第一章 白细胞介素—2基础理论 1
第一节 白细胞介素—2发现背景 1
一、IL—2发现的意义 1
二、促有丝分裂淋巴因子和T细胞克隆 2
三、白细胞介素名称的由来 5
第二节 白细胞介素—2的生物活性和理化性质 6
一、IL—2的生物学活性 6
二、IL—2的理化性质 8
第三节 白细胞介素—2基因与分子结构 10
一、IL—2基因 10
二、IL—2分子一级结构 10
三、IL—2分子高级结构 11
四、IL—2分子结构与功能的关系 12
第四节 白细胞介素—2受体 14
一、IL—2R的结构与作用模式 14
二、IL—2R与T细胞免疫反应的调节 18
三、IL—2R与T细胞循环进程的调节 20
四、IL—2R系统对免疫学和治疗学的影响 22
第二章 天然白细胞介素—2的制备、纯化 25
第一节 T细胞白血病细胞株Jurkat—FHCRC产生的白细胞介素—2的制备与纯化 25
一、筛选分泌IL—2的Jurkat细胞 25
二、Jurkat细胞产生IL—2的最适条件 25
三、Jurkat细胞产生的IL—2纯化 30
第二节 人外周血和人扁桃体淋巴细胞白细胞介素—2的制备与纯化 30
一、用人PBL诱生IL—2及其纯化 30
二、用人扁桃体淋巴细胞诱生IL—2及其纯化 31
一、人脾脏淋巴细胞IL—2的制备 32
第三节 人脾脏淋巴细胞白细胞介素—2的制备与纯化 32
二、人脾脏淋巴细胞IL—2的纯化 37
第四节 纯化天然白细胞介素—2性质鉴别 40
一、PHA残留量测定 40
二、NIL—2糖蛋白染色 46
三、人脾脏纯化IL—2对温度的稳定性 47
四、人脾脏纯化IL—2的特异性鉴别 49
五、NIL—2纯化过程中IL—2抑制因子的去除 51
第五节 天然白细胞介素—2制备及检定要求 54
一、人IL—2制备及检定规程 54
二、乙型肝炎HBsAg、抗HBc、HBeAg检测方法 59
三、丙型肝炎抗体检测方法 64
四、PHA残留量测定——PHA血凝测定法 66
一、IL—2基因克隆及表达 67
第一节 表达人白细胞介素—2重组菌的构建和重组菌的发酵培养 67
第三章 重组白细胞介素—2的制备、纯化 67
二、rIL—2工程菌的发酵培养 70
第二节 重组白细胞介素—2的纯化 70
一、rIL—2纯化的一般策略 70
二、rIL—2包含体的制备和氧化复性 76
三、rIL—2的纯化 79
四、rIL—2纯化过程中影响活性的因素 84
第三节 重组白细胞介素—2制备和检定规程 87
一、基因工程人白细胞介素—2注射剂制造规程 87
二、基因工程人白细胞介素—2注射剂检定规程 92
三、附录：卫生部人用重组DNA制品质量控制要点 95
第四章 白细胞介素—2活性测定 103
第一节 白细胞介素—2的生物学测定法 103
一、生物测定中常用的细胞 103
二、3~H—TdR掺入法 104
三、MTT比色分析法 106
第二节 白细胞介素—2的免疫学测定法 111
一、酶免疫测定法 112
二、放射免疫测定法 114
第三节 白细胞介素—2标准品 117
一、第一国际IL—2标准品的建立 117
二、第一国际IL—2标准品的使用 119
三、我国建立的IL—2国家标准品 119
第五章 白细胞介素—2临床前药理毒理 121
第—节 白细胞介素—2代谢动力学 121
一、IL—2在小鼠的半衰期 121
二、IL—2在人体的半衰期及血浓度 122
三、延长IL—2半衰期的方法 124
一、对EAC实体瘤的抑制作用及对荷瘤鼠生存期延长作用 125
第二节 天然白细胞介素—2与重组白细胞介素—2抗肿瘤效果比较 125
二、对S180实体瘤的抑制作用及对荷瘤鼠的生存期延长作用 128
三、对U14宫颈癌实体瘤的抑制作用及对荷U14腹水瘤小鼠的生存期延长作用 130
第三节 白细胞介素—2毒理学研究 132
一、IL—2的急性毒性实验 132
二、NIL—2对大鼠的长期毒性试验 135
三、NIL—2对家犬的长期毒性试验 144
第六章 白细胞介素—2和LAK细胞临床 155
第一节 LAK细胞基础 155
一、LAK细胞发现及其性质 155
二、LAK细胞对小鼠的抗肿瘤作用 156
三、LAK细胞活性测定 165
四、LAK细胞制备 170
一、全身性应用IL—2临床疗效 173
第二节 白细胞介素—2的临床疗效 173
二、局部应用IL—2临床效果 174
三、低剂量IL—2的临床效果 179
四、IL—2与其它淋巴因子及化疗、联合应用的临床疗效 202
第三节 IL—2/LAK联合应用的临床效果 204
一、IL—2/LAK对黑色素瘤、肾癌、非何杰金氏淋巴瘤的临床疗效 206
二、IL—2/LAK对恶性胸腹水的临床疗效 209
三、IL—2/LAK对其它肿瘤的临床疗效 212
四、IL—2与IL—2/LAK联合治疗的疗效比较 213
第四节 白细胞介素—2和LAK细胞临床应用的一些新观点 219
一、肿瘤治疗中IL—2剂量之争——高剂量与低剂量治疗 219
二、IL—2免疫治疗疗效的机理：非特异性LAK活性与特异性T细胞 221
第一节 肿瘤浸润淋巴细胞性质 224
一、原位TIL的性质 224
第七章 白细胞介素—2激活的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)及其临床应用 224
二、新鲜分离TIL的性质 225
三、IL—2培养激活后TIL的性质 226
第二节 TIL的分离和培养 227
一、TIL的分离 227
二、TIL的培养、增殖 231
第三节 IL—2激活的TIL在体内器官及肿瘤组织中的分布特征 234
第四节 肿瘤浸润淋巴细胞抗肿瘤作用的实验研究 238
一、TIL的体外抗肿瘤作用 238
二、TIL的体内抗肿瘤作用 240
第五节 TIL的临床应用 242
一、国外TIL临床应用 242
二、本实验室TIL临床应用 246
主要参考文献 251