第一篇 基础实验 1
实验一 大肠杆菌感受态细胞的制备和质粒的转化 1
实验二 碱变性法提取质粒DNA 2
实验三 质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳检测 6
实验四 DNA的回收及纯化 9
实验五 PCR扩增特异基因片段 11
实验六 PCR产物的TA克隆 16
实验七 限制性内切酶酶切法鉴定重组质粒 17
实验八 真核细胞总RNA的提取 20
实验九 RNA浓度、纯度的测定及浓度的调整 22
实验十 RNA的琼脂糖凝胶检测 23
实验十一 RT-PCR扩增目的基因 27
实验十二 外源基因在大肠杆菌中的表达及其检测 30
实验十三 外源基因在哺乳细胞中的表达及其检测 35
实验十四 蛋白质印迹分析(Western blot) 37
实验十五 Southern印迹杂交 41
实验十六 Northern印迹杂交 43
实验十七 核苷酸的离子交换色谱 45
实验十八 植物组织培养培养基的配制与灭菌 45
实验十九 植物愈伤组织诱导和增殖 48
实验二十 植物细胞悬浮培养与同步化 49
实验二十一 植物原生质体融合 49
实验二十二 种子细胞筛选与细胞规模化培养 53
实验二十三 动物细胞培养器皿的清洗与灭菌 54
实验二十四 动物细胞培养用液的配制 58
实验二十五 细胞的原代培养 61
实验二十六 细胞的传代培养 63
实验二十七 细胞的冻存与复苏 64
实验二十八 细胞生长曲线的测定 65
实验二十九 组织块培养技术 67
实验三十 发酵实验用玻璃器皿的准备及灭菌技术 68
实验三十一 微生物接种技术 70
实验三十二 细菌增殖曲线的测定 70
实验三十三 机械搅拌发酵罐发酵培养枯草芽孢杆菌 71
实验三十四 活性干酵母的酒精发酵 73
实验三十五 纳豆的发酵生产及纳豆芽孢杆菌在发酵过程的生物学变化 73
实验三十六 酸奶发酵剂的制备及酸奶的酿制 75
实验三十七 酸奶中乳酸菌的测定 76
实验三十八 酶的固定化 78
实验三十九 酵母蔗糖酶的部分纯化与纯度测定 81
实验四十 酵母蔗糖酶活力测定及酶促动力学研究 85
实验四十一 酵母蔗糖酶的结晶 87
实验四十二 胰蛋白酶的亲和色谱 88
第二篇 综合实验 91
实验一 基因工程菌的发酵工艺 91
实验二 基因工程表达产物分离纯化 93
实验三 质粒的大规模制备 96
实验四 重组质粒转染人PBMC细胞 97
实验五 烟草叶片组织培养 99
实验六 HeLa细胞与鸡红细胞的融合实验 99
实验七 红曲霉摇瓶发酵制备红曲霉色素 101
实验八 血清免疫球蛋白粗品的制备 103
实验九 限制性内切酶的制备 104
实验十 蛋白质类药物的分离、纯化 106
实验十一 蛋白质类药物的相对分子量及纯度测定 108
实验十二 二维双向凝胶电泳(2-DE)分析鉴定蛋白质 110
第三篇 应用实验 112
实验一 基因工程干扰素的制备 112
实验二 基因工程干扰素效价的测定 114
实验三 青霉素效价的测定 115
实验四 重组尿激酶的效价测定 119
实验五 SOD的提取、分离机活性测定 121
实验六 动物药物卵磷脂的制备 123
实验七 菠萝蛋白酶的制备及酶活力测定 124
实验八 糖化酶的制备及酶活力测定 125
实验九 重组人促红细胞生成素(rhEPO)的体内活性测定 127
实验十 单克隆抗体的制备、纯化及鉴定 130
实验十一 基因芯片技术 151
实验十二 基因表达的系列分析(SAGE)技术 155
实验十三 蛋白质-核酸相互作用分析 157
附录 常用仪器设备简介 161