第1篇 DNA遗传标记的基本理论 3
第1章 人类DNA遗传标记多态现象 3
第1节 抗原多态性 4
1.1 红细胞抗原多态性 4
1.2 白细胞抗原多态性 9
第2节 蛋白质多态性 19
2.1 同工酶 20
2.2 蛋白质 32
第3节 DNA多态性 47
3.1 DNA指纹 48
3.2 DNA片段长度多态性 51
3.3 DNA片段序列多态性 57
3.4 单核苷酸多态性 58
第4节 线粒体DNA多态性 58
4.1 线粒体基因结构与功能特征 58
4.2 线粒体DNA多态性 58
第1节 DNA结构和功能 60
第2章 DNA多态性的遗传基础 60
1.1 DNA化学组成 61
1.2 DNA结构 63
1.3 DNA自身活动规律 65
1.4 DNA动态性 67
1.5 DNA生物学功能 70
第2节 DNA存在形式 70
2.1 人类染色体上的基因定位 70
2.2 DNA在染色体上的分布 70
第3节 DNA传递的规律 71
3.1 单基因遗传规律 72
3.2 多基因遗传规律 74
3.3 细胞质遗传方式 74
3.4 遗传与变异 75
第4节 基因表达的规律 75
4.1 基因表达的过程 75
第5节 群体中的基因频率 76
5.1 基因频率和基因型频率 76
4.2 中心法则 76
5.2 群体中基因的遗传平衡 78
5.3 影响群体遗传平衡的因素 80
第3章 DNA片段长度多态性 81
第1节 限制性片段长度多态性(RFLP) 81
1.1 RFLP一般特征 81
1.2 RFLP遗传规律 82
1.3 限制性内切酶选择 85
1.4 核酸探针 88
1.5 RFLP分型技术 89
第2节 DNA扩增片段长度多态性(Amp-FLP) 90
2.1 Amp-FLP一般特征 90
2.2 Amp-FLP遗传规律 90
2.3 特异性引物 93
2.4 DNA聚合酶 94
2.5 Amp-FLP分型技术基本原理 95
第1节 人类DNA序列组成 96
第4章 DNA片段的序列多态性 96
1.1 高度重复序列 97
1.2 中度重复序列 97
1.3 单一序列 98
第2节 DNA序列遗传规律 98
第3节 DNA直接测序 99
3.1 Sanger测序 99
3.2 Mamam-Gilber测序 100
4.2 DNA多标记位点的遗传规律 101
4.1 DNA多标记位点一般特征 101
第4节 DNA多标记位点 101
4.3 特异性引物 105
4.4 特异性核酸探针 105
4.5 斑点杂交分型技术 105
第5章 性别的DNA遗传标记 107
第1节 性别决定 107
第2节 性染色质 107
2.1 Y染色质 107
3.1 Y染色体DNA遗传标记 108
3.2 X染色体DNA遗传标记 108
2.2 X染色质 108
第3节 性别DNA遗传标记 108
3.3 X-Y同源序列 109
3.4 性别标记的应用前景 111
第6章 法科学DNA数据库和意义 112
第1节 DNA数据统计意义 112
第2节 DNA数据解释的统计基础 112
2.1 基因产物遗传标记的频率表述 113
2.2 DNA遗传标记的频率表述 114
3.3 被指控罪犯的遗传标记资料 116
3.5 DNA相关信息的可靠性和安全性 116
3.4 无名物证的遗传标记资料 116
第3节 法科学DNA数据库 116
3.2 犯罪现场罪犯遗留样本的遗传标记资料 116
3.1 正常人群的遗传标记资料 116
3.6 建立我国的DNA数据库 117
第4节 个体识别能力计算 128
1.1 原理 131
第1节 凝集试验 131
第7章 细胞表面抗原分型 131
第2篇 DNA遗传标记的分型技术 131
1.2 器材与试剂 132
1.3 操作步骤 132
1.4 结果判读 133
1.5 血型判定应注意事项 134
第2节 抗人球蛋白试验 134
2.1 抗人球蛋白试验原理 135
2.2 器材和试剂 135
2.3 操作步骤 136
2.4 抗人球蛋白试验注意事项 137
