第一章 概述 1
第一节 食品病原微生物在自然界的分布 1
一、土壤里的病原微生物 1
二、空气中的病原微生物 2
三、水中的病原微生物 3
第二节 食品中的病原微生物 4
—、肉与肉制品的病原微生物 5
三、乳与乳制品的病原微生物 7
二、蛋与蛋制品的病原微生物 7
四、罐头食品的病原微生物 8
五、水产品及其制品的病原微生物 9
六、果蔬及其制品的病原微生物 10
第三节 微生物引起的食品腐败变质 11
一、微生物对碳水化合物的分解变质 12
二、微生物对蛋白质的分解变质 13
三、微生物对脂肪的分解变质 16
第四节 食品病原微生物检验的重要意义 17
第五节 食品卫生细菌学检验的意义 18
一、鸡胚的发育 20
第六节 食品病原微生物检验室规则 26
一、光学显微镜 29
第二章 常用仪器设备 29
第一节 常用仪器及其使用要领 29
二、荧光显微镜 36
三、培养箱 38
四、干热灭菌箱 40
五、高压蒸汽灭菌器 42
六、流动蒸汽灭菌器 44
七、冰箱 44
八、电动抽气机 46
九、水浴箱 47
十、过滤器 48
十—、净化工作台 50
十二、电动离心器 52
十三、接种环 53
第二节 玻璃器皿和清洁灭菌 54
一、玻璃器皿的种类 54
一、磷酸盐缓冲液(0.1M，pH5.3～8.0) 55
二、玻璃器皿的清洁法 57
三、玻璃器皿的灭菌 59
第三章 细菌的染色 60
第一节 细菌染色的目的 60
第二节 细菌染色用的染料 60
一、酸性染料 61
二、碱性染料 61
三、复合染料 61
四、单纯染料 61
第三节 染色的原理 63
一、物理方面 63
二、化学方面 63
第四节 细菌染色的基本方法 64
三、影响染色的因素 64
一、涂片 64
二、干燥 65
四、染色 65
三、固定 65
五、媒染剂 66
六、脱色 66
七、复染 67
八、染色标本的保存和封片法 67
第五节 常用染色剂的配制和染色法 68
一、革兰氏染色 68
二、抗酸性细菌染色法 69
三、负染色法 71
四、活体染色 72
五、异染颗粒染色 72
六、鞭毛染色 73
七、荚膜染色 74
八、芽胞染色 76
九、血片染色 77
十、螺旋体染色 78
第六节 病毒常用的染色法 80
—、吖啶橙染色法 80
二、包涵体(内基氏小体)染色 81
三、原生小体染色——姬姆萨氏染色法 83
五、支原体菌落染色 84
四、立克次氏体染色(Macchiavello法) 84
第一节 培养基的主要成分 86
第四章 培养基制备 86
第二节 一般培养基的制备程序 89
第三节 培养基pH的测定与调整 93
一、0.02%酚红指示剂配制 93
二、标准色管的配制 93
三、培养基pH的测定和调整 94
第四节 常用培养基的制备 97
一、基础培养基的制备 97
二、增菌培养基的制备 101
三、选择性和鉴别性培养基的制备 107
四、生化反应用培养基 125
五、专用培养基 136
第五章 细菌的接种和培养技术 146
第一节 细菌接种的一般技术 146
一、接种环(针)的使用法 146
二、平板划线接种法 147
三、斜面接种法 148
四、倾注接种法 149
五、穿刺接种法 150
六、液体接种法 150
第二节 细菌特殊培养的技术 150
二、二氧化碳培养法 151
一、一般培养法 151
三、厌氧培养法 152
第一节 缓冲液的配制 155
第六章 试剂配制与有关试验技术 155
二、碳酸盐缓冲液(0.5M，pH9.2～10.7) 156
三、构橼酸盐缓冲液(0.1M，pH3.0～6.2) 157
四、PBS缓冲液(0.1M磷酸盐，pH7.4) 158
五、PBS缓冲液(0.01M磷酸盐，pH7.4) 158
六、pH9.2碳酸盐甘油缓冲液 159
七、甘油磷酸盐缓冲液 159
八、VB液 159
十一、硼酸盐缓冲中液(pH8.6) 160
十、巴比妥缓冲液(0.1M，pH8.6) 160
九、GVB液 160
十二、硼酸—氢氧化钠缓冲液(pH8.6) 161
十三、巴比妥—醋酸盐缓冲液(0.125M，pH8.6) 161
第二节 当量溶液的配制 161
一、1N硫酸溶液 163
二、1N盐酸溶液 163
三、1N氢氧化钠溶液 164
四、常用酸碱的近似浓度 164
第三节 pH指示剂 165
一、各种指示剂的配制 165
二、0.5％酸性品红指示剂 166
二、固化红细胞的制备 167
第四节 血清学反应用有关试剂 167
一、红细胞悬液的制备 167
四、红细胞鞣酸处理 168
三、脏粉的制备 168
五、溶血素效价测定 169
六、补体效价测定 171
七、抗原效价测定 173
八、补体结合反应用标准比色管配制 176
