目录 1
第1部分 应用与展望 1
1 家畜生产品质的基因工程改良 3
1.1 转基因动物的培育 4
1.1.1 原核DNA微管注射法 4
1.1.2 逆转录病毒载体 5
1.1.3 多能干细胞技术 6
1.1.4 利用转基因细胞做供体进行的核移植技术 7
1.1.5 家禽的转基因研究 8
1.1.6 鱼类转基因研究 8
1.2 外源DNA的结构 9
1.3 家畜农业性状的基因工程改良 11
1.3.1 改善生长速度、肉质成分和饲料转化效率 12
1.3.2 改变牛奶成分的转基因研究 15
1.3.3 改善动物抗病性的转基因研究 17
1.3.4 改变生化代谢途径 19
1.3.5 改善羊毛生产 20
1.4 转基因家畜及生物安全性问题 20
1.5 结论 22
参考文献 23
2 转基因植物 28
2.1 转基因植物的培育方法 28
2.1.1 转化方法 28
2.1.3 分子条件 30
2.1.2 组培条件 30
2.2 已上市的转基因植物（欧洲、美国、加拿大和日本） 34
2.2.1 抗除草剂的转基因大豆、玉米、油菜、甜菜、水稻和棉花 36
2.2.2 抗虫转基因玉米、马铃薯、番茄和棉花 38
2.2.3 抗病毒、雄性不育、延迟成熟、改变脂肪酸含量等转基因作物 40
2.3 正在研制的其他转基因植物 42
2.3.1 增加新的性状 42
2.3.2 影响人类食品质量的营养性状 50
2.3.3 影响食品加工的性状 53
2.3.4 植物制药 54
2.4 展望 57
参考文献 58
3 利用基因工程酵母和丝状真菌生产发酵食品 67
3.1 引言 67
3.1.1 我们为什么要发酵食物 67
3.1.2 植物来源的发酵类食品 68
3.1.3 动物来源的发酵类食品 68
3.1.4 结论 70
3.2 重组DNA技术的应用 71
3.2.1 重组DNA技术在酵母中的应用 72
3.2.2 重组DNA技术在丝状真菌中的应用 76
3.3 工业用真菌菌株发酵效率的提高 79
3.3.1 工业用的酿酒酵母菌株 80
3.3.3 工业用丝状真菌 87
3.3.2 其他工业用酵母菌株 87
3.4 基因工程改造生物的商业应用 88
3.5 前景 89
参考文献 90
4 利用丝状真菌生产食品添加剂 96
4.1 在食品生产中应用的丝状真菌 96
4.1.1 工业用途 97
4.2 食品添加剂 100
4.3 生产食品添加剂和食品加工助剂的基因工程改造微生物的设计 101
4.3.1 基因失活 102
4.3.2 表达载体 104
4.4 工业用酶的生产过程 108
参考文献 111
5 基因工程细菌在食品发酵生产中的应用前景 112
5.1 引言 112
5.2 乳酸菌 113
5.2.1 乳酸乳球菌乳球亚种和乳脂亚种 115
5.2.2 乳杆菌 115
5.2.3 嗜热链球菌 115
5.2.4 明串珠菌 116
5.2.5 片球菌 116
5.2.6 酒球菌 117
5.3 前景与目标 117
5.3.1 生物保鲜 117
5.3.2 噬菌体抗性 119
5.3.3 胞外多糖 121
5.3.4 蛋白酶裂解 123
5.4 乳酸菌的代谢工程 124
5.5 乳酸菌对逆境的反应 125
5.6 方法 126
5.6.1 转化和载体类型 126
5.7 结论 127
参考文献 128
第2部分 欧洲的立法情况 135
6.1 引言 137
6.1.1 立法的必要性 137
6 欧洲国家有关基因工程食品的立法现状 137
6.1.2 欧盟新型食品条例是如何出炉的 138
6.2 现状 139
6.2.1 新型食品条例 139
6.2.2 存在的困难 149
6.2.3 补充和替代条例 155
6.2.4 与欧盟指令（EC）90/220/EEC的关系 157
6.2.5 德国法律中的补充性法规：新型食品和食品组成成分法定文件（NFI） 158
6.3 欧盟近来在立法上的些变化 161
6.3.1 引言 161
6.3.2 欧盟委员会建议制定“有关基因工程食物和饲料的欧洲议会及首脑理事会条例” 163
6.3.3 欧盟委员会建议制定“欧洲议会及欧洲理事会有关基因工程生物追踪检测及标注、对通过基因工程生产出来的食物和饲料进行追踪检测以及修改欧盟指令2001/18/EC之条例” 169
6.3.4 各立法程序所处的阶段 170
