绪论 1
目录 1
上篇 生物化学和临床生物化学检验基本理论 7
第一章 实验室基本知识 7
第一节 常用玻璃器皿 7
第二节 化学试剂 10
第三节 生化样品的制备 16
第四节 实验记录与实验报告 19
第五节 实验用纯水的制备 21
第六节 实验室安全及防护知识 23
第七节 实验误差与数据处理 25
第二章 光谱分析技术 32
第一节 概论 37
第三章 电泳技术 37
第二节 醋酸纤维薄膜电泳 41
第三节 琼脂糖凝胶电泳 41
第四节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 43
第五节 等电聚焦电泳 45
第四章 层析技术 47
第五章 分子生物学技术 53
第一节 核酸的分离与纯化技术 53
第二节 DNA分析技术 55
第三节 诊断分子生物学技术的临床应用 64
下篇 生物化学和临床生物化学检验实验 71
第六章 血清(浆)蛋白质测定 71
实验一 血清总蛋白测定双缩脲法 73
实验二 血清总蛋白测定凯氏定氮法 76
实验三 血清总蛋白测定凯氏定氮比色法 80
实验四 血清总蛋白测定紫外分光光度法 82
实验五 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳 84
实验六 血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳(圆盘电泳) 89
实验七 SDS-PAGE测定蛋白质分子量(垂直板电泳) 93
实验八 蛋白质的两性解离和等电点测定 98
实验九 血清γ-球蛋白的分离与纯化 101
实验十 蛋白质的水解 103
实验十一 蛋白质的盐析与透析 106
实验十二 血清白蛋白测定溴甲酚绿法 107
实验十三 血清白蛋白测定溴甲酚紫法 110
第七章 血清葡萄糖测定 113
实验一 血清葡萄糖测定邻甲苯胺法 116
实验二 血清葡萄糖测定葡萄糖氧化酶法 119
实验三 血清葡萄糖测定己糖激酶法 122
第八章 血清脂类及脂蛋白测定 126
实验一 血清总胆固醇测定胆固醇氧化酶法 126
实验二 血清甘油三酯测定乙酰丙酮显色法 129
实验三 血清甘油三酯测定磷酸甘油氧化酶法 131
实验四 血清脂蛋白电泳琼脂糖凝胶电泳法 134
实验五 血清高密度脂蛋白-胆固醇测定磷钨酸-镁沉淀法 137
实验六 血清高密度脂蛋白-胆固醇测定过氧化物酶清除法 139
实验七 血清低密度脂蛋白-胆固醇测定聚乙烯硫酸盐沉淀法 141
实验八 血清低密度脂蛋白-胆固醇测定表面活性剂清除法 143
实验九 血清载脂蛋白AⅠ和载脂蛋白B测定免疫透射比浊法 144
实验十 血清脂蛋白(a)测定免疫透射比浊法 147
实验一 小麦胚芽中酸性磷酸酶分离纯化与活性测定 150
第九章 血清酶类测定 150
实验二 过氧化氢酶米氏常数的测定 155
实验三 影响酶活性的因素 159
实验四 血清乳酸脱氢酶总活性的测定比色法 161
实验五 血清乳酸脱氢酶同工酶琼脂糖凝胶电泳 163
实验六 血清丙氨酸氨基转移酶测定赖氏法 167
实验七 血清肌酸激酶测定肌酸显色法 171
实验八 血清γ-谷氨酰基转移酶测定连续监测法 174
实验九 自动化分析仪实际K值测定 176
第十章 血清电解质测定 180
实验一 血清钠、钾测定火焰光度法 182
实验二 血清钠、钾测定离子选择电极法 186
实验三 血清氯测定硫氰酸汞比色法 189
实验四 血清总钙测定甲基麝香草酚蓝比色法 191
实验五 血清钙测定邻-甲酚酞络合酮比色法 193
实验六 血清磷测定还原钼蓝法 196
实验七 血清镁测定甲基麝香草酚蓝比色法 198
第十一章 血清微量元素测定 201
实验一 血清铜测定双环己酮草酰二腙比色法 202
实验二 血清锌测定吡啶偶氮酚比色法 205
实验三 血清铁和总铁结合力测定亚铁嗪比色法 207
第十二章 肝功能试验 211
实验一 血清总胆红素和结合胆红素测定改良J-G法 211
实验二 血清总胆红素和结合胆红素测定胆红素氧化酶法 215
实验三 血清总胆汁酸测定酶比色法 218
第十三章 肾功能试验 222
实验一 血清尿素测定二乙酰一肟法 223
实验二 血清尿素测定脲酶-波氏比色法 225
实验三 血清尿素测定酶偶联速率法 227
实验四 血清肌酐测定除蛋白碱性苦味酸法 229
实验五 血清尿酸测定磷钨酸还原法 231
第十四章 层析检测技术 235
实验一 凝胶层析法分离血清蛋白质 236
实验二 DEAE-纤维素离子交换层析法分离血清蛋白质 237
实验三 胡萝卜素柱层析 239
第十五章 分子生物学检测技术 242
实验一 盐析法提取动物组织基因组DNA及其含量测定 242
实验二 异硫氰酸胍-酚/氯仿一步法提取动物组织总RNA及含量测定 245
实验三 碱裂解法从大肠杆菌中制备质粒DNA 248
实验四 PCR扩增目的DNA 251
实验五 TA克隆技术 254
第十六章 方法学评价实验 257
实验一 线性范围试验 258
实验二 重复性试验 261
实验三 回收试验 264
实验四 方法比较试验 266
附录一 常用生化参考值 270
附录二 缓冲溶液的配制 286
附录三 常见蛋白质相对分子质量参考值 300
附录四 常见蛋白质等电点参考值 302
附录五 常用单位换算法 304
附录六 元素的原子量表 306
附录七 酸碱指示剂 308
附录八 常用生化检验英文缩写术语 310
索引 314
参考文献 318