目录 1
第1章 免疫分析 1
1.1 抗原 1
1.1.1 抗原的概念 1
1.1.2 抗原的分类 2
1.1.3 抗原的性质 4
1.1.4 抗原的特异性与交叉反应 5
1.1.5 抗原的制备方法 6
1.2 抗体 8
1.2.1 免疫球蛋白（Ig）的分子结构 8
1.2.2 Ig的血清型与多样性 9
1.2.3 Ig的生物学活性 11
1.2.4 各类免疫球蛋白的特性与功能 11
1.2.5 人工制备的抗体类型 14
1.2.6 抗体的制备方法 15
1.3 抗原-抗体结合反应 18
1.3.1 抗原-抗体结合反应的原理 18
1.3.2 抗原-抗体结合反应的特点 19
1.3.3 影响抗原-抗体结合反应的因素 19
1.4 免疫分析 20
1.4.1 免疫分析的类型 20
1.4.2 免疫分析的方法 21
1.4.3 根据免疫分析中是否引入标记物进行分类 22
1.5 非标记免疫分析 22
1.5.1 沉淀反应 22
1.5.2 免疫扩散 23
1.5.3 免疫电泳 24
1.5.4 免疫浊度 25
1.6 标记免疫分析 26
1.5.5 凝集反应 26
1.7.1 胶体金标记免疫分析 27
1.7 免疫分析新方法 27
1.7.2 脂质体放大免疫分析 29
1.7.3 流动注射免疫分析 34
1.7.4 免疫-PCR技术 37
1.7.5 毛细管电泳免疫分析 39
1.7.6 多组分免疫分析 43
1.7.7 控温相免疫分析 44
1.7.8 免疫微球分析法 45
参考文献 45
2.1.1 酶的基本概念 48
2.1.2 酶的发展历史 48
2.1 酶的基本概念与发展历史 48
第2章 免疫分析常用酶 48
2.1.3 酶在生命活动中的作用 49
2.2 酶催化作用的特点 50
2.2.1 酶催化作用的专一性 50
2.2.2 酶催化作用的高效性 52
2.2.3 酶催化作用条件的温和性 52
2.3 酶的分类与命名 53
2.3.1 蛋白类酶的分类与命名 53
2.3.2 核酸类酶的分类 54
2.4 酶催化反应动力学 55
2.5 影响酶催化反应的因素 58
2.5.1 温度 58
2.5.2 酸度 58
2.5.4 酶的活化 59
2.5.3 底物及酶的浓度 59
2.5.5 酶活性的抑制 60
2.6 酶活性的测定 61
2.6.1 酶的活性单位 61
2.6.2 酶的转换数与催化周期 61
2.6.3 酶活性的测定方法 62
2.6.4 酶活性测定的意义 63
2.7 免疫分析常用酶 64
2.7.1 过氧化物酶 65
2.7.2 酸性磷酸酶 66
2.7.3 碱性磷酸酶 67
2.7.4 β-D-半乳糖苷酶 69
2.7.5 葡萄糖氧化酶 70
2.7.6 脲酶 72
2.7.7 青霉素酶 73
2.7.8 过氧化氢酶 74
2.7.9 葡萄糖淀粉酶 75
2.7.10 碳酸酐酶 75
2.7.11 乙酰胆碱酶 76
2.7.12 葡萄糖6-磷酸脱氢酶 77
2.7.13 溶菌酶 78
2.7.14 苹果酸脱氢酶 79
2.7.15 无机焦磷酸酶 79
2.7.16 荧光素酶 80
2.7.17 丙酮酸激酶 81
参考文献 82
3.1 光度酶联免疫分析法（ELISA）的基本类型及原理 84
3.1.1 双抗体夹心法 84
第3章 光度酶联免疫分析 84
3.1.2 间接法 85
3.1.3 竞争法 85
3.1.4 异种动物双抗体夹心法 86
3.1.5 抗酶抗体法 86
3.1.6 竞争性抑制法 87
3.1.7 双夹心法 87
3.1.8 抗原直接包被法 88
3.2 ELISA法的发展 89
