1.1 ApoH及其分子结构简介 1
1.1.1 ApoH概述 1
第1章 文献综述 1
1.1.2 ApoH的基因结构 2
1.1.3 ApoH的蛋白结构 2
1.1.4 ApoH的遗传多型性 7
1.2.1 ApoH的主要生理功能 10
1.2.2 与ApoH有关的一些病理现象 10
1.2 ApoH的生理和病理 10
1.2.3 ApoH与自身免疫疾病 11
1.3 ApoH与磷脂膜作用的研究现状 13
1.3.1 ApoH与支撑膜的相互作用 13
1.3.2 ApoH与磷脂脂质体的相互作用 13
1.4 本论文的研究工作 15
第2章 ApoH的分离纯化及表征 17
2.1 ApoH的分离纯化 17
2.1.1 仪器与材料 17
2.1.2 实验步骤 18
2.1.3 实验结果 19
2.2 毛细管电泳方法测定ApoH的相对分子质量 22
2.2.1 仪器与材料 22
2.2.2 实验结果 22
2.3 毛细管电泳方法测定ApoH的等电点 30
2.3.1 仪器与材料 30
2.3.2 实验结果 31
第3章 ApoH与气／液界面脂单层膜的相互作用 36
3.1.1 单分子层实验装置简介 37
3.1 单分子层实验模型 37
3.1.2 气／液界面脂单分子层实验方法 39
3.1.3 实验材料与实验步骤 40
3.2 ApoH自发成膜性质的研究 42
3.2.1 材料与方法 42
3.2.2 ApoH的自发成膜 42
3.2.3 气／液界面ApoH分子面积的测定 43
3.3 ApoH插入气／液界面脂单层膜的研究 45
3.3.1 ApoH插膜的π-t曲线 46
3.3.2 ApoH插膜对磷脂组成和状态的选择性 47
3.3.3 亚相pH和离子强度条件对ApoH插膜的影响 52
3.3.4 不同修饰状态的ApoH与磷脂膜作用的比较 58
3.4 实验结果讨论 59
第4章 ApoH与脂质体的相互作用 70
4.1 材料与方法 70
4.2 实验结果 74
4.2.1 ApoH的内源荧光光谱测定 74
4.2.2 磷脂组分对ApoH与脂质体作用的影响 76
4.2.3 环境温度对ApoH与脂质体作用的影响 78
4.2.4 荧光能量转移方法研究ApoH与脂质体的相互作用 79
4.2.5 疏水性自旋探针5-,7-,12-Doxyl-PC荧光猝灭实验 82
4.2.6 不同修饰状态的ApoH与脂质体的相互作用 85
4.3 讨论 87
第5章 膜结合态ApoH构象的研究 89
5.1 材料与方法 89
5.2.1 ApoH与脂质体作用的CD光谱研究 91
5.2 实验结果 91
5.2.2 pH条件对ApoH结构的影响 93
5.2.3 Ca2＋存在条件下ApoH与PG/PC脂质体的结合 94
5.2.4 亚相离子对膜结合态ApoH的脱附 95
5.2.5 碘离子和丙烯酰胺猝灭法研究ApoH与脂质体的相互作用 98
5.3 讨论 103
第6章 ApoH在膜表面的构象与其插膜能力的关系 106
6.1 材料与方法 106
6.2.2 ApoH在甲醇／水混合溶剂中的CD光谱 108
6.2 实验结果 108
6.2.1 脂单层膜方法研究ApoH的插膜 108
6.2.3 经甲醇处理后的ApoH插入DMPC单层膜的研究 112
6.2.4 毛细管电泳方法测定ApoH的界面浓度 114
6.3 讨论 119
论文总结 121
参考文献 123
博士期间发表的学术论文 145
致谢 148