目录 1
第一章 生物制药技术实验仪器的洗涤与处理 1
第一部分 必备知识 1
第二部分 技术常识 1
第三部分 实践训练 3
第四部分 知识与能力测试 4
第二章 生物制药工艺用水制备技术 5
第一部分 必备知识 5
第二部分 生物制药工艺用水制备技术 6
第一节 生物制药工艺用水制备技术 6
实验2-1 纯化水的制备 8
第二节 生物制药用水制备设备简介 11
第三节 纯化水和注射用水的质量要求和检验 14
实验2-2 注射用水的制备（演示实验） 16
第三部分 实践训练 16
第四部分 知识与能力测试 16
第三章 基因工程制药技术 17
第一部分 必备知识 17
第一节 工具酶 17
第二节 载体 20
第三节 电泳 23
第四节 聚合酶链反应 26
第五节 基因工程药物生产的基本过程 28
第二部分 主要操作技术 31
第六节 质粒DNA的提取、酶切及DNA重组 31
实验3-1 质粒DNA的分离、纯化 32
实验3-2 DNA酶切及凝胶电泳 34
实验3-3 质粒DNA与目的DNA的连接 36
第七节 感受态细胞的制备及转化 37
实验3-4 大肠杆菌感受态细胞的制备、转化和重组质粒的筛选 38
第八节 RNA的提取及目的基因的扩增 40
实验3-5 RNA的提取 41
实验3-6 聚合酶链反应（PCR）扩增 42
第九节 外源基因在大肠杆菌中的表达 43
实验3-7 外源基因在大肠杆菌中的表达 43
第三部分 实践训练 44
第四部分 知识与能力测试 45
第四章 植物细胞培养技术 46
第一部分 必备知识 46
第一节 植物细胞培养特性及条件 46
第二部分 操作技术 48
第二节 培养基的制备技术 48
实验4-1 配制植物组织培养基 48
实验4-2 植物的试管快速繁殖技术 49
第三节 植物组织培养技术 49
第四节 植物细胞培养方法 50
实验4-3 植物细胞的悬浮培养 51
实验4-4 植物细胞同步培养 53
实验4-5 人工种子的制备 53
实验4-6 人工种子的保存和发芽 54
第五节 植物组织培养过程的检测 55
实验4-7 植物细胞培养和次生代谢产物生产 56
第六节 植物细胞大规模培养技术的应用 58
实验4-8 三七细胞大规模培养 58
实验4-9 胡萝卜组织培养 59
第三部分 实践训练 59
第四部分 知识与能力测试 64
第五章 哺乳动物组织细胞培养技术 65
第一部分 必备知识 65
第一节 动物细胞组织培养的特征及培养条件 65
第二部分 操作技术 68
第二节 无菌操作的基本要领和要求 68
第三节 培养动物组织、细胞培养液的配制 69
第四节 动物细胞培养技术 71
实验5-1 组织块培养技术 74
实验5-2 原代细胞培养——贴壁培养 75
实验5-3 传代培养 78
第五节 细胞污染的检测与排除 79
实验5-4 微生物污染的检测 82
第六节 培养物的长期保存技术 83
实验5-5 培养细胞的冻存与复苏 84
第七节 动物细胞大规模培养方法简介 85
第三部分 实践训练 88
实验5-6 动物细胞的培养、冻存与复苏 88
第四部分 知识与能力测试 94
第六章 发酵工程制药技术 95
第一部分 必备知识 95
第一节 发酵工程简史 96
第二节 微生物菌种的处理原则 97
第二部分 操作技术 98
第三节 发酵过程中培养基的制备与灭菌技术 98
实验6-1 培养基的配制与灭菌技术 100
第四节 微生物菌种的保藏、退化、复壮与改良技术 102
实验6-2 微生物菌种保藏技术 105
实验6-3 菌种的复苏与复壮技术 109
第五节 微生物发酵过程控制技术 110
实验6-4 谷氨酸的制备 117
实验6-5 乳酸发酵与乳酸菌饮料制备 119
实验6-6 发酵法制备维生素B2（核黄素） 120
第六节 基因工程菌的发酵控制 121
第七节 发酵工程下游加工过程 124
实验6-7 固液分离技术 126
第三部分 实践训练 127
实验6-8 酒精发酵及糯米甜酒的酿制 127
实验6-9 青霉素的生产工艺 128
第四部分 知识与能力测试 129
附录 常用培养基及其配制 129
