抗逆功能分析 162
10.3 eIF5A基因的互作蛋白质研究 172
10.4 eIF5A上游表达调控基因研究 173
10.5 讨论 175
第11章 柽柳eIF1A基因抗逆功能分析 178
11.1 TheIF1A基因及启动子克隆和分析 178
11.2 TheIF1A基因上游调控因子分析 181
11.3 过表达TheIF1A能改善转基因烟草的耐盐及抗甘露醇胁迫能力 184
11.4 转TheIF1A烟草中逆境胁迫相关基因的表达分析 187
11.5 瞬时过表达TheIF1A柽柳的相关分析 188
11.6 讨论 189
第四篇 柽柳抗逆相关功能基因的耐盐性研究 193
第12章 柽柳lea基因的抗逆功能分析 195
12.1 lea基因的克隆和序列分析 195
12.2 柽柳lea基因酵母表达及抗逆性研究 196
12.3 转基因烟草的抗逆能力分析 198
12.4 转基因小黑杨的抗逆能力分析 209
12.5 讨论 218
第13章 柽柳MnSOD基因的抗逆功能分析 221
13.1 MnSOD基因的克隆及序列分析 221
13.2 盐胁迫后的MnSOD基因在柽柳中的表达 223
13.3 重组酵母INVSc1(pYES2-SOD)的抗逆性分析 223
13.4 转MnSOD基因山新杨抗逆性研究 226
13.5 讨论 230
第14章 柽柳ThPOD1基因功能研究 233
14.1 柽柳过氧化物酶基因的序列分析 233
14.2 RT-PCR检测ThPOD1基因的转录表达特性 234
14.3 ThPOD1基因在E.coli中的表达、纯化与特性分析 237
14.4 ThPOD1基因不同功能区的原核表达及抗逆性分析 239
14.5 柽柳ThPOD1基因在山新杨中的表达及抗逆性分析 242
14.6 讨论 246
第15章 柽柳硫氧还原蛋白过氧化物酶基因(2Cys-Prx)的抗逆功能分析 250
15.1 柽柳2Cys-Prx基因的克隆及生物信息学分析 250
15.2 柽柳2Cys-Prx基因在不同非生物胁迫下的表达模式 250
15.3 柽柳2Cys-Prx基因的酵母转化及抗逆功能分析 252
15.4 柽柳2Cys-Prx基因的烟草转化及抗性分析 253
15.5 2Cys-Prx基因的互作蛋白研究 256
15.6 讨论 262
第16章 柽柳冷适应蛋白基因(cap)在抗旱、耐盐中的作用 266
16.1 柽柳冷适应蛋白cap基因的克隆及序列分析 266
16.2 逆境胁迫下cap基因的表达 267
16.3 重组酵母pYES2-cap抗逆性分析 267
16.4 过表达cap基因山新杨抗逆功能分析 271
16.5 讨论 276
第17章 柽柳泛素交联酶基因(E2s)的遗传转化及抗逆性分析 278
17.1 E2s基因的克隆及序列分析 278
17.2 E2s基因烟草的分子检测 279
17.3 过表达E2s基因烟草抗逆功能分析 280
17.4 讨论 287
第18章 柽柳rd22基因的克隆及功能验证 290
18.1 柽柳rd22基因的克隆及序列分析 290
18.2 柽柳rd22基因的遗传转化及分子检测 291
18.3 柽柳rd22基因的功能验证 292
18.4 讨论 302
第五篇 柽柳抗逆功能研究的展望 305
参考文献 308