目录 1
第一章 取样 1
一、取样前的准备 2
（一）仪器准备 2
（二）性能检查 2
（三）配制各种培养基和试剂 2
（四）取祥前的现场记录 3
（二）海洋、港湾取样地点的选择 4
（一）采淡水（河水、湖泊水等）样品的地点选择 4
二、取样地点的选择 4
（三）沉积物取样地点的选择 5
三、水样采集 5
（一）采水器 6
（二）自来水样的采集 11
四、沉积物的采集 11
（一）曙光（HNM1-2型）采泥器 12
（二）弹簧采泥器 13
（三）柱状采样管 15
五、附着样品的采集 18
（一）水中沉降附生玻片法 18
（二）底埋玻片法 18
（三）毛细管底埋法 19
六、样品的暂时保存和运输 20
第二章 水生微生物的分离与纯化 22
一、培养基的配制 22
（一）培养基配制的基本原理 22
（二）配制培养基的一般过程及注意事项 29
（三）无菌水、无菌海水和陈海水的制作 33
（四）平板和斜面培养基制备 33
（五）营养琼脂培养基、2216E培养基和特殊用途培养基的制备 34
二、灭菌方法 37
（一）物理灭菌法 37
（二）化学灭菌法 47
三、无菌操作 48
（一）船上微生物实验室、无菌室及其器具 48
（二）基本操作技术 49
（一）器具及设备 53
四、分离与纯化培养 53
（二）十倍稀释分离法 56
（三）平板划线法 58
（四）倒平板法和平板涂布法 60
（五）单细胞分离法 62
（六）超滤膜分离法 66
五、不同类型微生物分离方法 68
（一）厌氧细菌的分离和无氧装置 68
（二）芽孢杆菌的分离 72
（三）海洋发光细菌的分离培养 73
（四）海洋固氮菌的分离 76
（五）硝化细菌的富集培养和分离 80
（六）反硝化细菌的富集培养与分离 84
（七）硫杆菌的分离培养 86
（八）脱硫弧菌的富集、分离、纯化培养 90
（九）磷细菌的分离 94
（十）石油微生物种群的分离 96
（十一）分解油脂细菌的分离 98
（十二）几丁质分解菌的分离 99
（十三）铁细菌富集分离及形态观察 102
（十四）绿菌属（Chlorobium）的富集培养及分离 107
（十五）着色菌属（Chromatium）或称红硫菌属的分离与纯氏培养 109
（十六）红螺菌属（Rhodospirillum）的富集培养与分离 112
（十七）红色假单胞菌属（Rhodopseudomonas）的富集培养与分离 114
（十八）滤膜法分离检验水中大肠杆菌群 115
（十九）水中沙门氏菌的分离 118
（二十）水中志贺氏菌的检验和分离 121
（二十一）水中葡萄球菌的分离与观察 127
（二十二）水中粪链球菌群的增菌培养与分离 129
（二十三）水中霍乱弧菌的分离检验 131
（二十四）水中缘脓杆菌的分离检验 136
（二十五）从泥样中分离放线菌 138
（二十六）从沉积物中分离霉菌 140
（二十七）从水、泥和生物体中分离酵母菌 141
（二十八）噬菌体的分离 144
第三章 水生微生物的细胞形态观察 148
一、显微镜与显微摄影 148
（一）普通光学显微镜 148
（二）其他光学显微镜 152
（三）电子显微镜 157
（四）显微镜摄影法 158
二、测微尺使用及微生物大小测量 165
三、细菌运动的观察 166
（一）暗视野观察法 167
（二）悬滴法 168
四、应用荧光显微镜辨别死、活菌 168
五、单染色法 169
六、革兰氏染色法 171
七、抗酸染色法 174
八、鞭毛染色法 175
（一）常用法 176
（二）利夫森氏（Leifson）法 178
（三）户田法 178
（四）费希尔氏和康恩氏（FisherandConn）法 179
（五）卡萨尔斯氏（Casares）染色法 179
九、芽孢染色法 180
（一）孔雀缘-番红染色法 180
（六）鞭毛染色的成败原因 180
（二）科康氏（Conkon）改进沃茨氏（Wirtz）的染色法 181
十、荚膜染色法 181
（一）番红染色法 182
（二）结晶紫硫酸铜改良染色法 182
（三）刚果红美蓝染色法 182
（四）结晶紫墨汁染色法 183
十一、细胞壁染色法 183
（一）鞣酸结晶紫染色法 183
十二、异染粒染色法 184
（二）磷钼酸染色法 184
十三、类脂粒染色法 185
十四、伴孢晶体染色法 186
十五、核染色法 187
十六、放线菌形态的观察 188
（一）透明纸培养和观察法 189
（二）印片观察法 189
（三）盖片观察法 190
十七、酵母菌形态的观察 190
（二）子囊孢子的观察 191
（一）水浸法观察酵母菌 191
（三）假菌丝的观察 192
（四）酵母菌死、活细胞的鉴别法 192
（五）酵母菌的肝糖染色法 192
（六）酵母菌的脂肪粒染色法 193
十八、霉菌形态的观察 193
（一）直接取菌观察法 194
（二）载片培养观察法 194
（三）染色法鉴别死、活孢子 196
（四）玻璃纸培养观察法 197
第四章 水生微生物的计数 198
一、普通显微镜的直接计数 198
（一）利用血球计数板计数 199
（二）应用Peteroff-Hauser计菌器计数 201
（三）采用目镜计数网计算 202
（四）以涂片面积与视野面积之比估算 203
（五）沉积物中细菌的稀释计算法 203
二、应用超滤膜计数水生细菌 205
（一）超滤膜萌发计数法 205
（二）超滤膜直接镜检法 206
三、荧光显微镜的计算法 207
（一）水样中细菌的荧光计数法 207
（二）泥样中细菌的荧光计数法 208
四、平板计数及大肠杆菌群的检验 209
（一）饮用水（自来水、深井水、泉水）的检验 209
（二）游泳池水和海滨游泳场池水的检验 214
（三）污水（河水、港湾水等）的检验 216
（四）沉积物中的微生物平板计数 219
（五）菌落计算原则 220
五、泥样中厌氧菌的计数法 221
六、泥样中放线菌、酵母菌和霉菌与总菌数的计数比较 223
七、液体稀释法（MPN法） 227
（一）反硝化细菌的计数 229
（二）底泥中氨化细菌数量的测定 238
（三）水中附着的纤维分解菌的数量测定 239
（四）粪大肠杆菌群的数量测定 241
八、应用标准比浊管测菌数 247
九、使用分光光度计测定细菌数量 249