第一章 绪论 1
第二章 基因克隆的四大要素 3
一、工具酶 3
二、载体 7
三、基因 17
四、受体细胞 19
五、实验过程中菌种的保存和鉴定的重要性 20
参考文献 20
第三章 DNA文库的构建 21
一、基因组文库的构建 21
二、cDNA文库的构建 23
三、DNA和RNA纯度鉴定和保存 27
四、反（逆）转录酶 28
五、两种文库的优缺点及用途 29
六、基因文库的筛选及应用 30
参考文献 31
第四章 聚合酶链式反应技术 33
一、PCR技术的原理 33
二、PCR体系 34
三、PCR条件的选择 36
四、PCR的自动化——PCR仪 37
五、PCR引物设计 38
六、耐热DNA聚合酶 39
七、提高PCR特异性的措施 41
九、几种特殊的PCR 44
八、防止污染问题 44
十、PCR技术的应用 48
参考文献 50
第五章 基因重组（克隆）方法 52
一、DNA连接酶 52
二、克隆方案 54
三、重组DNA导入受体细胞 61
四、重组子的筛选和鉴定 64
参考文献 65
第六章 DNA序列测定 67
一、DNA序列分析的基本步骤 67
二、Sanger双脱氧链终止法 67
三、Maxam-Gilbert化学测序法 71
四、焦磷酸测序技术 72
五、DNA序列测定技术的发展 73
参考文献 75
第七章 重组产物的表达、分析和纯化 76
一、重组产物的表达系统 76
二、利用大肠杆菌表达系统表达 77
三、真核表达系统的必要性及优势 81
四、表达蛋白的分离和鉴定 81
五、克隆的前沿技术 84
参考文献 88
一、分子杂交技术的基本原理 89
第八章 示踪和杂交技术 89
二、探针的标记物和标记方法 90
三、膜的选择 96
四、杂交技术的应用 97
参考文献 97
第九章 遗传多样性研究中的分子生物学方法 99
一、DNA指纹图谱 99
二、物理图谱 102
三、限制性片段长度多态性分析 104
四、随机扩增多态性DNA分析 105
五、核糖体rRNA基因分析 107
六、微卫星标记 108
参考文献 110
第十章 真核基因表达调控的研究方法 112
一、DNaseⅠ超敏感性分析 112
二、凝胶滞留法 113
三、足迹法 114
四、酵母杂交技术 116
五、免疫沉淀和染色质免疫沉淀 119
参考文献 120
第十一章 基因组学与蛋白质组学中的生物技术 122
一、基因芯片技术 122
二、蛋白质双向电泳 124
三、质谱技术 128
四、基因突变技术 130
五、噬菌体展示技术 132
六、基因表达系列分析 135
参考文献 136
第十二章 生物技术中生物信息学的应用 138
一、生物信息学 138
二、生物信息数据库 144
三、数据库的搜索、序列比对及分析 150
四、生物信息学软件 155
参考文献 158
一、蛋白质、核酸的换算 160
二、常用核酸的长度与分子量 160
附录：常用数据表 160
三、抗生素的储存溶液配制 161
四、常用核酸研究的工具酶 161
五、常用测序引物 165
六、离心机转速与相对离心力的换算 165
七、密码子表 167
八、常见市售酸碱的浓度 168
九、常用两性离子缓冲液的物性 168
十、常用克隆宿主菌株的基因型 169
十一、常用宿主菌的遗传标记 169
十二、生物信息学的相关术语 172
参考文献 176