第3节 微量T淋巴细胞毒试验 137
3.1 微量淋巴细胞毒试验原理 138
3.2 器材和试剂 138
3.3 实验材料 139
3.4 实验步骤 140
3.5 微量淋巴细胞毒试验注意事项 141
1.1 Hp聚丙烯酰胺垂直板电泳 142
第1节 蛋白质分型 142
第8章 蛋白质、同工酶分型技术 142
1.2 GC圆盘电泳 145
1.3 Bf免疫电泳 149
第2节 同工酶分型 152
2.1 ACP聚丙烯酰胺等电聚焦电泳 152
2.2 PGM1亚型聚丙烯酰胺等电聚焦电泳 154
2.3 同工酶混合凝胶水平电泳 155
2.4 同工酶淀粉凝胶水平电泳 159
1.1 盐析法 162
第9章 法医样本DNA提取与保存 162
第1节 DNA提取方法 162
1.2 有机溶剂法 163
1.3 Chelex法 165
1.4 Glass milk法 167
第2节 DNA纯化 168
2.1 酒精沉淀法 168
3.1 紫外分光光度计法 169
第3节 DNA质和量的检测 169
2.4 透析法 169
2.2 超滤法 169
2.3 离子交换层析法 169
3.2 定量胶检测法 170
3.3 斑点杂交检测DNA的量 171
3.4 特殊性探针检测 171
4.1 生物检材的收集和保存 172
4.2 DNA提取 172
4.3 从生物检材中提取DNA的流程 172
第4节 法医样本的收集与DNA提取方法选择 172
3.5 非放射性方法 172
4.4 对照血样 173
4.5 输血病人血样 173
4.6 唾液样本(口腔栻子) 173
4.7 血痕 173
4.8 精斑 174
4.9 混合斑中精子及阴道上皮细胞 174
4.10 软组织 174
4.11 骨 174
4.14 唾液斑 175
4.15 尿液样本 175
4.13 毛发 175
4.12 牙 175
4.16 骨髓移植病人血样 176
4.17 试管婴儿 176
第10章 RFLP分型技术 177
第1节 荧光检测RFLP技术的原理 177
1.1 RFLP分型基础 177
2.1 仪器要求 178
第2节 RFLP国际标准化 178
1.2 RFLP等位基因命名 178
2.2 试剂标准 179
2.3 RFLP流程 180
第3节 DNA提取与定量 180
3.1 全血或冻融血抽提DNA 180
3.2 DNA定量 182
第4节 HaeⅢ限制酶切割样本DNA 183
4.1 酶切DNA 183
4.2 评价酶切程度 185
4.3 重切DNA 186
5.1 分析凝胶电泳制备 187
5.2 RFLP电泳 187
第5节 分析凝胶电泳 187
第6节 转印DNA到尼龙膜 188
6.1 转印 188
6.2 固定尼龙膜DNA片段 188
第7节 单位点探针与转印膜杂交 188
7.1 杂交准备 188
8.2 冲洗X片 189
9.1 数字化仪收集RFLP图谱信息 189
第9节 数字化仪分析结果 189
第8节 荧光素自显影 189
8.1 曝光X片 189
7.2 杂交 189
9.2 对RFLP分型结果作出结论 190
9.3 常见影响RFLP分型因素 193
第10节 剥脱杂交探针与再杂交 193
10.1 剥脱已结合的探针 193
10.2 膜与另一种探针再杂交 193
第11节 RFLP的注意事项 194
第11章 PCR扩展分型技术 195
第1节 PCR原理与标准反应 195
1.1 PCR的基本原理 195
1.2 PCR的特性 195
1.3 PCR操作步骤 197
1.4 聚合酶链反应应用领域 198
第2节 扩增片段长度多态性分型 199
2.1 Amp-FLP分型原理 199
2.3 Amp-FLP位点的DNA扩增 201
2.2 样本DNA定性定量 201
2.4 扩增产物的电泳分离 203
2.5 Amp-FLP位点的等位基因银染 204
2.6 Amp-FLP等位基因分型 205
第3节 反向斑点杂交分型 205
3.1 反向斑点杂交分型的原理 206
