第一章 PCR导论 1
第一节 PCR实验室的建立 4
第二节 标准PCR方法:β-珠蛋白DNA的快速分离和PCR分析 10
第三节 PCR中遗留污染的酶法控制 14
第四节 表面紫外线照射减少PCR污染 19
第五节 PCR反应的特异性、效率和忠实性 23
第六节 PCR的优化和疑难解析 33
第七节 长距离PCR 41
第二章 样品的制备 52
第一节 用基因释放剂快速制备PCR扩增用的DNA 53
第二节 石蜡包埋组织的PCR扩增:样品制备与固定的效果 64
第三节 RNA纯化 74
第三章 引物设计 88
第一节 PCR引物设计的一般概念 88
第二节 错配和简并引物的设计和应用 95
第三节 多重PCR 105
第四章 PCR产物检测:定量和分析 117
第一节 PCR产物的免疫检测 119
第二节 使用AmpliSensor分析的定量PCR 131
第三节 用任意引物PCR进行DNA指纹分析 138
第四节 用任意引物PCR进行RNA指纹分析 145
第五节 原位PCR 162
第六节 单链构象的多态性 173
第七节 用异源双链体迁移率测定技术对人免疫缺陷病毒进行遗传亚型分类 178
第八节 灵敏快速的突变检测方法--固相化学裂解法 192
第五章 RNA样品的PCR 201
第一节 PCR法测定基因表达的相对差异 205
第二节 运用磷光剂驻存技术的定量液相杂交PCR 218
第三节 用SNuPE法定量分析单个核苷酸差异的等位基因特异性序列 238
第四节 内部外显子和3′末端外显子的捕捉 241
第五节 表达PCR 261
第六节 PCR的介导的克隆 267
第一节 cDNA末端的快速扩增 268
第二节 Panhandle PCR 288
第三节 差异显示法检测和鉴定表达基因 295
第四节 用磁珠和PCR构建减法cDNA文库 310
第五节 PCR法筛选DNA文库 321
第六节 YAC文库的自动化筛选 327
第七节 PCR无限增殖法得到重排免疫球蛋白基因表达文库 344
第七章 PCR测序 359
第一节 PCR扩增DNA产物的直接测序 359
第二节 循环测序法 371
第八章 PCR产物的克隆 380
第一节 PCR产物的克隆策略 380
第二节 PCR产生的DNA片段的克隆和分析 393
第九章 PCR法制备突变体 416
第一节 致突变PCR 416
第二节 PCR突变和体内重组 421
第三节 PCR法构建突变基因及新型重组基因 429
第四节 快速PCR定点突变 437
第十章 其他扩增技术 445
第一节 连接酶链式反应(LCR) 450
第二节 3SR检测法的优化及特点 467
第三节 单管定量NASBA检测HIV-1RNA 478
附录 487
用于引物选择的计算机软件 487
PCR中使用的修饰寡核苷酸 492
供应商 496
商标 499
索引 503