目录 3
上篇 PCR的基本理论与技术 3
第一章 聚合酶链式反应 3
第一节 PCR技术的原理 3
第二节 PCR反应体系 5
第三节 PCR的反应温度和循环参数 11
第四节 PCR反应条件的优化 13
第五节 PCR产物的检测 21
第六节 PCR产物的纯化 24
第二章 DNA模板的制备及PCR技术中常见问题的处理 26
第一节 DNA模板的制备 26
第二节 PCR常见问题及处理 32
第三节 PCR技术中污染问题 34
第四节 PCR技术实验室的质量控制 35
第三章 原位PCR相关技术 37
第一节 原位PCR 37
第二节 原位PCR的分类 44
第三节 原位PCR技术 46
第四章 定量PCR技术 71
第一节 概述 71
第二节 基本概念 71
第三节 定量PCR技术基本原理 72
第四节 定量PCR技术的种类 72
第五节 定量PCR的主要影响因素 76
第六节 常用的定量PCR技术及其在临床上的应用 77
第七节 PCR产物的检测与定量技术 85
第八节 目前存在的问题及展望 86
第五章 其他相关PCR技术 88
第一节 反转录-聚合酶链反应 88
第二节 套式PCR 91
第三节 多重PCR 93
第四节 PCR结合等位基因特异性的寡核苷酸探针法 94
第五节 PCR结合序列特异性引物技术 95
第六节 单链构型多态性分析 96
第七节 限制性酶切片段长度多态性分析 97
第八节 MVR-PCR 98
第九节 RAPD技术 100
下篇 PCR相关技术的应用 107
第六章 PCR技术用于构建cDNA文库、测序及基因突变的检测 107
第一节 cDNA文库构建的基本技术 107
第二节 PCR测序 113
第三节 PCR技术用于基因突变的检测 116
第一节 DNA的两种多态性和遗传标记分类 119
第七章 PCR技术分析DNA序列多态性 119
第二节 PCR技术分析DNA序列多态性 120
第八章 用PCR技术分析VNTR和STR 127
第一节 概述 127
第二节 扩增片段长度多态性分析分型技术基本原理 128
第三节 用PCR技术分析小卫星VNTR基因座分型的基本技术 128
第四节 用PCR技术分析微卫星（STR）基因座 140
第二节 PCR扩增的基本方法 151
第九章 用PCR技术对性别染色体进行分析 151
第一节 概述 151
第三节 讨论 153
第十章 用PCR技术对动植物、微生物DNA进行分析 154
第一节 概述 154
第二节 实验方法与步骤 157
第三节 结果与讨论 161
第十一章 PCR技术检测CDK4敲入转基因鼠的基因型 163
第一节 实验原理 163
第二节 实验方法 163
第三节 结果 165
第四节 结果分析及注意事项 170
第十二章 PCR反应体系中模板DNA浓度与PCR扩增效率的关系 171
第一节 实验目的 171
第二节 实验方法 171
第三节 结果 173
第四节 结果分析 176