第七章 生物药物成分的提取纯化技术 131
第一部分 必备知识 131
第二部分 操作技术 132
第一节 细胞破碎技术 132
实验7-1 超声波破碎法处理微生物菌体 133
第二节 沉淀分离技术 134
实验7-2 盐析沉淀法纯化血浆中的免疫球蛋白 134
实验7-3 透析法脱盐 135
实验7-4 等电点沉淀法纯化牛乳中的酪蛋白 136
第三节 萃取分离技术 137
实验7-5 用溶剂萃取法提取与精制红霉素 138
实验7-6 牛血清白蛋白在双水相萃取系统中的分配 138
第四节 过滤与超滤技术 140
实验7-7 超滤分离实验 142
第五节 泡沫分离技术 143
实验7-8 喷雾干燥技术制备奶粉 144
第六节 干燥技术 144
第七节 色谱分离技术 146
实验7-9 离子交换色谱分离混合氨基酸 150
第三部分 实践训练 152
实验7-10 血清γ-球蛋白的分离纯化与鉴定 153
实验7-11 植物叶片细胞膜ATPase分离纯化 154
第四部分 知识与能力测试 155
第八章酶工程制药技术 156
第一部分必备知识 156
第一节 酶工程的基本概念 156
第二节 酶的分离纯化技术 160
第二部分操作技术 160
实验8-1 蛋白质总浓度的测定 163
实验8-2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）测定蛋白质相对分子质量 166
第三节 酶活力与酶制剂的保存 168
实验8-3 α-淀粉酶的活力测定 169
实验8-4 猪血SOD的提取 170
第四节 酶工程的基本手段 171
实验8-5 对氨基苯磺酰己基（ABSE）纤维素固定化胰蛋白酶 174
实验8-6 PAGE包埋法制备固定化大肠杆菌（E．coli）生成L-天冬氨酸 176
第五节 常见的酶类药物及酶工程制药的发展趋势 177
第三部分 实践训练 178
实验8-7 谷丙转氨酶活力的测定 178
实验8-8 菠萝蛋白酶的提取 179
实验8-9 卡拉胶固定大肠杆菌（E．coli）L-天冬氨酸的生产工艺 180
第四部分 知识与能力测试 182
附录8-1 几种常用的不同pH值缓冲液的配制表 182
附录8-2 离心力的转换列线图 183
第九章 血液制品制备技术 184
第一部分 必备知识 184
第二部分 血浆蛋白制剂生产技术 187
第三部分 实践训练 193
参观：1．用低温乙醇法分离和纯化血浆蛋白 193
2．冻干设备的应用 193
第四部分 知识与能力测试 194
第一部分 必备知识 195
第十章 细胞因子制备技术 195
第二部分 操作技术 201
实验10-1 制备白细胞介素-2（IL-2） 202
实验10-2 红细胞生成素（EPO）的制备 203
实验10-3 人尿集落刺激因子（CSF）的制备 204
实验10-4 基因工程α-干扰素的制备 205
第三部分 实践训练 206
实验10-5 从基因工程菌中提取IFN-β 206
实验10-6 天然干扰素IFN-α的制备 207
第四部分 知识与能力测试 208
第一部分 必备知识 209
第十一章 疫苗制备技术 209
第二部分 疫苗的制备 211
第三部分 实践训练 218
实验11-1 乙型脑炎减毒活疫苗的制备 218
实验11-2 伤寒Vi多糖疫苗的制备 221
第四部分 知识与能力测试 224
第十二章 杂交瘤细胞技术和单克隆抗体技术 225
第一部分 必备知识 225
第一节 单克隆抗体的基本概念和技术原理 225
第二部分 单克隆抗体制备技术 226
第二节 抗原提纯与动物免疫 226
实验12-2 抗体效价测定 227
实验12-1 抗原免疫 227
第三节 单克隆抗体细胞的选择 228
实验12-3 单克隆抗体细胞的制备 229
第四节 细胞融合及杂交瘤细胞的选择、筛选 230
实验12-4 细胞融合及杂交瘤细胞的选择、筛选和克隆化培养 230
第五节 单克隆抗体的制备及纯化 231
实验12-5 单克隆抗体的制备及纯化 232
第三部分 实践训练 233
第四部分 知识与能力测试 234
参考文献 235