3.2 反向斑点杂交的国际标准化 206
3.3 实验步骤 209
3.4 斑点杂交结果的分型 211
4.1 Genescan原理 212
3.5 斑点杂交的注意事项 212
第4节 STR基因扫描 212
4.2 Genescan国际标准化 213
4.3 实验步骤 214
4.4 Genotype分析命名等位基因 216
4.5 Genescan结果分型 216
第5节 mt-DNA测序 217
5.1 mt-DNA测序原理 217
6.1 等位基因的丢失 218
第6节 PCR扩展方法的质量控制 218
5.2 mt-DNA测序应用 218
6.2 污染 219
6.3 牛血清白蛋白(BSA) 219
6.4 PCR质量控制和质量保证 220
第3篇 DNA遗传标记的应用 223
第12章 亲权鉴定 223
第1节 亲权鉴定基本原理 223
1.1 单基因遗传特征 224
2.1 单独一个遗传标记的亲子关系概率 225
第2节 肯定亲子关系 225
1.2 多基因遗传特征 225
1.3 妊娠期限 225
1.4 性交能力及生育能力 225
2.2 多个遗传标记的亲子关系概率 227
第3节 排除亲子关系 228
3.1 单独一个遗传标记的排除概率 228
3.2 多个遗传标记的累积排除概率 228
第4节 亲权鉴定中DNA技术的应用 228
4.1 使用单位点探针的亲权鉴定 228
4.2 PCR作为另一种可供选择的方法 229
4.3 质量控制 230
第5节 亲权鉴定实例 230
5.1 RFLP位点 230
5.2 VNTR位点 238
5.3 STR位点 239
5.4 Genescan 241
1.1 Amelogenin分型原理 244
1.2 Amelogenin分型方法 244
第13章 性别鉴定 244
第1节 X-Y同源基因 244
第2节 人类Y染色体特异性DNA探针 245
2.1 Y染色体的分型原理 245
2.2 Y染色体分型方法 245
第3节 非同位素RFLP 246
3.1 Y染色体特异性分型原理 246
3.2 Y染色体特异性分型方法 246
第4节 STRX位点分型 247
1.1 皮肤纹理 248
第14章 个体识别 248
第1节 活体个体识别 248
1.2 身体的特征 249
1.3 单基因遗传标记 249
1.4 人像重合 250
第2节 尸体遗骸的个体识别 250
2.1 性别 250
2.2 年龄 250
2.3 身长 250
2.6 遗骸的DNA分型 251
2.4 复容 251
2.5 颅像重合 251
第15章 DNA多态性和疾病相关性 253
第1节 人群中的DNA多态性 253
第2节 动脉粥样硬化中等位基因相关性 254
第3节 与HLA相关的疾病 255
第4节 与其它疾病相关性 256
1.2 牙组织结构 257
1.1 骨组织结构 257
第1节 骨、牙组织结构概况 257
第16章 遗骸的DNA分析 257
1.3 骨组织结构特殊性 258
第2节 陈旧骨组织DNA稳定性 258
2.1 检测陈旧骨DNA质和量方法 259
2.2 不同时限、不同保存状况陈旧骨DNA稳定性 259
第3节 陈旧骨DNA分析影响因素 260
3.1 DNA遗传标记的选择 260
第5节 人类种族起源和基因结构 261
第4节 遗骸的个体识别 261
3.3 研究陈旧骨DNA稳定性的方法 261
3.2 如何控制污染 261
1.3 DNA扩增仪 263
1.5 DNA芯片 263
1.4 DNA自动化测序仪 263
第2节 新标记 263
1.2 DNA合成仪 263
1.1 DNA提取仪 263
第1节 DNA分型自动化 263
第17章 DNA遗传标记将来方向 263
第3节 教育与培训 264
第4节 DNA遗传标记分析的国际标准化 264
4.1 DNA遗传标记 264
4.2 试剂与仪器 264
4.3 分型技术 264
4.4 结果分析 264
第5节 DNA遗传标准资料国际合作与共享 265
参考文献 266