九、补体结合反应试例 178
十、扩散琼脂的制备与制板 178
十一、对流免疫电泳琼脂胶板的制备和电泳 180
十二、抗体的提纯 182
十三、IgG标记荧光色素法及提纯法 184
十四、炭粉与炭血清和炭抗原的制备 187
十五、乳胶凝集试验 191
十六、半数致死量(LD50)测定试验 193
十七、免疫保护试验技术 199
第五节 其他试剂的配制 201
一、10倍Hank母液的配制 201
二、Hank使用液的制备 202
三、克氏固定液的配制 202
四、Bouin固定液的配制 202
八、营养液的配制 203
七、0.5%乳蛋白水解物的配制 203
六、10％福尔马林生理盐水固定液的配制 203
五、Carnoy固定液的配制 203
十、K01mer稀释液的配制 205
九、Alsever氏液的配制 205
十一、补体贮存液的配制 206
十二、红细胞悬液保存湘的配制 206
第六节 生化用试剂和试验法 207
一、V-P试验 207
二、半固体琼脂V-P试验 208
三、MR(甲基红)试验 208
四、β—半乳糖苷酶试验 209
五、靛基质(吲哚)试验 210
六、硫化氢产生试验 211
八、氧化酶试验 212
七、尿素分解试验 212
九、硝酸盐还原试验 213
十、硝酸盐氰化钾试验 214
十一、链激酶试验 215
十二、卵磷脂酶试验 215
十三、磷酸酶试验 216
十四、脱氧核糖核酸酶试验 216
十五、血浆凝固酶试验 217
第七章 病毒检验基础技术 219
第一节 病毒材料的处理 219
第三节 鸡胚培养法 220
第二节 动物接种试验 220
二、鸡胚接种和收获方法 221
第四节 组织培养法 225
一、组织培养原理 225
二、单细胞的制备与培养法 226
三、细胞培养的病变现象 229
第五节 食品中污染微量病毒的检验技术 232
一、样品的制备 233
二、接种和培养 234
三、病毒的鉴定 234
第一节 实验小动物饲养管理的一般原则 235
第八章 实验小动物的饲养管理和动物试验 235
第二节 小动物饲养管理和繁殖 236
一、家兔 236
二、小白鼠 238
三、豚鼠 240
四、黄金地鼠 241
五、大白鼠 243
第三节 动物试验 244
一、动物试验前的准备工作 244
二、动物接种方法 247
三、接种动物的观察 254
四、接种动物的死后剖检 254
五、采血方法 256
第一节 食品沙门氏菌的检验 258
第九章 食品病原菌的检验 258
一、增菌培养 261
二、分离培养 263
三、生化反应试验 265
四、凝集反应法 276
五、免疫染色法 284
六、荧光抗体法 286
七、酶标记法 289
八、沙门氏菌噬菌体裂解试验 291
第二节 食品志贺氏菌属的检验 292
一、增菌培养 293
二、分离培养 294
三、生化反应试验 295
四、血清学鉴定 301
五、荧光抗体法 304
六、噬菌体裂解试验 304
第三节 食品大肠埃希氏菌的检验 305
一、分离培养 307
二、血清学鉴定 307
三、生化反应试验 308
四、其他检验方法 309
第四节 食品肺炎克雷伯氏杆菌的检验 310
一、培养检验和生化鉴定 311
第五节 食品变形杆菌属的检验 314
三、血清学鉴定 314
二、荚膜膨胀试验 314
一、分离培养 316
二、生化反应试验 317
三、血清学鉴定 318
第六节 食品金黄色葡萄球菌的检验 318
一、培养检验 320
二、血浆凝固酶试验 320
三、甘露醇发酵试验 320
五、荧光抗体法 321
六、葡萄球菌噬菌体分型法 323
七、肠毒素的血清学检验方法 325
第七节 食品溶血性链球菌的检验 326
一、常规培养法检验与鉴定 329
四、肠毒素检查试验 330
二、毒力试验 333
三、血清学鉴定 334
第八节 食品鼠疫耶新氏菌的检验 335
一、涂片镜检 336
二、分离培养 337
三、生化试验 337
四、噬菌体裂解试验 338
五、间接红细胞凝集试验 338
六、荧光抗体法 339
七、动物接种试验 339
第九节 食品伪结核耶新氏菌的检验 340
二、培养和分离 341
三、生化反应试验 341
一、涂片镜检 341
四、血清学试验 342
第十节 食品鼻疽杆菌的检验 343
一、细菌学检验与鉴定 344
二、动物接种试验 345
三、血清学试验 346
四、变态反应试验 347
第十一节 食品绿脓杆菌的检验 349
一、涂片染色镜检 350
二、培养和生化反应鉴定 350
第十二节 食品霍乱弧菌的检验 351
三、噬菌体裂解试验 351
一、样品的扦取 353
二、增菌培养 353