3.2.1 斑点ELISA法 89
3.2.2 单克隆抗体捕获ELISA法 89
3.2.3 聚合酶链式反应ELISA法 90
3.3 ELISA法实验技术的改进 91
3.3.2 双显色ELISA法 91
3.3.1 快速ELISA诊断试剂盒 91
3.2.6 C1q-ELISA法 91
3.2.5 A蛋白法 91
3.2.4 F（ab′）2-ELISA法 91
3.3.3 振荡态ELISA法 92
3.3.4 离心加速ELISA法 92
3.3.5 磁微粒ELISA法 92
3.3.6 其他快速ELISA法 93
3.3.7 ELISA和其他分析技术结合 94
3.4 ELISA放大系统 94
3.4.1 生物素-亲和素系统 94
3.4.2 碱性磷酸酶放大系统 95
3.4.3 凝血因子的级联放大系统 95
3.4.4 微粒放大 95
3.5 ELISA实验条件和技术要点 96
3.5.1 固相载体的选择和试剂的制备 96
3.4.5 催化沉积 96
3.5.2 反应条件的选择和方法的标准化 103
3.6 质量控制 108
3.6.1 酶免疫测定的干扰因素与对策 108
3.6.2 ELISA中阴性本底的形成原因和消除方法 111
3.6.3 确定ELISA试验阳性临界值 113
3.6.4 缩小ELISA检测误差 115
3.6.5 结果分析 116
3.7 ELISA的应用 119
3.7.1 ELISA在医学检测中的应用 119
3.7.2 ELISA在食品检测中的应用 120
3.7.3 ELISA在水产品检测中的应用 122
3.7.4 ELISA在植物病毒检测中的应用 125
3.7.5 ELISA在动物检疫检测中的应用 127
3.7.6 ELISA在农药残留检测中的应用 127
3.7.7 ELISA在兽药残留检测中的应用 129
3.7.8 ELISA在捕食作用研究中的应用 133
3.8 ELISA分析仪器 136
3.8.1 分离式酶联免疫仪器 137
3.8.2 组合式的酶联免疫仪器 139
3.8.3 Micro plate仪器发展的某些动态 140
参考文献 141
第4章 化学发光酶联免疫分析 142
4.1 化学发光免疫分析概述 142
4.1.1 标记化学发光物质的化学发光免疫分析 143
4.1.3 化学发光酶联免疫分析 144
4.1.4 电化学发光免疫分析 144
4.1.2 标记荧光物质的荧光化学发光免疫分析 144
4.2 化学发光剂 145
4.2.1 吖啶酯类化合物 146
4.2.2 氨基苯二酰肼类化合物 149
4.2.3 咪唑类化合物 151
4.2.4 苯酚类化合物 151
4.2.5 芳基草酸酯类化合物 151
4.3 化学发光酶联免疫分析 152
4.3.1 标记过氧化物酶的化学发光酶联免疫分析 153
4.3.2 标记葡萄糖氧化酶的化学发光酶联免疫分析 156
4.3.3 增强化学发光酶联免疫分析 158
4.4 化学发光酶联免疫分析的应用 160
4.4.1 化学发光酶捕获免疫测定大肠杆菌 160
4.4.2 偶合反应化学发光酶联免疫分析测定人血清甲胎蛋白 161
4.4.3 增强化学发光酶联免疫分析法测定人绒毛膜促性腺激素 162
4.4.4 增强化学发光酶联免疫分析法测定血清中的铁蛋白 164
4.5 生物发光酶联免疫分析 164
4.5.1 荧光素酶-FMN细菌生物发光体系 166
4.5.2 荧光素-荧光素酶生物发光体系 167
4.6 化学发光定量分析仪器概述 169
4.6.1 程控网络主要特点及应用方法 169
