第一部分 基础实验 3
第一周 环境微生物的检测和菌落识别 3
实验Ⅰ-1-1 环境中微生物的检测 3
实验Ⅰ-1-2 斜面接种与培养 8
实验Ⅰ-1-3 三点接种与培养 13
实验Ⅰ-1-4 穿刺接种法和细菌运动力的观察 16
实验Ⅰ-1-5 四大类微生物菌落形态的识别 18
第二周 细菌染色法和光学显微镜的使用 23
实验Ⅰ-2-1 普通光学显微镜的使用 23
实验Ⅰ-2-2 细菌的涂片及简单染色法 28
实验Ⅰ-2-3 革兰染色法(经典法) 30
实验Ⅰ-2-4 革兰染色法(三步法) 33
实验Ⅰ-2-5 显微测微尺的使用 34
第三周 细菌的芽孢、荚膜和鞭毛染色法 38
实验Ⅰ-3-1 芽孢染色法 38
实验Ⅰ-3-2 荚膜染色法 40
实验Ⅰ-3-3 鞭毛染色法 43
实验Ⅰ-3-4 相差显微镜的使用 46
实验Ⅰ-3-5 暗视野显微镜的使用 49
第四周 放线菌和真菌的培养与形态观察 51
实验Ⅰ-4-1 放线菌的插片、搭片培养和形态观察 51
实验Ⅰ-4-2 真菌的载片培养和形态观察 54
实验Ⅰ-4-3 根霉孢子囊和假根的观察 57
实验Ⅰ-4-4 蓝色犁头霉接合孢子囊的形成和观察 60
实验Ⅰ-4-5 霉菌子囊壳、子囊和子囊孢子的观察 62
第五周 培养基的配制、分装和灭菌 65
实验Ⅰ-5-1 通用培养基的配制 65
实验Ⅰ-5-2 鉴别性培养基的配制 73
实验Ⅰ-5-3 选择性培养基的配制 75
实验Ⅰ-5-4 加压蒸汽灭菌法 78
实验Ⅰ-5-5 培养皿的干热灭菌法 81
实验Ⅰ-5-6 过滤除菌技术 83
第六周 微生物生长量的测定和生长曲线的绘制 87
实验Ⅰ-6-1 细菌的液体接种法和培养特征的观察 87
实验Ⅰ-6-2 细菌生长曲线的测定 91
第七周 微生物的显微镜直接计数法 94
实验Ⅰ-7-1 酵母菌和霉菌孢子的直接计数法 94
实验Ⅰ-7-2 细菌细胞的直接计数法 99
第八周 微生物的间接计数法 102
实验Ⅰ-8-1 平板菌落计数法 102
实验Ⅰ-8-2 乳酸菌和双歧杆菌的简便快速计数法 106
实验Ⅰ-8-3 用MPN法测定活性污泥中的亚硝化细菌数 109
第九周 微生物的纯种分离法 112
实验Ⅰ-9-1 用平板划线法分离菌种 112
实验Ⅰ-9-2 用浇注平板法和涂布平板法分离菌种 115
实验Ⅰ-9-3 真菌的单孢子分离法 118
实验Ⅰ-9-4 真菌的菌丝尖端切割分离法 120
第十周 检测噬菌体的基本实验技术 123
实验Ⅰ-10-1 大肠杆菌噬菌体的分离和纯化 123
实验Ⅰ-10-2 噬菌体效价的测定 126
实验Ⅰ-10-3 溶原性细菌的检测和鉴定 130
第十一周 微生物的遗传变异实验 134
实验Ⅰ-11-1 紫外线对枯草芽孢杆菌产生淀粉酶的诱变效应 134
实验Ⅰ-11-2 用梯度平板法筛选大肠杆菌抗药性突变株 137
实验Ⅰ-11-3 大肠杆菌营养缺陷型突变株的筛选 139
实验Ⅰ-11-4 Ames试验法 144
实验Ⅰ-11-5 细菌的原生质体融合 148
第十二周 物理、化学因素对微生物生长的影响 153
实验Ⅰ-12-1 温度、pH、渗透压和氧气对微生物生长的影响 153
实验Ⅰ-12-2 消毒剂和杀菌剂最低抑制浓度(MIC)的测定 157
