第一篇 植物生理生化实验原理 3
第一章 植物生理生化实验技术的一般原理 3
1.1 植物材料的种类 3
1.2 植物材料的采取 3
实验58 谷类作物种子中赖氨酸含量的 3
1.3 分析样品的前处理和保存 4
1.4 待测组分的提取、分离和纯化技术 5
1.5 样品中待测组分的测定 8
1.6 实验结果的数据处理与分析 8
第二章 离心技术 11
2.1 基本原理 11
2.2 离心机的类型及主要构造 13
2.3 常用离心技术 14
2.4 分析性超速离心技术的应用 16
3.1 层析原理 18
第三章 层析技术 18
3.2 分配层析 20
3.3 吸附层析 21
3.4 凝胶层析 23
3.5 离子交换层析 24
3.6 亲和层析 25
3.7 气相色谱 26
3.8 高压液相色谱 28
3.9 毛细管电泳色谱 29
3.10 层析技术的应用实例 29
第四章 电泳技术 32
4.1 电泳基本原理 32
4.2 影响迁移率的主要因素 33
4.3 凝胶电泳 34
4.4 电泳的应用 46
第五章 红外线CO2气体分析技术 48
5.1 红外线CO2气体分析仪的工作原理 48
5.2 红外线CO2气体分析仪的类型 51
5.3 红外线CO2气体分析技术的应用 56
第六章 光学分析技术 59
6.1 紫外光-可见光分光光度法 59
6.2 原子吸收分光光度法 70
6.3 火焰分光光度法 74
6.4 荧光分光光度法 76
6.5 旋光分析法 80
第七章 气体测压技术 83
7.1 气体测压技术的类型及基本原理 83
7.2 气体测压技术的应用 85
8.1 电化学分析技术的类型及基本原理 89
第八章 电化学分析技术 89
8.2 电化学分析技术的应用 91
8.3 DDS-12A型数字式电导率仪的基本原理及使用方法 91
第九章 免疫化学技术——酶联免疫吸附测定(ELISA) 93
9.1 ELISA的原理 93
9.2 设计和合成特定的免疫原 94
9.3 抗体的制备 94
9.4 标记抗原的制备 95
9.5 ELISA测定程序的设计 95
9.6 总结 96
第十章 Southern blotting和PCR反应原理与技术 97
10.1 Southern杂交 97
10.2 PCR反应 100
第二篇 植物生理生化实验技术 105
实验1 植物组织中自由水和束缚水含量的测定 105
Ⅰ 小液流法 109
实验2 植物组织水势的测定 109
Ⅱ 折光仪法 110
Ⅲ 压力室法 110
实验3 植物细胞渗透势的测定(质壁分离法) 113
实验4 钾离子对气孔开度的影响 115
实验5 植物伤流液中糖和氨基酸的鉴定 116
实验6 根系活力的测定(TTC法) 118
实验7 植物组织中金属元素的测定(原子吸收分光光度法) 120
实验8 植物体内硝态氮含量的测定 122
实验9 植物体内硝酸还原酶活力的测定 124
Ⅰ 离体法 124
Ⅱ 活体法 126
实验10 用真空渗入法测定环境因子对光合作用的影响 128
实验11 叶绿体色素的提取、分离和理化性质 130
Ⅰ 提取与分离 130
Ⅱ 理化性质 131
实验12 叶绿素含量的测定 134
实验13 希尔反应的观察 137
实验14 核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶活性的测定 138
Ⅰ 分光光度法 138
Ⅱ 同位素法 140
实验15 乙醇酸氧化酶活性的测定 142
实验16 红外线CO2气体分析仪法测定植物光合速率与呼吸速率 144
Ⅰ 密闭系统斜率法 144
Ⅱ 密闭系统落差法 148
实验17 TPS-1便携式光合作用系统测定光合速率、呼吸速率和蒸腾速率 150
实验18 氧电极法测定光合速率和呼吸速率 153
实验19 叶绿体光诱导荧光强度的测定 157
实验20 叶绿体中甘油醛-3-磷酸脱氢酶活性的测定 159
实验21 微量定容测压法测定种子的呼吸速率 162
实验22 小篮子法(广口瓶法)测定植物的呼吸速率 165
实验23 愈创木酚法测定过氧化物酶活性 167
实验24 过氧化氢酶活性测定 169
Ⅰ 紫外吸收法 169
Ⅱ 高锰酸钾滴定法 170
实验25 氮蓝四唑(NBT)法测定超氧物歧化酶活力 172
实验26 淀粉酶活性的测定 174
实验27 脲酶Km值的测定 177
实验28 植物过氧化物酶同工酶测定(圆盘式凝胶电泳法) 180
实验29 蛋白质相对分子质量的测定(SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法) 183
实验30 植物组织中蛋白质含量的 271
测定 271
Ⅰ 茚三酮显色法 271
Ⅱ 染料结合法(DBL) 273
实验59 脯氨酸含量的测定 278
实验60 植物组织中丙二醛含量的测定 280
实验61 植物抗逆性的鉴定(电导仪法) 282
实验62 综合实验1-大豆为材料 284
实验63 综合实验2-甜叶菊叶片为材料 285
附录 286
附录1 硫酸铵饱和度常用表 286
附录2 实验中常用酸碱的相对密度和浓度的关系 288
附录3 常用固态酸、碱、盐的摩尔浓度配制参考表 288
附录4 常用酸碱指示剂 289
附录5 常用缓冲溶液的配制 289
附录6 植物组织培养常用培养基 293
附录7 常用计量单位 294
附录8 常见的植物生长调节物质及其主要性质 296
附录9 植物激素与生长调节剂在农业生产中的应用 297
主要参考文献 299