目录 1
第一章 微核试验简介[林真(日本)] 1
第一节 微核试验的目的与意义 1
第二节 微核试验发展的历史 3
第三节 微核试验的特征 5
第二章 微核形成的动力学问题[林真(日本)] 12
一、微核与染色体异常的关系 12
二、微核形成的概念图 13
三、观察染色体异常与微核形成时相变化过程的实验 15
四、染色体异常与微核形成的经时变化差别的模型 18
五、建立染色体异常与微核经时变化的数学模型 24
六、模型的验证 33
七、微核的DNA含量与染色体断片的关系 37
八、分裂阻断剂与微核形成 38
一、实验条件 42
第一节 小鼠体内实验 42
第三章 小鼠骨髓红细胞微核试验[林真(日本)] 42
二、预试验 48
第二节 制片和染色 51
一、动物分组与标本编号 51
二、标本制作法 54
三、染色方法 56
第三节 显微镜观察 58
一、姬姆萨染色标本的观察 58
二、AO荧光染色标本 61
三、姬姆萨染色与AO荧光染色的比较 61
第四章 人培养淋巴细胞微核试验(曹佳) 68
第一节 人外周血淋巴细胞微核试验的意义 68
第二节 胞质分裂阻滞法微核试验(CB-MNT) 69
一、试验原理 69
二、CB-MNT试验方法 71
三、对人群遗传损害监测的应用 73
一、CB-MNT法的优点 79
第三节 CB-MNT法的优缺点 79
二、CB-MNT法的缺点 84
三、展望 85
第五章 人微量外周血淋巴细胞微核直接测试法(薛开先) 91
第一节 人微量外周血淋巴细胞微核体内测试法 91
一、简史 91
二、测试和分析程序 92
三、健康人群外周血淋巴细胞 95
四、MNT的影响因素及其质量控制 97
第二节 人微量外周血淋巴细胞微核(核异常)体外测试法 99
一、G0期淋巴细胞的微核形成 99
二、人淋巴细胞微核(核异常)体外测试法的研究及程序 101
三、未经培养淋巴细胞MNF与培养淋巴细胞MNF和ACF的关系 103
第三节 微量人外周血淋巴细胞微核直接测试法的应用 104
一、化工厂矿接触人群 104
二、射线工作人员与过量照射 106
三、生活方式和环境污染 107
四、在肿瘤和抗突变研究中的应用 108
第六章 人上皮脱落细胞微核试验(杨录军曹佳) 112
第一节 简介 112
第二节 正常上皮组织及其脱落细胞形态 113
一、正常上皮组织 114
二、复层鳞状上皮细胞 115
三、柱状上皮细胞 117
四、变移上皮细胞 118
第三节 人上皮脱落细胞微核试验的技术方案 119
一、细胞收集、制片 120
二、固定 121
三、染色 121
四、镜检及微核判断标准 124
五、统计分析 124
第四节 人上皮脱落细胞微核的非整倍体毒性检测——荧光原位杂交(FISH) 124
一、细胞的收集、处理、制片 125
一、口腔粘膜细胞中的异性细胞 126
第五节 人上皮脱落细胞微核试验中的其他指标 126
三、结果 126
二、FISH步骤 126
二、尿液脱落细胞的异形细胞 128
第六节 人上皮脱落细胞微核试验的应用 129
一、人上皮脱落细胞微核率的本底值及个体差异 129
二、人上皮脱落细胞微核试验中个体需计数的细胞总数 131
三、人上皮脱落细胞微核试验的灵敏度 131
四、人上皮脱落细胞微核试验的一些应用实例 132
五、人脱落细胞微核试验亟待完成的工作 133
六、动物脱落细胞微核试验 134
第七章 大鼠肝细胞微核试验(曹佳) 139
第一节 肝细胞微核试验简介 139
第二节 大鼠原代培养肝细胞微核试验 141
第三节 试验方案述评 142
第四节 肝原代细胞MNT使用中的几个问题 143
第一节 概况 156
第八章 植物紫露草及蚕豆根尖微核试验(蔡亚娜曹佳) 156
第二节 紫露草微核试验方案 158
一、试验材料的栽培与管理 158
二、仪器和试剂 158
三、试验步骤 159
四、结果表达及污染程度判断 161
三、试剂配制 164
二、仪器用品 164
一、试验材料——松滋青皮豆 164
第三节 蚕豆(Vicia faba)根尖微核试验方案 164
四、试验步骤 165
五、试验数据的统计处理和污染程度的划分 167
六、注意事项 168
第四节 紫露草生物监测在我国的研究与应用 170
第九章 微核试验对非整倍体毒剂的检测(曹佳) 174
第一节 非整倍体的概念及与癌变的关系 174
第二节 染色体着丝点的结构和功能 177
一、检测原理及应用 180
第三节 抗着丝粒抗体染色对非整倍体的检测 180
二、CREST染色的实验方案 183
第四节 荧光原位杂交对非整倍体毒剂的检测 184
一、染色体着丝粒DNA探针 185
二、染色体端粒DNA探针 189
三、MNT中FISH技术的一些新发展 190
四、MN的FISH实验方案 193
第五节微核试验中检测非整倍体的其他方法 199
一、通过测定微核面积和DNA含量来检出非整倍体毒剂 199
二、C-带染色法用于MNT中非整倍体的检测 202
第十章 图像分析系统对微核的自动化检测(易东) 208
第一节 研究状况 208
一、红细胞MN图像识别研究概况 208
二、有核细胞MN图像识别研究概况 211
第二节 双核淋巴细胞微核图像自动化检测的研究 215
一、硬件系统及图像采集 215
三、识别过程中使用的几个重要方法 217
二、研究工作的基本框架 217
四、对系统的测试结果 225
五、展望 227
第十一章 流式细胞仪对微核的自动化检测[Nusse M(德国)Grawe J(瑞典)曹佳] 230
第一节 研究概况 230
第二节 流式仪对红细胞微核的自动化检测 233
一、研究概况 233
二、实验方法 238
三、部分实验结果介绍 239
一、研究概况 243
第三节 流式仪对有核细胞微核的自动化检测 243
二、实验方法 245
三、部分结果分析 249
第四节 问题与展望 257
附录 264
一、欧洲经济合作组织化学物质毒性实验指南——哺乳动物红细胞微核试验(1995年9月) 264
二、化学诱变剂检索目录 273
三、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核自发频率(MPCE/1000PCE) 285
四、最常用品系小鼠微核的有关参数 288