第一章 概论 1
第一节 PCR技术的发明 1
第二节 PCR技术的发展 1
第三节 PCR技术基本原理 2
第四节 PCR技术的特点 4
第五节 PCR技术的标准化操作 5
第六节 PCR技术有关影响因素 11
第二章 PCR技术的类型及应用 14
第一节 免疫PCR技术 14
第二节 定量PCR技术 15
第三节 原位PCR技术 16
第四节 毛细管PCR技术 20
第五节 其他种类PCR技术 21
第六节 几种特殊的PCR扩增模式 23
第三章 PCR技术实验条件 26
第一节 PCR引物的设计 26
第二节 GOLDKEY数据库的应用 28
第三节 PCR反应条件的优化 32
第四节 DNA模板制备方法 34
第五节 RNA模板制备方法 42
第六节 PCR扩增产物检测的方法 45
第七节 电泳凝胶摄影技术 62
第四章 PCR技术质量控制 64
第一节 PCR污染及预防 64
第二节 避免扩增的DNA序列交叉污染 65
第三节 PCR技术的室内质量控制 67
第五节 PCR技术在临床检测中存在的问题及分析 69
第四节 PCR技术的室间质量控制 69
第五章 基因诊断的临床意义 74
第一节 基因诊断的应用范围 74
第二节 病毒性肝炎 75
第三节 性传播性疾病 81
第四节 肺部病原体感染 85
第五节 细菌性脑膜炎 87
第六节 在癌基因检测中的意义 90
第七节 几种特殊癌基因检测意义 93
第六章 PCR检测性病病原体 106
第一节 PCR检测人类免疫缺陷病毒 106
第二节 PCR检测梅毒螺旋体 110
第三节 PCR检测淋病奈瑟氏菌 112
第四节 PCR检测解脲支原体 113
第五节 PCR检测沙眼衣原体 115
第六节 PCR检测单纯性疱疹病毒 116
第七节 PCR检测乳头瘤病毒 117
第八节 PCR检测人类巨细胞病毒 119
第九节 PCR检测白色念珠菌 121
第七章 PCR检测肝炎病毒 123
第一节 PCR检测甲型肝炎病毒 123
第二节 PCR检测乙型肝炎病毒 125
第三节 PCR检测丙型肝炎病毒 126
第四节 PCR检测丁型肝炎病毒 128
第五节 PCR检测戌型肝炎病毒 129
第六节 PCR检测庚型肝炎病毒 130
第一节 PCR检测霍乱弧菌 132
第八章 PCR检测肠道致病菌 132
第二节 PCR检测伤寒杆菌 133
第三节 PCR检测沙门氏菌 134
第四节 PCR检测志贺氏菌 135
第五节 PCR检测出血性大肠杆菌0157:H7 136
第六节 PCR检测肠毒性产气荚膜杆菌 138
第九章 PCR检测呼吸道致病菌 140
第一节 PCR检测结核分枝杆菌 140
第二节 PCR检测肺炎支原体 141
第三节 PCR检测肺炎衣原体 143
第四节 PCR检测嗜肺军团菌 144
第五节 PCR检测绿脓杆菌 145
第六节 PCR检测肺炎杆菌 147
第一节 PCR检测脑膜炎双球菌 148
第十章 PCR检测脑膜炎病原体 148
第二节 PCR检测新型隐球菌 149
第三节 PCR诊断结核性脑膜炎 150
第四节 多重PCR诊断细菌性脑膜炎 151
第十一章 PCR检测寄生虫 153
第一节 PCR检测恶性疟原虫 153
第二节 PCR检测阿米巴原虫 154
第三节 PCR检测弓形虫 156
第四节 PCR检测卡氏肺孢子虫 157
第五节 PCR检测间日疟原虫 158
第六节 PCR检测克氏锥形虫 159
第七节 PCR检测利什曼原虫 161
第八节 PCR检测隐孢子虫 162
第九节 PCR检测旋毛形线虫 163
第十节 PCR检测肠内贾第氏虫 164
第十二章 PCR技术在遗传性疾病诊断中的应用 166
第一节 PCR诊断缺失型α—地中海贫血 166
第二节 PCR诊断非缺失α—地中海贫血 167
第三节 PCR检测β—地中海贫血 168
第四节 PCR诊断甲型血友病 168
第五节 PCR诊断乙型血友病 170
第六节 诊断笨丙酮尿症 171
第七节 PCR诊断视网膜色素变性 171
第八节 PCR诊断先天性肾上腺皮质增生症 172
第九节 PCR诊断镰状细胞性贫血 173
第一节 PCR检测白血病时T细胞受体基因重排 175
第十三章 PCR技术在检测肿瘤基因中的应用 175
第二节 PCR检测白血病时免疫球蛋白重链基因CDR—序列重排 177
第三节 PCR检测慢性粒细胞性白血病时bcr—ab1嵌合基因的RNA序列 179
第四节 PCR检测常见肿瘤ras基因突变 180
第五节 PCR检测常见肿瘤APC基因 185
第六节 PCR检测常见肿瘤C—erbB2基因 186
第七节 PCR检测常见肿瘤DNA聚合酶—基因的突变 188
附录1 PCR技术所用设备 190
附录2 常用贮存液 198
附录3 PCR实验常用缓冲液 201
附录4 电泳缓冲液 204
附录5 载样缓冲液 205
附录6 常用裂解液 206