第一篇 植物基因工程技术 3
第一章 基因工程常用的工具酶和克隆载体 3
第一节 常用的工具酶 3
一、限制性内切核酸酶 3
二、DNA连接酶 12
三、DNA聚合酶 14
四、DNA修饰酶 20
五、单链内切核酸酶 22
六、外切核酸酶 23
第二节 基因工程中常用的克隆载体 24
一、质粒克隆载体 25
二、病毒（噬菌体）克隆载体 40
三、染色体定位整合克隆载体 65
四、启动子探针型克隆载体 71
五、诱导型表达克隆载体 72
六、组织特异性表达克隆载体 74
七、含增强子表达克隆载体 75
第二章 遗传转化体系的建立 78
第一节 遗传表达载体的构建 78
一、外源目的基因的取得 78
二、基因克隆载体的分离提纯 89
三、重组DNA分子的形成 91
四、重组DNA分子（重组子）的筛选 103
第二节 植物遗传转化受体系统的建立 108
一、植物遗传转化受体系统的条件 109
二、用于植物遗传转化受体系统的材料 111
三、植物基因转化受体系统建立的程序 114
第三章 遗传转化方法 119
一、以载体为介导的间接转化 119
二、DNA直接转化法 126
三、种质系统介导基因转化 132
四、植物转基因方法评价 135
第四章 转基因植株的检测与鉴定 137
第一节 外源基因转化的鉴定 137
一、标记基因的检测 137
二、PCR检测 142
三、分子标记 144
四、Southern杂交 145
第二节 外源基因表达的检测 148
一、外源基因表达在转录水平的检测 148
二、外源基因表达的蛋白质水平的检测 152
三、生理生化检测法 161
四、生物鉴定法 161
第二篇 牧草基因工程概述 165
第一章 牧草基因工程的兴起与发展 165
一、豆科牧草转基因研究进展 165
二、禾本科牧草和草坪草基因工程研究进展 170
第二章 牧草基因工程育种的目标与存在的问题 175
第一节 牧草基因工程抗病育种 175
一、牧草病害的种类 176
二、牧草病害的防治办法 177
三、牧草抗病基因工程育种 179
第二节 牧草基因工程抗虫育种 191
一、牧草虫害的种类 191
二、虫害的防治 192
三、牧草抗虫害基因工程 194
第三节 抗非生物胁迫基因工程育种 200
一、抗除草剂基因工程育种 200
二、抗逆基因工程育种 207
第四节 品质改良 221
一、消化率 221
二、蛋白质 224
三、可溶性碳水化合物 224
四、抗营养因子 225
第五节 牧草转基因存在的问题 226
第三篇 冰草转基因 231
第一章 冰草转基因研究的历史背景与意义 231
一、冰草转基因研究的历史背景 231
二、冰草转基因研究的意义 232
第二章 冰草组织培养再生体系的建立 233
第一节 以幼穗为外植体的冰草属植物组织培养再生体系的建立 233
一、材料与方法 233
二、结果与分析 235
三、结论 241
第二节 以成熟胚为外植体的冰草属植物组织培养再生体系的建立 241
一、以蒙农杂种冰草成熟胚组织培养再生体系的建立 241
二、四种冰草成熟胚组织培养再生体系的建立 246
第三节 冰草愈伤组织细胞悬浮培养初探 249
一、材料与方法 249
二、结果与分析 250
三、结论 251
第三章 冰草的遗传转化及分子检测 253
第一节 冰草遗传转化体系的建立 253
一、目的基因 253
二、遗传表达载体的构建 253
三、冰草的遗传转化 257
第二节 转基因冰草植株的分子检测 258
一、材料与方法 258
二、结果与分析 265
第四章 转基因冰草植株的生物学特性及抗性鉴定 271
第一节 转基因冰草植株的生物学特性 271
一、材料与方法 271
二、结果与分析 272
三、结论 274
第二节 转p5CS基因冰草植株的抗旱性鉴定 274
一、材料与方法 274
二、结果与分析 278
三、结论 285
第三节 转p5CS基因冰草植株的耐盐性鉴定 285
一、材料与方法 285
二、结果与分析 285
三、结论 290
第四节 转CBF4基因冰草植株的抗旱性鉴定 290
一、材料与方法 290
二、结果与分析 290
三、结论 296
主要参考文献 297
附录 314
附录一 常用抗生素的配制和使用浓度 314
附录二 常用培养基的配制 315
附录三 野生型λDNA上限制性内切核酸酶的识别位点 317