参考文献 171
第3部分 检测方法 173
7 基因改造生物的检测：需要思考的一些基本问题 175
7.1 遗传信息由DNA转化为表型 175
7.2 将DNA、蛋白质和表型分别作为检测的目标 177
7.3 食品级的改造 180
7.4 未知改造的检测 181
8 基于DNA分子的遗传改造检测方法 183
8.1 引言 183
8.2 最新的DNA方法学 185
8.2.1 样品采集程序 186
8.2.2 DNA的提取和纯化 186
8.3.1 DNA杂交检测技术（DNA印迹反应） 187
8.3 遗传物质的特异性检测 187
8.4 通过PCR方法扩增核酸 188
8.4.1 普通PCR 188
8.4.2 实时PCR 191
8.4.3 从生物信息学角度所做的一些重要思考 194
8.5 其他类型和比较有希望的一些DNA检测技术 195
8.5.1 热循环程序 195
8.5.2 等温扩增方法 196
8.5.3 DNA超微检测技术 196
8.5.4 DNA的质谱分析 197
8.5.5 光子互补检测技术 199
8.5.6 新型的生物检测方法 200
8.6 结论以及DNA分析方法在检测基因工程生物中的应用前景 201
参考文献 203
9 基因工程鱼及其检测方法 207
9.1 引言 207
9.2 转基因鱼的培育与生产 208
9.2.1 基因表达框架 209
9.2.2 转基因方法 212
9.2.3 基因转移和表达成功的依据 212
9.3 转基因鱼成功生产的一些实例 214
9.3.1 大西洋鲑鱼 214
9.3.2 太平洋鲑鱼 215
9.3.4 罗非鱼（O.niloticum） 216
9.3.3 罗非鱼（O.hornorum杂种） 216
9.3.5 鲤鱼 217
9.4 已加工后的转基因鱼的检测方法 217
9.5 转基因鱼的食品安全性 218
9.5.1 基因表达产物 219
9.5.2 多效作用 219
参考文献 220
10 基因工程改造作物的检测方法 223
10.1 引言 223
10.2 植物DNA的分离 225
10.2.1 采样 225
10.2.2 样品的制备 226
10.2.3 DNA的提取与分析 227
10.3.1 筛查 229
10.3 检测策略 229
10.3.2 特异性检测 232
10.3.3 定量检测 234
10.3.4 结果验证 235
10.3.5 认证 236
10.4 展望与结论 240
参考文献 241
11 检测多组分和加工类食品中基因工程应用情况的方法 243
11.1 引言 243
11.2 在检测多组分和加工类食品中含有的转基因成分时所面临的挑战 244
11.3.1 蛋白质 246
11.3 蛋白质和DNA的降解 246
11.3.2 DNA 247
11.4 分析方法 249
11.4.1 基于蛋白质的分析方法 249
11.4.2 基于DNA的分析方法 250
11.5 结论 267
参考文献 268
12 乳酸乳球菌的遗传变异及其检测 274
12.1 引言 274
12.2 乳酸乳球菌的基因组组成 275
12.3 乳酸乳球菌基因组的遗传多样性 276
12.3.1 接合 277
12.3.2 转导 278
12.3.3 转化 279
12.3.4 插入序列和转座子 280
12.3.5 乳球菌噬菌体是造成细菌遗传可塑性的原因之一 281
12.4 环境因素和DNA代谢过程对乳酸乳球菌变异的影响 282
12.5 可造成乳酸乳球菌基因组发生突变的方法 283
12.5.1 乳酸乳球菌的基因工程 284
12.6 检测乳酸乳球菌基因工程菌的策略 288
12.6.1 样品的制备 289
12.6.2 基于DNA的分析方法 290
12.6.3 基于核苷酸序列的分析方法 292
12.6.4 基于蛋白质的分析方法 293
12.7 结论 296
参考文献 297
13 食品发酵生产过程中使用的基因工程微生物检测方法 300
13.1 引言 300
13.2 微生物的性状 302
13.3 检测基因工程微生物目前可采用的方法 305
13.3.1 DNA的分离 307
13.3.2 DNA的稳定性 308
13.3.3 基因工程微生物所属生物种类的特异性检测 310
13.4 结论 312
参考文献 313
索引 315