1绪论 1
1.1 白桦的研究概况 1
1.2 植物内源激素的研究进展 2
1.2.1 内源激素种类 2
1.2.2 内源激素提取分离方法的研究进展 4
1.2.3 内源激素检测方法的研究进展 6
1.3 植物内源激素生物合成途径的研究进展 8
1.3.1 赤霉素生物合成途径的研究进展 8
1.3.2 脱落酸生物合成途径的研究进展 8
1.3.3 吲哚乙酸生物合成途径的研究进展 11
1.4 植物内源激素生物合成关键酶及其基因 12
1.4.1 赤霉素生物合成关键酶及其基因 12
1.4.2 脱落酸生物合成关键酶及其基因 16
1.5 生长素早期响应基因GH3 17
1.6 自然条件生长白桦的激素研究概况 18
1.7 本研究的目的与意义 20
2内源激素提取方法研究 21
2.1 材料与方法 21
2.1.1 材料 21
2.1.2 方法 23
2.2 结果与分析 25
2.2.1 提取溶剂的选择 25
2.2.2 提取溶剂浓度的选择 25
2.2.3 淋洗液的选择 26
2.2.4 洗脱液的选择 27
2.2.5 酸化洗脱液的选择 27
2.3 讨论 28
2.4 本章小结 29
3激素HPLC-PAD检测方法建立 30
3.1 材料与方法 30
3.1.1 材料 30
3.1.2 HPLC-PAD检测方法 32
3.1.3 HPLC-PAD检测方法学验证 34
3.1.4 数据处理方法 34
3.2 结果与分析 34
3.2.1 四种激素的紫外特征吸收 34
3.2.2 HPLC-PAD方法建立 37
3.3 讨论 45
3.4 本章小结 45
4激素含量 LC-MS/MS检测方法建立 47
4.1 材料与方法 47
4.1.1 材料 47
4.1.2 LC-MS/MS检测方法 49
4.1.3 LC-MS/MS检测方法学验证 51
4.1.4 数据处理方法 52
4.2 结果与分析 52
4.2.1 LC-MS/MS检测方法建立 52
4.2.2 检测激素含量的LC-MS/MS方法学验证 60
4.2.3 样品中各种激素含量的计算方法 62
4.3 讨论 63
4.4 本章小结 64
5白桦内源赤霉素含量及合成关键基因的表达分析 65
5.1 材料与方法 65
5.1.1 材料 65
5.1.2 实验方法 68
5.1.3 内源GA3和GA4含量的时序变化分析 72
5.1.4 基因的克隆与分析 77
5.2 讨论 80
5.2.1 内源GA3和GA4含量变化分析 80
5.2.2 内源GA生物合成关键基因时序表达分析 81
5.3 本章小结 82
6白桦内源脱落酸含量及合成关键基因的表达分析 83
6.1 材料与方法 83
6.1.1 材料 83
6.1.2 实验方法 86
6.2 结果与分析 89
6.2.1 内源ABA含量的时序变化分析 89
6.2.2 基因的克隆及表达分析 90
6.2.3 ABA含量与调控ABA合成关键基因表达量相关性分析 93
6.3 讨论 93
6.3.1 内源ABA含量变化分析 93
6.3.2 内源ABA生物合成关键基因时序表达分析 94
6.4 本章小结 95
7白桦内源吲哚乙酸含量和BpGH3基因家族的表达分析 97
7.1 材料与方法 97
7.1.1 材料 97
7.1.2 实验方法 100
7.2 结果与分析 103
7.2.1 内源IAA含量的时序变化分析 103
7.2.2 基因的克隆与分析 104
7.2.3 生长素响应基因BpGH3家族的表达与IAA含量相关性分析 105
7.3 讨论 107
7.3.1 内源IAA水平时序变化分析 107
7.3.2 生长素响应基因BpGH3的克隆与分析 108
7.4 本章小结 109
8结论 110
参考文献 113
编后记 121