第一部分 高效液相色谱法的理论基础 1
1 简要的历史评述及基本定义和方程式 1
1-1 引言 1
1-2 基本定义和方程式 3
1-3 谱带的展宽--塔板高度和塔板数 9
1-4 分辨率 11
1-5 液相色谱的时间最佳化 14
2-1 分辨和速度的基本原理 19
2 高效液相色谱法的理论(Ⅰ)色谱柱的设计 19
2-2 影响分辨率的动力学和热力学因素 21
2-3 分离速度 25
2-4 峰展宽的动力学和塔板高度 26
2-5 实用操作条件及颗粒大小和柱长度的选择 35
2-6 柱的直径 40
2-7 制备规模的高效液相色谱 43
注1 高斯误差曲线 44
注2 保留值参数 45
注3 分配等温线及к＇值 47
3 高效液相色谱法的理论(Ⅱ)液相色谱中溶质与流动相及固定相的相互作用 49
3-1 引言 49
3-2 实验的方法 55
3-3 结论 71
4 高效液相色谱的理想化仪器设计 73
4-1 理想的液相色谱仪 73
4-2 液相色谱的仪器 74
4-3 辅助设备 94
4-4 结论 95
第二部分 高效液相色谱法的技术 97
5 液-固(吸附)色谱法 97
5-1 引言 97
5-2 填充物类型 98
5-3 吸附剂结构及与溶质的相互作用 100
5-4 高性能液-固色谱柱及柱填充物 104
5-5 液-固色谱的理论模型 106
5-6 溶剂在液-固色谱中的作用 107
5-7 吸附剂的标准化 113
5-8 实用上的问题 116
6 液-液(分配)色谱法 121
6-1 引言 121
6-2 液-液色谱的相体系 125
6-3 液-液色谱使用的载体 127
6-4 涂层载体的制备 128
6-5 前置柱的制备 130
6-6 实用方面的问题 130
6-7 离子对分配色谱法 131
6-8 高载敷量的色谱柱 133
7 键合相色谱法 135
7-1 引言 135
7-2 键合相的制备 135
7-3 键合相的效率比较 138
7-4 键合相色谱的柱和填充物 138
7-5 键合相的色谱特性 144
7-6 键合相的保留度和选择性 146
8 离子交换色谱法 149
8-1 引言 149
8-2 离子交换剂 150
8-3 离子交换色谱中的交换反应 159
8-4 离子交换色谱的流动相 163
8-5 离子交换色谱分离的典型例子：不饱和羧酸 165
9 凝胶渗透色谱法 172
9-1 引言 172
9-2 分析方面的应用 173
9-3 有关文献和文摘的问题 174
9-4 凝胶色谱的发展 174
9-5 分离过程的理论及机理 175
9-6 分配系数 177
9-7 柱和柱填充物 178
9-8 高速凝胶色谱 183
10 凝胶渗透色谱法对高聚物的鉴别 188
10-1 引言 188
10-2 凝胶渗透色谱的基本仪器设备 193
10-3 根据凝胶色谱图计算分子量的分布 196
10-4 凝胶渗透色谱的实验 211
11-1 引言 217
11 生物亲和色谱法 217
11-2 载体基体 219
11-3 间隔基 222
11-4 洗脱 222
11-5 例子：脱氢酶的分离 223
12 液相色谱法的实用入门 235
12-1 仪器 235
12-2 关于液相色谱仪操作的一些问题 237
12-3 固定相的选择 241
12-4 流动相的选择 244
13 高效液相色谱中具有典型结果的实用性实验 253
实验1 液相色谱仪器死体积的影响 253
实验2 柱填充物的粒度和类型对谱带加宽作用和谱带分辨率的影响 256
实验3 粒度对柱性能的影响及比较球形颗粒与无定形颗粒对柱性能的影响 260
实验4 粒度对分辨率和柱效影响的研究 261
实验5 样品导入技术 265
实验6 紫外检测器-断流扫描技术 268
实验7 在特定波长监控时对组分的灵敏检测 270
实验8 检测器灵敏度 274
实验9 选择性和通用型检测器的串联使用 277
实验10 柱温和流动相组成对溶质保留值的影响 278
实验11 离子交换分离对温度的依赖性 280
实验12 柱填充物的选择 282
实验13 吸附相和键合相填充物之间选择性的差别 285
实验14 梯度洗脱分离的最佳化 287
实验15 使用梯度洗脱法分离的最佳化 290
实验16 梯度洗脱在液相色谱法中的作用 293
实验17 用于定量分析的困难分离的迅速展开 295
实验18 定量测定-峰面积对峰高测量的精度比较 299
实验19 制备色谱法 301
实验20 利用分子大小来分离小分子 303
实验21 马肝脱氢酶在5＇-AMP-Sepharose 4.B.上的纯化 307
附录Ⅰ 高效液相色谱的检测器 310
AI-1 检测器参数 310
AI-1-1 噪声 310
AI-1-2 响应值 311
AI-1-5 其它参数 312
AI-1-3 响应的线性 312
AI-1-4 检测限(DL) 312
AI-2 紫外吸收(UV)检测器 313
AI-2-1 工作原理 315
AI-2-2 检测器特性 318
AI-3 折光率(RI)检测器 319
AI-3-1 工作原理 321
AI-3-2 检测器特性 322
AI-4 移动丝检测器 323
AI-4-1 工作原理 324
AI-4-2 检测器特性 325
AI-5 其它检测器 330
AI-5-1 极谱检测器 330
AI-5-2 电导率检测器 332
AI-5-3 荧光计 332
AI-5-4 其它装置 333
AI-6 结论 333
AII-1 柱的准备 335
附录Ⅱ 柱填充技术 335
AII-2 柱填充物的准备 336
AII-3 干填充技术(粒度〉20微米) 337
AII-3-1 敲击充填法 337
AII-4 湿法充填步骤 337
AII-4-1 所需设备 337
AII-4-2 淤浆充填技术 338
AII-4-3 柱头 340
AII-4-5 分配色谱法的柱子制备 341
AII-4-4 柱的活化和再调节 341
附录Ⅲ 液相色谱设备制造厂商 343
AIII-1 泵类 343
AIII-2 注样阀 343
AIII-3 检测器 343
AIII-4 注射器供应商 344
AIII-5 柱填充材料 344
AIII-6 整机液相色谱仪 345
附表 液相色谱仪 346