第一章 绪论 1
第一节 概述 1
第二节 生物化学与分子生物学实验技术发展简史 1
第三节 实验的基本要求 3
第四节 实验记录和实验报告的撰写 8
第二章 实验基本操作技能 10
第一节 实验技能的内涵 10
第二节 常用玻璃仪器及器皿的使用、洗涤和干燥 11
第三节 常用仪器及设备的使用 13
第三章 生物化学基本理论 15
第一节 层析技术 15
第二节 离心技术 24
第三节 电泳技术 28
第四节 透析和浓缩 33
第五节 盐析技术 34
第四章 生物化学实验 35
实验一蛋白质的盐析与透析 35
实验二凝胶层析法分离蛋白质 37
实验三酶作用的特异性和影响酶促反应速度的因素 38
实验四琥珀酸脱氢酶的作用及丙二酸的竞争性抑制作用 41
实验五酮体的生成和氧化 43
实验六精氨酸酶在尿素生成中的作用 44
实验七维生素C的性质及含量测定 46
实验八血钙的测定 47
实验九血清胆固醇总量的测定 49
实验十双缩脲法测定蛋白质 52
实验十一酵母蔗糖酶Km值的测定 54
实验十二饱食、饥饿和激素对小鼠肝糖原含量的影响 56
实验十三转氨基作用与血清谷丙转氨酶活性的测定 57
实验十四赖氏法测定血清丙氨酸氨基转移酶 60
实验十五碘-淀粉比色法测定血清淀粉酶 62
实验十六血清乳酸脱氢酶同工酶的电泳分离 64
实验十七血清蛋白质的凝胶等电聚焦电泳 65
实验十八血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳定量测定 67
实验十九聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳分离血清蛋白质 69
实验二十血清甘油三酯的测定 72
实验二十一GPO-PAP法测定血清(浆)甘油三酯 74
实验二十二蛋白质含量的测定(凯氏定氮法) 76
实验二十三溴甲酚紫法测定血清白蛋白 78
实验二十四胡萝卜素的柱层析分离 79
第五章 分子生物学基本理论 81
第一节 分子生物学实验室需要的仪器配置 81
第二节 分子生物学实验基本操作技术 84
第三节 基因操作概述 88
第六章 分子生物学基本实验 93
实验一肝组织核酸的分离与鉴定 93
实验二核酸的定量分析 94
实验三大肠埃希菌感受态细胞的制备 96
实验四DNA的转化及阳性克隆的筛选 98
实验五DNA的限制性酶切反应 99
实验六多聚酶链式反应(PCR)技术 101
实验七RT-PCR扩增目的基因 103
实验八实时PCR检测乙型肝炎病毒(HBV)核酸 106
第七章 综合性实验 109
第一节 综合性实验概述 109
第二节 综合性实验 109
实验一血清γ-球蛋白的分离提纯 109
实验二糖尿病诊断实验 111
实验三基因组DNA的分离和含量测定 118
实验四RNA的分离和含量测定 125
实验五质粒DNA的提取与鉴定 132
第八章 设计性实验 140
第一节 设计性实验概述 140
第二节 设计性实验 141
实验一唾液淀粉酶最适pH的测定 141
实验二RT-PCR 142
第九章 虚拟仿真实验 143
第一节 虚拟仿真实验概述 143
第二节 虚拟仿真实验 144
实验一利用Mapviewer查找人白介素IL-18基因序列、mRNA序列和氨基酸序列 144
实验二SLC11A1蛋白跨膜结构域的预测 148
实验三抗菌肽LL37的理化性质分析和二级结构预测 151
参考文献 155
附录 156