实验Ⅰ-12-3 用杯碟法测定抗生素的效价 160
第十三周 菌种的保藏原理与方法 165
实验Ⅰ-13-1 常用的简易保藏法 165
实验Ⅰ-13-2 甘油保藏法 167
实验Ⅰ-13-3 干燥保藏法 170
实验Ⅰ-13-4 冷冻真空干燥保藏法 173
实验Ⅰ-13-5 液氮超低温保藏法 177
第十四周 细菌鉴定中的常规和微量快速生理生化反应 180
实验Ⅰ-14-1 若干常规生理生化反应 180
实验Ⅰ-14-2 应用API-20E细菌鉴定系统鉴定肠杆菌科的菌种 186
第十五周 微生物分子生物学基础实验 191
实验Ⅰ-15-1 细菌总DNA的小量制备 191
实验Ⅰ-15-2 利用PCR技术制备基因片段 192
实验Ⅰ-15-3 蓝白斑筛选技术在基因克隆中的应用 194
实验Ⅰ-15-4 氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞和质粒DNA的转化 196
实验Ⅰ-15-5 重组质粒DNA的小量制备和电泳验证 198
实验Ⅰ-15-6 利用阿拉伯糖诱导观察细菌发光现象 200
第十六周 血清学反应实验技术 203
实验Ⅰ-16-1 免疫血清的制备 203
实验Ⅰ-16-2 凝集反应 209
实验Ⅰ-16-3 环状沉淀试验 212
实验Ⅰ-16-4 用鲎试剂法测定细菌内毒素 215
实验Ⅰ-16-5 双向琼脂扩散沉淀反应 217
第二部分 任选实验(一) 223
1.菌种分离、纯化和筛选技术 223
实验Ⅱ-1-1 利用选择性培养基分离固氮菌、酵母菌和土壤真菌 223
实验Ⅱ-1-2 酸奶的制作和其中乳酸菌的分离 225
实验Ⅱ-1-3 产淀粉酶芽孢杆菌的分离和酶活性测定 229
实验Ⅱ-1-4 杀虫细菌——苏云金芽孢杆菌的分离 232
实验Ⅱ-1-5 酚降解细菌的分离、纯化和筛选 234
2.厌氧菌培养技术 241
实验Ⅱ-2-1 厌氧罐技术 241
实验Ⅱ-2-2 用厌氧产气袋法分离培养丙酮丁醇梭菌 244
3.水体微生物学检测技术 248
实验Ⅱ-3-1 水中细菌菌落总数的测定 248
实验Ⅱ-3-2 水中总大肠菌群的检测 251
实验Ⅱ-3-3 应用测菌管检测野外水体中微生物的数量 260
4.分子微生物学实验技术 263
实验Ⅱ-4-1 利用16S rRNA基因序列鉴定细菌 263
实验Ⅱ-4-2 利用ITS序列鉴定真菌 266
实验Ⅱ-4-3 环境样品中微生物群落结构的分析 270
5.免疫学实验技术 274
实验Ⅱ-5-1 巨噬细胞吞噬功能的测定 274
实验Ⅱ-5-2 用间接ELISA测定抗血清的效价 277
附录 281
一、若干微生物的学名及其音标 281
二、酸碱指示剂的配制 285
三、常用培养基成分 286
四、染色液和试剂的配制 289
五、蒸汽压力与温度的关系 291
六、培养基容积与加压灭菌所需时间 291
七、缓冲液的配制表 291
八、常用消毒剂表 293
九、市售浓酸和氨水的相对密度和实际浓度 294
十、相对密度与糖度换算表 294
十一、常用干燥剂 295
十二、十进制倍数和分数的词冠表(国际制) 295
十三、常用的计量单位 296
十四、镜头清洁液和洗液的配制 296
十五、标准筛孔对照表 296
十六、部分国家的菌种保藏机构名称和网址信息 297