第一章 分子杂交概论 1
第一节 分子杂交技术及其意义 1
目录 1
第二节 核酸分子杂交 2
第三节 核酸探针 7
第二章 原位杂交技术的基本理论 25
第一节 原位杂交技术的发展及研究历史 25
第二节 原位杂交技术的基本方法和主要内容 26
第二节 地高辛原位杂交技术的研究历史与发展 33
第三章 地高辛原位杂交技术 33
第一节 实验原理 33
第三节 实验所需设备、试剂及配制 36
第四节 详细实验步骤、结果及分析 39
第五节 实验中存在的问题和经验体会 43
第四章 荧光原位杂交技术 47
第一节 实验原理 47
第二节 荧光原位杂交技术的研究历史与发展 47
第三节 操作步骤 51
第四节 实验所需设备、试剂及配制 57
第五节 详细实验步骤、结果及分析 60
第六节 实验中存在的问题和经验体会 64
第五章 抑制消减杂交 66
第一节 抑制消减杂交的概念 66
第二节 抑制消减杂交产生的背景及内涵 66
第三节 抑制消减杂交的原理 68
第四节 抑制消减杂交实验操作步骤 73
第五节 结果与分析 79
第六节 问题与解答 82
第六章 辐射性杂交 88
第一节 辐射性杂交的基本原理与发展历程 88
第二节 构建辐射性杂交图谱的方法 91
第三节 辐射性杂交图谱的应用 95
第七章 反义核酸分子杂交技术及其应用 103
第一节 反义RNA 103
第二节 反义DNA 106
第三节 反义核酸的特性 107
第四节 人工合成反义寡核苷酸的类型 108
第五节 反义寡核苷酸的化学改造 109
第六节 制备反义寡核苷酸要考虑的因素 110
第七节 反义寡聚核苷酸导入细胞的方法 114
第八节 核酶 114
第九节 反义核酸分子杂交技术的应用 118
第八章 基因芯片固相分子杂交技术理论与进展 123
第一节 基因芯片的制备方法 123
第二节 基因芯片检测的样品制备 127
第三节 基因芯片杂交 129
第四节 基因芯片检测原理 129
第五节 基因芯片杂交的结果分析 132
第六节 基因芯片的应用 132
第七节 国内外基因芯片研究及开发情况 140
第九章 基因芯片分子杂交技术在脑出血周围带基因组分析中的应用 144
第一节 实验原理 144
第二节 材料和方法 144
第三节 实验结果 149
第四节 注意事项与经验体会 150
第十章 Southern印迹 152
第一节 实验原理 152
第二节 实验方法 152
第三节 实验结果及注意事项 160
第十一章 Northern印迹杂交 161
第一节 实验原理 161
第二节 实验方法 161
第十二章 Western印迹杂交 167
第一节 蛋白质样品的制备 168
第二节 蛋白质样品的分离——不连续SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 173
第三节 转移电泳 177
第四节 免疫检测 179
第五节 Western印迹应注意的问题和出现的异常情况及对策 181
第十三章 原位分子杂交单、双标技术的应用 185
第一节 原位杂交技术检测猫脊髓和背根节中NGF mRNA的表达 185
第二节 用免疫组化及原位杂交双标技术检测猫脊髓内NGF及其mRNA的表达 191