第一篇 基因分离与基因作图 1
第1章 基因定位：从FISH到序列数据库 1
第2章 遗传性状的连锁分析 4
第3章 用体细胞杂交进行基因作图 9
第4章 用FISH技术进行基因作图 12
第5章 用FISH进行DNA位点排序与测距 22
第6章 基因物理作图——脉冲场凝胶电泳法 27
第7章 疾病基因间区YAC重叠群的构建和应用 38
第8章 粘粒重叠文库的构建与应用 45
第9章 用二核苷酸多态性分析作物理图 52
第10章 用多重PCR作表达序列标签图谱 57
第11章 用外显子捕获法分离基因 61
第12章 用直接选择法从基因组分离编码序列 71
第13章 用YAC杂交筛查法分离cDNAs 79
第14章 差异表达基因的检测与分离 84
第15章 化学交联扣除法 89
第16章 基因制图、基因分离与数据库访问 96
第二篇 PCR条件最佳化及特殊PCR 109
第17章 PCR基本原理及关键问题 109
第18章 Touchdown PCR及Stepdown PCR——一步法达到条件最佳化的PCR技术 116
第19章 长靶序列的XLPCR扩增 120
第20章 用TubDNA聚合酶作长序列PCR扩增 125
第21章 高GC含量模板的扩增——PCR反应中的溶剂效应 129
第22章 RT-PCR克隆cDNA大片段 132
第三篇 PCR产物的克隆 135
第23章 用T4 DNA聚合酶生成可克隆PCR产物 135
第24章 PCR产物的非酶连接法快速克隆 138
第25章 PCR产物的T/A克隆法 142
第26章 T-载体的构建 146
第27章 用AT-接头做PCR产物的修饰和定向克隆 152
第四篇 突变与重组技术 157
第28章 用重组PCR做重组和定点突变 157
第29章 DNA的体外重组与突变 161
第31章 用Megaprimer PCR进行基因突变和基因融合 168
第32章 快速高效的突变方法——PCP-管法 173
第33章 用耐热连接酶及PCR生成突变分子 176
第34章 用PCR突变接头探查基因转录调控原件 179
第35章 用翻转PCR进行序列倒转 182
第36章 用GB——D聚合酶及平板快速筛选法做定点突变 185
第37章 用SELEX组合化学法分离高亲和性的核酸配体 190
第五篇 对已知序列两旁未知序列的克隆方法 197
第38章 cDNA末端的快速扩增 197
第39章 用单侧特异性引物扩增基因的调控区序列 201
第40章 末端修饰PCR扩增相邻未知DNA序列 205
第41章 用mRNA 5端加上一段确定序列用于克隆全长mRNA 212
第42章 用Step——Out PCR在DNA克隆中做快速定向步移 220
第43章 反向PCR快速扩增cDNA末端 224
第44章 用锚定PCR方法从基因文库中快速扩增基因末端 228
第45章 用外显子扩增法从酵母人工染色体中分离基因编码序列 231
第六篇 cDNA文库的构建与筛选 239
第46章 从少量细胞制备cDNA文库 239
第47章 重组DNA文库的非放射性PCR快速筛选法 245
第48章 用PCR筛选eDNA文库 249
第49章 噬菌体DNA亚库的构建及PCR筛选 252
第50章 用简并引物PCR克隆基因家族中的成员基因 257
第51章 用含肌苷的简并引物扩增分离低相似性基因 263
第七篇 用差示法和扣除法做cDNA分析与克隆 267
第52章 用分子选择法对cDNA序列表现度作归化处理 267
第53章 用磁珠技术和PCR做扣除cDNA克隆 274
第54章 扣除cDNA的PCR再生 283
第55章 用PCR对cDNA库进行差示筛选 290
第56章 用DDRT——PCR鉴定和克隆差异表达的基因 295
第八篇 寡核苷酸启动的原位DNA合成技术 301
第57章 寡核苷酸启动的原位DNA合成 301
第58章 特异染色体的PRINS 305
第59章 染色体寡核苷酸PRINS标记DNA的亮视野显微镜检测 308
第60章 PRINS方法分析精细胞的非整倍性 314
第61章 冰冻组织切片上PRINSDNA合成 318
第62章 多序列寡核苷酸启动原位DNA合成 322
第63章 在伸展的染色质样品上进行寡核苷酸PRINS DNA合成 325
第64章 免疫组化-PRINS联合应用同时检测细胞表型和基因组参数 328
第65章 染色体PRINS DNA标记与间接免疫细胞化学的联合应用 332
第九篇 原位多聚酶链反应技术 337
第66章 原位多聚酶链式反应技术及其应用 337
第67章 直接原位单拷贝PCR 346
第68章 在细胞和石蜡切片上检测低拷贝DNA序列的原位PCR方法 350
第69章 冰冻切片上的逆转录原位PCR 356
第70章 HIV-1前病毒DNA的原位PCR检测及流式细胞仪分析 360
第71章 细胞内mRNA的原位PCR扩增 364
第72章 组织切片上核酸序列的PCR扩增——定位原位扩增 369
第30章 用PCR法做插入、删除和嵌合连接 8165