三、分离培养 354
四、玻片凝集试验 354
五、鉴定试验 354
六、快速诊断法 356
第十三节 食品副溶血弧菌的检验 357
一、一般培养 359
二、生化反应和氯化钠试验 360
三、血清学鉴定 361
第十四节 食品布氏杆菌属的检验 363
四、动物接种试验 363
一、分离培养 365
二、玻片凝集反应试验 367
三、生化反应试验 367
四、二氧化碳需要试验 368
五、染料抑制试验 369
六、硫化氢产生试验 370
七、A及M因子血清凝集试验 370
八、噬菌体裂解试验 371
九、病畜病人血清学试验 371
十一、动物接种试验 374
第十五节 食品巴氏杆菌属的检验 374
十、布氏杆菌素皮内试验 374
一、涂片染色镜检 377
二、分离培养 377
三、生化试验 378
四、动物接种试验 379
五、玻片凝集反应试验 379
第十六节 食品炭疽杆菌的检验 380
一、常规培养 382
二、动物接种试验 386
三、噬菌体裂解试验 386
四、青霉素串珠试验 387
五、琼脂凝胶免疫扩散法 389
六、荧光抗体法 390
第十七节 食品蜡样芽孢杆菌的检验 393
一、涂片镜检与活菌计数 395
二、培养法检验 395
三、血液琼脂培养鉴定 396
四、生化反应试验 396
五、卵磷脂酶试验 397
六、动物接种试验 398
第十八节 食品韦氏梭菌的检验 398
一、增菌培养 400
二、分离培养 400
三、生化反应试验 400
四、动物接种试验 401
五、韦氏梭菌肠毒素动物试验 402
六、肠毒素血清免疫学试验 403
七、肠毒素中和试验 406
第十九节 食品肉毒梭菌的检验 406
一、增菌培养菌体 409
二、涂片染色镜检菌体 410
三、分离培养菌体 410
四、动物体内接种法检验肉毒毒素 411
五、动物体局部反应法检验肉毒毒素 412
六、小白鼠致死量测定检验肉毒毒素 413
七、中和反应试验检验肉毒毒素 413
八、动物体外法检验肉毒毒素 416
第二十节 食品猪丹毒杆菌的检验 417
一、涂片镜检 419
二、分离培养 420
三、动物接种试验 420
四、凝集反应试验 420
五、血球凝集抑制试验 421
第二十一节 食品李氏杆菌属的检验 423
一、染色镜检 424
二、培养检查 424
三、动物接种试验 425
四、血清学鉴定 425
第二十二节 食品结核分枝杆菌的检验 425
一、涂片染色镜检 428
二、培养检查 429
三、鉴别试验 430
四、动物接种试验 431
第十章 食品病原性病毒的检验 433
第一节 食品口蹄疫病毒的检验 433
一、补体结合反应试验 433
二、中和试验 434
三、琼脂扩散沉淀试验 436
四、血清保护试验 437
五、荧光抗体法试验 438
六、免疫酶技术 438
第二节 食品猪水泡病病毒的检验 439
一、动物接种试验 440
第三节 食品猪瘟病毒的检验 442
二、血清学试验 442
一、接种健猪试验 443
二、交叉免疫试验 444
三、琼脂扩散试验 444
四、荧光抗体法 444
五、鸡新城疫病毒强化试验 445
六、胰浸液碘还原试验 445
七、酶标记抗体法试验 446
第四节 食品肝炎病毒的检验 451
第五节 食品新城疫病毒的检验 452
二、检查患鸡中的抗体 453
一、病毒的分离与鉴定 453
三、红细胞凝集抑制试验 454
第六节 食品马立克病病毒的检验 457
第七节 食品狂犬病病毒的检验 459
一、包涵体检验 460
二、动物接种试验 460
三、荧光抗体技术 461
四、补体结合反应试验 461
第十一章 食品其他病原微生物的检验 462
第一节 食品支原体的检验 462
一、取样和保存 463
二、分离培养 463
三、菌落观察和染色法 464
四、生物学特性试验 465
五、血清学试验 466
第二节 食品钩端螺旋体的检验 467
一、直接镜检 468
二、培养试验 468
三、动物接种试验 469
四、血清学试验 470
第三节 食品贝氏阿克氏体的检验 472
一、培养检验 472
第四节 食品中常见产毒霉菌的检验 473
一、培养法检验 473
三、血清学试验 473
二、动物接种试验 473
二、镜检法检验 474
第十二章 食品卫生细菌学检验 478
第一节 水的卫生细菌学检验 478
一、水样的采集 478
二、细菌总数的检测 480
三、大肠菌群的检验 483
四、生活饮用水和食品生产用不的卫生标准(细菌指标) 490
第二节 食品卫生细菌学检验 490
一、食品细菌总数的检测 490
二、食品大肠菌群的检验 491
三、食品大肠菌值检验 494
四、食品大肠菌计数法检验 496