实验须知 1
第一篇 医学免疫学实验 5
实验一 凝集反应 5
一、ABO血型测定（玻片凝集反应） 5
二、试管凝集反应 6
实验二 沉淀反应 8
一、双向免疫琼脂扩散 8
二、对流免疫电泳技术 9
三、单向免疫琼脂扩散试验 10
四、免疫电泳 11
实验三 巨噬细胞吞噬功能检测 13
实验四 溶血空斑试验（小室液相法） 14
实验五 T、B淋巴细胞分离技术 16
一、磁珠分离法 16
二、流式细胞仪分离法 17
实验六 E玫瑰花环形成实验（外周血T淋巴细胞分离技术） 19
实验七 T淋巴细胞转化试验 21
实验八 酶联免疫吸附试验（ELISA） 23
一、ELISA间接法 24
二、ELISA双抗体夹心法 24
三、ELISA双位点一步法 25
实验九 B淋巴细胞抗原识别受体（SmIg）的检测（直接免疫荧光法） 26
实验十 白细胞介素2的测定 27
一、3R-TdR掺入法 27
二、MTT（四甲基偶氮唑盐）法 28
实验十一 NK细胞杀伤功能测定 29
实验十二 杂交瘤技术（单克隆抗体制备） 31
一、细胞融合前准备 31
二、细胞融合选择杂交瘤细胞 32
三、抗体的检测 34
四、杂交瘤的克隆化和冻存 34
五、单克隆抗体的大量生产 35
七、影响因素、失败原因分析 36
六、单克隆抗体的鉴定 36
实验十三 免疫血清的制备 38
实验十四 细胞凋亡检测 40
一、Annexin-V-FITC单染法 40
二、形态学检测法 41
三、线粒体膜势能的检测 42
四、DNA·片断化检测 42
五、TUNEL法 43
六、caspase-3活性的检测 44
七、Annexin-Ⅴ和PI双染法 45
第二篇 医学微生物学实验 49
实验十五 电子显微镜的原理与使用方法 49
一、电子显微镜的原理 49
二、超薄切片样品的制备 50
三、样品负染技术 51
一、显微镜油镜使用法 52
实验十六 细菌的形态与结构 52
二、细菌的形态观察 54
实验十七 细菌不染色标本观察法 55
实验十八 细菌的染色标本检查法 57
一、单染色法 57
二、革兰染色法（Gram's染色法） 58
三、抗酸染色法 59
实验十九 细菌的特殊结构染色方法 60
一、荚膜染色法 60
二、芽胞染色法 60
三、鞭毛染色法 61
实验二十 细菌的人工培养方法 62
一、常用培养基的制备 62
二、细菌人工培养的接种方法 63
三、细菌生化反应 66
二、正常人体的细菌检查 70
一、自然环境中细菌的检查 70
实验二十一 细菌的分布 70
实验二十二 外界因素对细菌的影响 72
一、物理因素对细菌的影响 72
二、化学因素对细菌的影响 74
三、细菌对抗生素的敏感性测定（琼脂扩散法） 74
实验二十三 病原菌的致病性实验 76
一、透明质酸酶的扩散作用 76
二、破伤风梭菌外毒素的毒性作用 76
三、血浆凝固酶试验 77
四、内毒素测定与鲎试验 77
实验二十四 体液的杀菌作用 79
一、溶菌酶试验 79
二、正常血清的杀菌作用 79
实验二十五 病原性球菌 81
一、葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌、脑膜炎球菌和淋球菌的形态及染色性 81
二、葡萄球菌、链球菌及肺炎球菌培养特性 81
三、抗链球菌溶血毒素“O”试验 82
实验二十六 化脓性球菌脓汁的检查 84
实验二十七 肠道杆菌 85
一、肠道杆菌的形态及染色性 85
二、肠道杆菌培养特性 85
三、肠道杆菌的生化反应 85
实验二十八 粪便标本中致病性肠道杆菌的分离与鉴定 87
实验二十九 需氧芽胞杆菌 89
一、炭疽杆菌和枯草杆菌的生物学特性 89
二、炭疽杆菌串珠实验 89
实验三十 厌氧芽胞梭菌 91
一、破伤风梭菌、产气荚膜梭菌与肉毒梭菌的形态及染色性 91
二、产气荚膜梭菌的“汹涌发酵”试验 91
三、产气荚膜梭菌动物试验 92
四、厌氧培养法 92
三、白喉棒状杆菌平板毒力试验 94
二、白喉棒状杆菌的培养特性 94
一、白喉棒状杆菌形态及染色性 94
实验三十一 棒状杆菌 94
实验三十二 分枝杆菌 96
一、结核杆菌的培养特征 96
二、肺结核患者痰标本的直接涂片检查 96
实验三十三 立克次体 97
一、立克次体的形态与染色性（示教） 97
二、血清学诊断方法——外斐（Weil-Pelix）反应 97
实验三十四 螺旋体 99
一、螺旋体形态（示教） 99
二、暗视野显微观察钩端螺旋体的活动力 99
实验三十五 真菌 100
一、真菌基本形态及菌溶特点 100
二、浅部真菌病临床标本直接镜检方法 101
一、病毒的形态（示教） 102
二、狂犬病毒内基（Negri）包涵体（示教） 102
实验三十六 病毒的形态学特点 102
实验三十七 病毒的培养方法 103
一、动物接种法 103
二、鸡胚培养法 103
三、病毒组织培养法 106
实验三十八 流感病毒的血凝与血凝抑制试验 108
一、血凝试验 108
二、血凝抑制试验 109
一、碱变性法提取质粒DNA 111
实验三十九 质粒DNA提取及琼脂糖凝胶电泳 111
二、琼脂糖凝胶电泳 112
实验四十 耐药质粒DNA转化实验 113
一、感受态菌的制备 113
二、质粒转化 113
附录一 常用免疫学试剂的配制方法 115
附录二 常用染色液的配制方法 119
附录三 常用培养基的制备方法 121