目录 1
第一章 DNA分子标记技术导论 1
一、DNA分子标记发展简史 2
二、DNA分子标记的特点 3
三、DNA分子标记技术类型 4
四、主要DNA分子标记多态性的分子基础 5
五、DNA分子标记技术的应用 7
参考文献 7
第二章 植物DNA的提取与检测 9
第一节 植物DNA提取方法 9
一、植物组织器官DNA的提取方法 10
二、植物细胞器DNA提取方法 30
三、植物组织器官和细胞器共用的DNA提取方法——CsCl密度梯度超离心DNA提取法 34
第二节 植物DNA的定量和纯度测定 42
一、紫外光谱分析 43
二、EB荧光分析 44
三、琼脂糖凝胶电泳分析 45
四、荧光测定分析 46
五、二苯胺显色法测定DNA含量 46
参考文献 47
第三章 限制性片段长度多态性标记技术 50
第一节 RFLP标记技术的原理与操作 50
一、RFLP标记技术的原理 50
二、RFLP标记技术的操作步骤 53
三、操作要点 55
四、RFLP标记技术的特点 56
第二节 RFLP标记技术的应用 57
一、构建遗传图谱 57
二、基因定位 58
三、遗传多样性和物种亲缘关系 59
四、种质鉴定和遗传背景分析 74
参考文献 76
第四章 随机扩增多态性DNA标记技术和任意PCR标记技术 79
第一节 随机扩增多态性DNA标记技术 79
一、引言 79
二、RAPD标记技术的概念和原理 79
三、RAPD标记技术的特点 80
四、RAPD标记技术操作 81
五、RAPD标记技术转变为SCAR标记技术 85
六、RAPD标记技术的应用 94
第二节 任意引物PCR标记技术 108
一、引言 108
二、AP-PCR标记技术的概念和原理 108
四、AP-PCR标记技术的操作步骤 110
三、AP-PCR标记技术的特点 110
五、AP-PCR标记技术的应用 111
参考文献 127
第五章 简单重复序列标记技术和简单重复序列间区标记技术 131
第一节 简单重复序列标记技术 131
一、引言 131
二、SSR标记技术的概念和原理 131
三、SSR标记技术的特点 132
四、SSR标记技术的操作步骤 133
五、SSR标记技术在大豆研究中的应用 136
第二节 简单重复序列间区标记技术 143
一、引言 143
二、ISSR标记技术的原理 143
三、ISSR标记技术的特点 144
四、ISSR标记技术的操作步骤 145
五、ISSR标记技术的应用 146
参考文献 156
第六章 扩增片段长度多态性标记技术 162
第一节 扩增片段长度多态性标记技术的原理 162
一、引言 162
二、AFLP标记技术的原理 162
第二节 AFLP标记技术的特点 164
一、AFLP标记技术的优点 164
二、AFLP标记技术的缺点 166
第三节 AFLP标记技术的操作 166
一、AFLP标记技术的关键 166
二、AFLP标记技术的核心试剂和引物 168
三、AFLP标记技术的操作步骤 168
第四节 AFLP标记技术的发展 170
四、AFLP标记技术的注意事项 170
一、限制性内切酶的组合 171
二、AFLP多态性的检测方法 172
三、基于AFLP标记的RNA指纹的发展 172
第五节 AFLP标记技术的应用 172
一、遗传连锁图谱的构建 173
二、亲缘关系和遗传多样性研究 174
三、种质资源鉴定 178
四、分子标记辅助选择育种 181
五、基因表达和基因克隆 181
参考文献 182
第七章 表达序列标签标记技术与单核苷酸多态性标记技术 186
第一节 表达序列标签标记技术 186
一、引言 186
二、EST标记技术的原理 187
三、EST标记的产生过程 188
四、EST标记技术的特点 190
五、EST数据库 191
六、EST标记技术的应用 196
第二节 单核苷酸多态性标记技术 201
一、引言 201
二、SNP标记技术的原理 202
三、SNP标记技术的特点 203
四、SNP研究的内容和检测方法 204
五、SNP标记技术的应用 207
参考文献 213
第八章 DNA分子标记辅助选择育种技术 217
第一节 生物性状及其分子标记方法 217
一、生物性状及其类型 217
二、质量性状的分子标记方法 218
三、数量性状的分子标记方法 219
第二节 遗传连锁图谱的构建与MAS的选择 227
一、遗传连锁图谱的构建 227
二、MAS的选择方法及其原理 233
第三节 DNA分子标记辅助选择育种技术的特点 234
第四节 分子标记辅助选择育种技术的应用 236
一、抗病基因的MAS 236
二、抗虫基因 240
三、MAS与抗性基因累积 241
四、数量性状的MAS 241
参考文献 247
附录一 DNA分子标记数据的处理与分析软件 249
参考文献 262
附录二 核酸常用数据换算 264
附录三 常用试剂与缓冲液的配制 266