目录 1
第一章 绪论 1
一、组织和细胞培养是园艺植物生物技术的平台 1
二、基因工程技术是未来园艺生物技术的核心 2
三、生物技术对园艺科学发展的贡献 3
四、园艺生物技术的展望 6
第二章 园艺植物组织培养 7
第一节 概说 7
一、植物组织培养的基本含义 7
二、园艺植物组织培养的意义 8
一、组织培养室的设计及其基本设备 10
第二节 园艺植物组织培养的原理与技术 10
二、操作技术 11
三、培养基的成分与作用 14
四、园艺植物组织培养的技术步骤 19
第三节 园艺植物组织培养的应用 24
一、器官培养与离体繁殖 24
二、胚抢救技术 26
三、花药、花粉培养与单倍体育种 28
第三章 原生质体培养和体细胞杂交 30
第一节 原生质体研究的发展和应用 30
一、原生质体研究的发展 30
二、原生质体的应用 31
一、原生质体分离 32
第二节 原生质体分离、纯化 32
二、原生质体纯化 33
三、原生质体活力测定 34
四、影响原生质体分离的因素 34
第三节 原生质体培养及植株再生 35
一、原生质体培养方法 35
二、原生质体培养基 36
三、原生质体培养及植株再生 36
四、原生质体再生植株的遗传变异及其利用 38
第四节 原生质体融合 40
一、原生质体融合的发展 40
二、原生质体融合方法 41
三、原生质体融合方式 43
四、体细胞杂种的筛选和鉴定 44
第五节 体细胞杂种核质遗传 46
一、体细胞杂种核遗传 46
二、体细胞杂种细胞质遗传 47
第六节 原生质体融合与植物遗传改良 48
一、克服生殖障碍，创造新种质 48
二、转移有利性状，改善作物品质 49
三、转移部分染色体，获得非对称杂种 49
四、转移细胞质基因组，得到胞质杂种 50
第四章 园艺植物病毒的脱除、检测及鉴定技术 52
第一节 园艺植物病毒病 52
一、园艺植物病毒病的发生及危害特点 52
三、园艺植物病毒病的防治 53
二、重要的园艺植物病毒及类似病原 53
第二节 病毒鉴定及检测技术 54
一、生物学鉴定 54
二、血清学检测 57
三、核酸分析 63
第三节 园艺植物病毒脱除技术 66
一、热处理脱病毒 66
二、茎尖培养脱病毒 67
三、热处理与茎尖培养相结合脱病毒 68
四、微芽嫁接脱病毒 69
五、化学处理脱病毒 70
二、DNA复制和体外扩增 71
一、DNA是主要的遗传物质 71
第一节 分子标记的原理 71
第五章 分子标记技术原理与应用 71
三、DNA片段鉴定技术 74
第二节 几种常用的分子标记技术 76
一、限制性片段长度多态性 76
二、随机扩增多态性DNA 77
三、简单重复序列 77
四、扩增限制性片段长度多态性 78
第三节 分子标记的应用 79
一、种质评价和核心种质筛选 79
二、杂种鉴定和早期辅助选择 82
三、连锁遗传图的构建 84
一、功能克隆法 89
第六章 基因分离与克隆 89
第一节 基因分离的策略 89
二、图位克隆法 90
三、差异表达分析 90
四、同源序列法 91
五、转座子标签法与T-DNA标记法 91
六、基因芯片 92
第二节 基因分离和克隆的基本步骤 93
一、实验材料的选择 93
二、目标DNA片段的制备与克隆 93
三、目的基因的筛选 94
二、RNA提取 95
一、cDNA文库的构建流程 95
第三节 cDNA文库的构建 95
三、cDNA合成 96
四、将cDNA装配到载体上 97
五、文库滴度测定和扩增 100
第四节 目的cDNA克隆的筛选 101
一、菌落杂交 101
二、抗体筛选 102
三、cDNA顺序测定和连接 102
第五节 基因组DNA克隆 103
一、制备可供克隆的DNA片段 103
二、构建基因组文库的克隆载体 104
第一节 引言 107
第七章 转基因植物 107
一、发展历程 108
二、应用现状 108
第二节 植物遗传转化体系的建立 110
一、农杆菌介导的遗传转化 110
