单元一 生物技术实验要求与基本技能 1
一、实验室规则 1
二、实验记录及实验报告 2
三、实验误差与数据处理 3
四、玻璃仪器的洗涤及各种洗液的配制 5
五、常用仪器的使用方法 6
单元二 分光光度技术 14
一、光的基本知识 14
二、吸光度与透光率 15
三、朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律 16
四、分光光度计结构简介 17
五、分光光度技术的应用 18
六、分光光度法的误差 20
单元三 电泳技术 21
一、电泳的基本原理 21
二、影响迁移率的主要因素 22
三、电泳的分类 24
四、几种常见的电泳法 25
五、电泳后的染色 30
六、电泳结果处理 32
单元四 层析技术 34
一、吸附层析 35
二、分配层析 36
三、离子交换层析 37
四、凝胶层析 40
五、亲和层析 45
六、高效液相色谱 47
单元五 离心技术 51
一、基本原理 51
二、离心机的性能及用途 53
三、离心方法 55
单元六 生物大分子制备技术 58
一、材料的选择和预处理 59
二、细胞的破碎及细胞器的分离 61
三、生物大分子的提取和分离纯化 63
四、样品的浓缩、干燥、保存及纯度鉴定 66
单元七 膜分离技术 70
一、基本原理 70
二、膜的性质 70
三、透析 71
四、超滤 71
五、电渗析 72
六、纳米过滤 72
单元八 酶联免疫技术(ELISA) 73
一、基本原理 73
二、操作要点 75
单元九 生物化学实验项目 80
氨基酸及蛋白质类实验 80
实验一 薄层层析法分离鉴定氨基酸 80
实验二 纸层析法分离鉴定氨基酸 81
实验三 氨基氮的测定——甲醛滴定法 83
实验四 蛋白质的沉淀反应 85
实验五 蛋白质的两性反应和等电点测定 87
实验六 双缩脲法测定蛋白质含量 89
实验七 Folin-酚试剂法测定蛋白质含量 91
实验八 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量 92
实验九 紫外吸收法测定蛋白质含量 93
实验十 微量凯氏定氮法测定粗蛋白含量 95
实验十一 乙酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白质 99
实验十二 蛋白质的脱盐技术 102
实验十三 酪蛋白的制备 105
实验十四 SDS-聚丙烯酰胺凝胶(CPAGE)电泳测定蛋白质相对分子质量 106
实验十五 血清免疫球蛋白的分离纯化及鉴定 109
核酸类实验 114
实验十六 动物组织DNA的提取与含量测定 114
实验十七 酵母RNA的提取及定性定量鉴定 116
实验十八 质粒DNA的提取 119
实验十九 PCR基因扩增技术 122
实验二十 DNA琼脂糖凝胶电泳 124
酶学实验 125
实验二十一 温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响 125
实验二十二 琥珀酸脱氢酶的作用及其竞争性抑制 127
实验二十三 血清乳酸脱氢酶同工酶的分离与测定 129
实验二十四 大蒜超氧化物歧化酶(SOD)的分离提取与活性测定 131
实验二十五 蛋白酶活力测定 134
实验二十六 大麦萌发前后淀粉酶活力的比较 136
实验二十七 酶联免疫吸附法(ELISA)测定克伦特罗 138
实验二十八 酶联免疫吸附法(ELISA)测定食品中磺胺二甲嘧啶残留 142
实验二十九 蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法 145
维生素及激素类实验 147
实验三十 维生素B2的定量测定(荧光法) 147
实验三十一 维生素C的定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法) 148
实验三十二 脂溶性维生素的测定(高效液相色谱法) 151
实验三十三 畜禽肉中己烯雌酚残留的测定(高效液相色谱法) 154
糖类及叶绿素实验 156
实验三十四 总糖和还原糖测定(3,5-二硝基水杨酸比色法) 156
实验三十五 费林试剂热滴定法测定还原糖 158
实验三十六 血糖的定量测定(福林-吴宪法) 161
实验三十七 果胶的提取 163
实验三十八 叶绿素含量的测定(分光光度法) 165
脂类实验 167
实验三十九 粗脂肪的定量测定(索氏抽提法) 167
实验四十 卵磷脂的提取及鉴定 168
实验四十一 脂肪碘值的测定 169
实验四十二 脂肪酸价的测定 172
附录 173
一、常用溶液浓度的单位及计算 173
二、标准溶液的配制与标定 174
三、常用缓冲溶液的配制 176
四、一般化学试剂的分级 182
五、易变质和需要特殊方法保存的试剂 182
六、常用市售酸、碱的浓度 183
七、硫酸铵饱和度常用表 183
八、指示剂 184
九、元素的相对原子质量表 187
十、常见蛋白质主要参数 188
十一、常用凝胶数据表 190
十二、实验室分析用水规格及标准 193
十三、离心机转速与相对离心力的换算图 193
主要参考书目 195