4.6.2 ACS-180化学发光分析系统 172
4.6.3 ACS-180化学发光免疫分析系统工作原理 172
参考文献 173
第5章 荧光酶联免疫分析 175
5.1 荧光免疫分析 175
5.1.1 荧光免疫分析的原理 175
5.1.2 几种常见的荧光标记物 177
5.1.3 荧光免疫分析技术 179
5.2.1 荧光酶联免疫分析的原理 187
5.2 荧光酶联免疫分析 187
5.2.2 荧光酶联免疫分析对荧光底物的要求 188
5.2.3 荧光酶联免疫分析的仪器 188
5.2.4 荧光酶联免疫分析与普通酶免疫分析的比较 189
5.3 荧光酶联免疫分析的应用 190
5.3.1 荧光酶联免疫分析测定血清中的肝癌细胞 190
5.3.2 微粒子荧光酶联免疫分析法定量检测乙型肝炎E抗原 191
5.3.3 氯化血红素作为模拟酶荧光免疫分析测定乙型肝炎表面抗原 192
5.3.4 应用全自动荧光酶联免疫分析系统同时检测艾滋病毒抗体和p24抗原 193
5.3.5 荧光酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎表面抗原及抗体 195
参考文献 197
第6章 电化学酶联免疫分析 200
6.1 电化学免疫分析 200
6.1.1 异相电化学免疫分析法 201
6.1.2 均相电化学免疫分析法 202
6.1.3 电化学酶联免疫分析 203
6.2 伏安酶联免疫分析法 204
6.2.1 伏安法测定基本原理 204
6.2.2 以HRP为标记酶的伏安酶联免疫分析法 209
6.2.3 以AP为标记酶的伏安酶联免疫分析法 226
6.2.4 其他酶标记的伏安酶联免疫分析法 229
6.2.5 伏安酶联免疫分析法在植物病毒血清学检测中的应用 230
6.2.6 伏安酶联免疫分析法在其他方面的应用 233
6.3 安培酶联免疫分析法 235
6.3.1 安培法测定基本原理 235
6.3.2 安培酶联免疫分析常用的酶-底物体系 236
6.3.3 高效液相色谱安培酶联免疫分析 236
6.3.4 流动注射安培酶联免疫分析 237
6.3.6 安培酶联免疫分析法的应用 238
6.3.5 毛细管电泳安培酶联免疫分析 238
6.4 电化学酶联免疫分析和其他技术的联用 241
6.4.1 毛细管电化学酶联免疫分析 241
6.4.2 磁微粒电化学酶联免疫分析 242
参考文献 242
第7章 酶免疫传感器 245
7.1 生物传感器的原理与分类 245
7.1.1 生物活性物质的分子识别功能 246
7.1.2 生物活性物质的固定化技术 248
7.1.3 信号转换器的基本类型 256
7.2 酶免疫传感器的基本原理 256
7.2.1 酶传感器 256
7.2.2 免疫传感器 256
7.3.1 电化学信号转换器的基本原理 259
7.3 电化学酶免疫传感器 259
7.2.3 酶免疫传感器 259
7.3.2 电化学酶传感器 261
7.3.3 电化学免疫传感器 263
7.3.4 电化学酶免疫传感器 265
7.4 光导纤维型酶免疫传感器 270
7.4.1 光导纤维型信号转换器的基本原理 270
7.4.2 光导纤维型酶传感器 271
7.4.3 光导纤维型免疫传感器 272
7.4.4 光学酶免疫传感器 273
7.5 压电晶体型酶免疫传感器 274
7.5.1 压电晶体型信号转换器的基本原理 274
7.5.2 压电晶体型酶传感器 275
7.5.3 压电晶体型免疫传感器 275
7.5.4 压电晶体型酶免疫传感器 278
参考文献 279