第一篇 细胞生物学技术在过敏反应学中的应用 3
第1章 过敏反应相关细胞的分离、纯化、培养、鉴定 3
第一节 细胞分离、纯化、培养、鉴定的基本原理 3
第二节 树突状细胞的分离、纯化、培养、鉴定 13
第三节 T、B淋巴细胞的分离、纯化、培养、鉴定 16
第四节 肥大细胞的分离、纯化、培养、鉴定 21
第五节 嗜碱性粒细胞的分离、纯化、培养、鉴定 27
第六节 嗜酸性粒细胞的分离、纯化、培养、鉴定 32
第七节 中性粒细胞的分离、纯化、培养、鉴定 37
第八节 单核/巨噬细胞的分离、纯化、培养、鉴定 42
第九节 上皮细胞的分离、纯化、培养、鉴定 46
第十节 内皮细胞的分离、培养、纯化、鉴定 52
第十一节 呼吸道平滑肌细胞的分离、纯化、培养、鉴定 57
第十二节 成纤维细胞的分离、纯化、培养、鉴定 63
第十三节 干细胞的培养 67
第十四节 细胞的冻存与复苏 69
第十五节 神经胶质细胞的分离、纯化、培养、鉴定 78
第十六节 血小板的分离、纯化、培养、鉴定 84
参考文献 87
第2章 过敏反应相关的细胞功能实验 94
第一节 肥大细胞激发实验 94
第二节 嗜碱性粒细胞激发实验 100
第三节 黏液分泌细胞刺激实验 102
第四节 T、B细胞激发实验 105
第五节 树突状细胞激发实验 121
第六节 内皮细胞激发实验 128
第七节 成纤维细胞激发实验 132
第八节 神经胶质细胞激发实验 134
第九节 细胞趋化性和细胞膜通透性实验 138
第十节 细胞增殖实验 144
第十一节 呼吸道平滑肌激发、收缩实验 148
第十二节 细胞凋亡实验 154
参考文献 160
第3章 细胞成分的标记和检测 165
第一节 常用组织和细胞取材及固定方法 165
第二节 组织切片的制备 177
第三节 组织化学染色 190
第四节 免疫组织化学染色 197
第五节 免疫组织化学双重或多重标记 203
第六节 酶-底物染色 209
第七节 原位杂交染色 220
第八节 免疫胶体金染色 229
第九节 激光共聚焦显微镜技术 234
第十节 流式细胞术 239
第十一节 细胞内钙离子水平测定 247
第十二节 鉴定细胞信号转导通路的常用技术 253
参考文献 260
第二篇 生物化学与分子生物学技术在过敏反应学中的应用第4章 过敏反应相关的蛋白质纯化技术 267
第一节 过敏原蛋白质组分的提取与制备 267
第二节 蛋白质电泳技术 276
第三节 点杂交和免疫印迹 282
第四节 蛋白质的分离与纯化 289
第五节 蛋白质浓度测定 306
第六节 蛋白酶活性测定 312
第七节 蛋白质一级结构的测定方法 316
第八节 蛋白质的分子质量测定 323
第九节 过敏原生物学功能鉴定 332
第十节 表面等离子体共振技术 336
参考文献 340
第5章 过敏反应相关的分子生物学技术 344
第一节 常规分子生物学技术 344
第二节 普通PCR及荧光定量PCR技术 355
第三节 重组蛋白表达与纯化 365
第四节 细胞转染 373
第五节 cDNA文库的建立 377
第六节 Northern blot和Southern blot 382
第七节 反义RNA技术 391
第八节 RNA干扰技术 393
第九节 表位确定 404
第十节 限制性片段多态性技术、单链型多态性技术、单核苷酸多态性技术 417
第十一节 点突变技术在低过敏原性疫苗中的应用 424
第十二节 MicroRNA技术 429
参考文献 433
第三篇 蛋白质组学与生物信息学在过敏反应学中的应用第6章 蛋白质组学技术及在过敏反应学中的应用 443
第一节 过敏原蛋白质组分的双向电泳分离技术 443
第二节 过敏原蛋白质的质谱分析和鉴定技术 467
第三节 过敏原蛋白质组学研究的策略与方法 488
参考文献 493
第7章 生物信息学在过敏原研究中的应用 497
第一节 生物信息学的主要研究内容 497
第二节 生物信息学在过敏反应学中的应用 500
参考文献 506
第四篇 抗体技术在过敏反应学中的应用 511
第8章 抗体制备 511
第一节 抗体制备的目的及基本原理 511
第二节 多克隆抗体制备 514
第三节 单克隆抗体制备 518
第四节 抗体的纯化与鉴定 525
参考文献 534
第9章 基因工程抗体 535
第一节 抗体工程 535
第二节 抗体的修饰和标记 541
参考文献 546
第五篇 过敏反应相关的动物实验模型 549
第10章 哮喘相关的动物实验模型 549
第一节 豚鼠支气管哮喘模型 549
第二节 小鼠支气管哮喘模型 551
第三节 大鼠支气管哮喘模型 555
第四节 狗哮喘模型 557
第五节 灵长类哮喘模型 558
第六节 猫哮喘模型 561
第七节 兔哮喘模型 564
第八节 绵羊哮喘模型 565
参考文献 566
第11章 过敏性鼻炎相关的动物实验模型 569
参考文献 575
第12章 其他动物实验模型 577
第一节 大鼠足跖肿胀模型 577
第二节 大白鼠皮肤毛细血管通透性模型 578
第三节 小白鼠腹腔炎症性细胞浸润模型 580
第四节 大白鼠皮肤炎症性细胞浸润模型 584
第五节 实验性过敏性脑脊髓炎模型 588
第六节 过敏性肠炎模型 592
参考文献 595
第六篇 临床相关的过敏反应学实验技术 601
第13章 体液或培养液中特异性成分的测定 601
第一节 组胺水平测定 601
第二节 酶联免疫吸附测定 604
第三节 酶联免疫斑点法 613
第四节 放射免疫分析法 615
第五节 ImmunoCAP系统 620
第六节 血清食物特异性IgG的检测 624
第七节 白三烯测定 626
第八节 过敏性皮炎模型 632
第九节 皮肤斑贴实验 634
参考文献 640
第14章 吸入性过敏原的收集与鉴定 644
第一节 吸入性过敏原的收集 644
第二节 吸入性过敏原的鉴定 652
参考文献 656
第15章 食入性过敏原的收集与鉴定 657
第一节 食入性过敏原的收集 657
第二节 食入性过敏原的鉴定 660
参考文献 661
中英文索引 663