二、基因枪介导的遗传转化 112
三、原生质体介导的遗传转化 112
四、花粉管通道法 114
五、无选择标记基因的转化系统 115
第三节 外源基因整合表达的鉴定与分析 116
一、报告基因及其检测 116
二、选择标记及其检测 118
三、外源基因表达的检测 120
四、转基因沉默 121
第四节 转基因植物安全性管理 122
一、转基因植物的食品安全性 122
二、转基因植物的生态环境安全性 124
三、转基因植物安全性管理的范畴及重要性 125
第八章 果树生物技术研究进展 128
第一节 果树细胞学技术研究 128
一、茎尖培养 128
二、胚培养 129
三、花粉、花药培养 131
四、悬浮细胞培养 131
五、原生质体培养 132
第二节 果树分子标记技术应用 133
六、原生质体融合 133
一、果树分类 134
二、种质资源鉴定及品种鉴别 136
三、果树基因分子标记及辅助选择育种 139
四、构建遗传图谱 141
五、其他方面 142
第三节 果树基因分离与克隆 143
一、与果实成熟相关的基因 143
二、多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因 145
三、多酚氧化酶基因 145
四、钙调蛋白基因 145
五、自交不亲和基因 145
八、抗逆性基因 146
六、花分生组织基因 146
七、抗病性基因 146
九、着色基因 147
十、品质基因 147
十一、其他一些基因 147
第四节 果树转基因研究 147
一、常用转化方法 153
二、常用受体 154
三、选择标记基因与转化细胞的筛选 154
四、导入的外源基因 155
五、展望 157
一、蔬菜组织培养、脱毒与快速繁殖 159
第九章 蔬菜生物技术研究进展 159
第一节 蔬菜细胞学技术 159
二、蔬菜花粉、花药培养与单倍体育种 161
三、蔬菜原生质体培养和体细胞杂交 162
四、蔬菜作物细胞悬浮培养 164
第二节 分子标记技术应用 164
一、蔬菜作物遗传图谱的构建 164
二、蔬菜种质资源的研究 165
三、分子标记与比较基因组学 167
四、蔬菜作物基因的定位 169
五、分子标记辅助选择加速育种 171
六、作物指纹图谱与品种纯度鉴定 171
一、蔬菜作物抗病、虫基因的克隆 172
第三节 基因分离与克隆 172
二、与生长发育有关的基因以及其他基因的克隆 174
第四节 转基因蔬菜 176
一、蔬菜遗传转化体系的研究与转基因的发展方向 176
二、抗病转基因蔬菜 178
三、抗虫转基因蔬菜 181
四、转基因蔬菜与品质改良 182
五、转基因创造耐贮藏蔬菜 183
六、抗逆性改良转基因蔬菜 184
七、雄性不育与单性结实 186
八、转基因蔬菜生产乙型肝炎口服疫苗 186
一、花卉的离体快繁和工厂化育苗 188
第一节 组织培养技术 188
第十章 生物技术在花卉遗传改良上的应用 188
二、利用微茎尖培养获得无病毒植株 193
三、结合细胞和组织培养进行突变体的诱导和筛选 194
四、利用花药与花粉培养等进行单倍体育种 194
五、利用胚乳培养等获得三倍体植株 194
六、利用胚胎培养和体细胞杂交等克服远缘杂交障碍 195
七、利用离体培养进行种质资源的长期保存和远距离运输 195
八、通过组织培养提供生物技术育种的中间材料 195
第二节 分子标记在花卉遗传改良中的应用 195
一、分子遗传图谱的构建 196
二、遗传多样性、亲缘关系分析 196
第三节 基因工程在花卉遗传改良中的应用 197
四、标记辅助选择 197
三、农艺性状的定位 197
一、花色修饰 203
二、株型改良 204
三、增加香味 205
四、延长花期 206
五、开花调控 206
六、改良花型 207
七、创造不育基因工程 208
八、提高抗病虫能力基因工程 208
九、增加抗逆性基因工程 209
十、展望 209
参考文献 210