第一部分植物病毒学概论 1
1.1植物病毒的发现和定义 1
1.1.1病毒的发现过程 1
1.1.2病毒的定义 3
1.2病毒学发展过程中的五个阶段 5
1.2.1感性认识和症状描述阶段 5
1.2.2机体水平研究阶段 6
1.2.3病毒的病理学及病害流行学研究阶段 6
1.2.4病毒的生物化学和生物物理学研究阶段 6
1.2.5分子病毒学阶段 7
1.3植物病毒的形态和结构 10
1.3.1病毒的形态 11
1.3.2植物病毒的结构 12
1.3.3植物病毒正链RNA的基因结构和表达调控 15
1.3.3.1植物正链RNA病毒的基因结构 15
1.3.3.2植物正链RNA病毒的基因表达和调控 19
1.4植物病毒所造成的经济危害 22
1.5病毒在农业生产中的应用 24
1.5.1DI颗粒是病毒抑制病毒的“活”工具 25
1.5.2病毒用于控制农业生产上的致病寄生菌 25
1.5.3病毒用于清除或防治农业上几大灾害 26
1.5.4病毒弱毒株系在农业上的应用 28
第二部分植物病毒的分类和命名 31
2.1病毒的起源 31
2.2生物分类系统 32
2.2.1大的生物分类系统的发展和变化 32
2.2.2植物病毒在生物分类系统中的地位 34
2.3植物病毒的分类 36
2.4植物病毒分类的历史 37
2.4.1Johnson等分类法 37
2.4.2Holmes的植物病毒分类法 41
2.4.3其它一些分类系统和特点 42
2.5植物病毒命名 43
2.6病毒分类和命名中的编码 46
2.7目前所采用的最新分类系统 48
2.7.1分类和命名的有关国际组织和工作程序 48
2.7.2目前采用的分类系统和现状 48
2.7.3最近的研究动态 51
2.8植物病毒分类系统中各科、组的分类内容 52
2.9未来的分类趋势 80
第三部分植物病毒鉴定、分类的方法和技术 1
3.1鉴定和分类指南 1
3.2分类鉴定指标 1
3.3植物病毒的传播 4
3.3.1介体传播 5
3.3.2昆虫介体传播方式的测定 6
3.3.3线虫传播 87
3.3.4真菌传毒 88
3.3.5种子和花粉传播病毒 90
3.3.6种子和花粉的传播种类及测定方法 90
3.3.7病毒的汁液机械传播 92
3.4植物病毒的外部症状 95
3.5植物病毒汁液(或粗提纯)体外物化特性及测定 96
3.6植物病毒的分离和提纯 97
3.6.1植物病毒提纯的一般程序 98
3.6.1.1病毒的繁殖 98
3.6.1.2病毒的抽提 98
3.6.1.3澄清 99
3.6.1.4浓缩 99
3.6.1.5纯化植物病毒 100
3. 6. 2影响病毒提纯的因素 101
3. 6. 2. 1病毒粒子的凝集 101
3. 6. 2. 2病毒粒子的钝化 101
3.6. 2. 3病毒外壳蛋白的水解 101
3. 6. 3植物病毒的粗提纯 101
3. 6.4植物病毒的精提纯 103
3.6.5一些植物病毒的提纯实验程序 103
3. 7植物病毒的电子显微镜诊断方法 109
3.7. 1植物病毒形态的电镜观察和诊断技术 109
3.7.2超薄切片的制备和电镜观察 111
3.7. 3铜网的清洗和支持膜的制作 115
3.8植物病毒的内含体及观察技术 116
3.8. 1内含体的形态和种类 116
3.8.2内含体观察方法 120
3. 9血清学诊断的原理和技术 121
3. 9. 1血清学试验的原理 121
3. 9.2抗血清的制备 123
3. 9. 3血清学反应试验 125
3. 9. 3. 1玻片凝集反应 125
3.9.3.2琼脂免疫双扩散试验 126
3. 9. 3. 3免疫电泳 127
3. 9. 3. 4酶联免疫吸附测定法(ELISA) 128
3. 9.4单克隆抗体的制备和应用 132
3. 10核酸分子杂交技术在植物病毒鉴定和分类中的应用 135
3. 10. 1互补DNA探针的制备 136
3. 10. 1. 1随机引物和反转录酶法制备cDNA探针 136
3. 10. 1.2缺口翻译制备cDNA探针 136
3. 10.2分子杂交试验 137
3. 10.2. 1斑点杂交试验 137
3. 10. 2. 2核酸吸印转移杂交技术 138
3. 10. 2. 3原位杂交 139
3. 11PCR技术在植物病毒鉴定和分类中的应用 141
3. 11. 1PCR原理 142
3. 11. 2PCR反应所需要的材料 143
3. 11. 3PCR扩增方法 144
3. 11. 3. 1PCR扩增DNA 144
3. 11. 3. 2PCR扩增RNA 146
3. 11. 3. 3PCR进行DNA测序 148
3.12植物病毒的保存和贮藏 150
3.12.1直接冷冻 150
3.12.2冷冻干燥 151
3.12.3化学干燥法 151
第四部分病毒的植物检疫 153
4.1检疫的起源 153
4.2早期的植物检疫立法情况 154
4.3国际植物保护公约 154
4.4植物检疫的原理 155
4.5植物病害检疫对象的确定原则 156
4.6植物病毒在检疫中的重要性 156
4.7植物病毒在检疫中的特殊性及病毒检疫的方法和技术 157
4.7. 1检疫中的特殊性 157
4.7.2检疫方法和技术 158
4.7.2. 1生物学方法 158
4.7.2.2物理学测定方法 159
4.7.2.3生物化学方法 159
4.7.2.4分子生物学技术 159
4.8种质资源中的病毒检疫 160
4.9中国对外植物病毒检疫名录 162
第五部分一些与植物病毒相类似的病原 169
5. 1植物类菌原体(MLO) 169
5.1.1植物类菌原体的特性 169
5. 1. 2分类 171
5.1.3病理学特性 171
5.1. 4MLO的诊断和鉴定 172
5.1.5分子生物学 173
5. 1. 6类菌原体的提取 174
5. 2螺原体 175
5. 2. 1螺原体的形态和超微结构 176
5. 3类立克次氏体(RLO) 177
5. 3.1类立克次氏体的形态和超微结构 178
5. 4类病毒 178
5. 4. 1类病毒及类病毒病种类 179
5.4.2类病毒的鉴定 181
5. 5植物卫星病毒和卫星RNA 183
5. 5.1植物病毒卫星的鉴定 184
5.6植物病毒卫星和辅助病毒及宿主植物之间的相互关系 185
主要参考文献 187
附录一已正式发表的植物病毒英、中文名录 190
附录二病毒学实验中常用缓冲液及试剂的配制 202
附录三常用度量衡表 206