《基因融合技术》PDF下载

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  • 作  者:马延高,陈蔚梅译
  • 出 版 社:武汉:武汉大学出版社
  • 出版年份:1990
  • ISBN:7307007495
  • 页数:324 页
图书介绍:

菌株 1

细菌噬菌体 4

导论 11

实验 16

实验1 以遗传学转座法分离lacZ融合体 16

实验2 在质粒上以体外突变或非同源重组法建造LacZ+蛋白质融合体 27

实验3 在高拷贝数质粒上克隆lacZ融合体 38

实验4 利用基因融合和DNA杂交技术分析染色体的结构 44

实验5 用重组DNA技术构建λ转导噬菌体 50

实验6 用DNA杂交技术鉴定λ转导噬菌体 54

实验7 用遗传学互补法鉴定λ转导噬菌体 58

实验8 Tn10在基因中或其附近的插入突变体的分离 64

实验9 染色体的有目的诱变 71

实验10 染色体缺失突变体的分离 75

实验11 在λ转导噬菌体上分离缺失突变体 83

实验12 λ转导噬菌体的有目的突变 87

实验13 构建遗传图谱 92

实验14 用基因融合法在体外分离特殊的转导噬菌体以确定基因的方向 96

方法 101

方法1 2-ml高滴度λ裂解液的制备 101

方法2 噬菌体平板贮液的制备 102

方法3 1-liter裂解液的制备 104

方法4 由平板贮液或小量裂解液中纯化噬菌体的快速方法 105

方法5 λInt和xis功能的红色空斑试验 107

方法6 λ溶源菌的筛选 108

方法7 用紫外光诱导λ溶源菌 111

方法8 用Xgal计数LacZ+噬菌体空斑 112

方法9 原噬菌体缺失突变体中噬菌体基因的检测 113

方法10 P1 vir裂解液的制备 115

方法11 P1 Tn9clr100裂解液的制备 116

方法12 用P1 vir作遗传学转导 117

方法13 MudI(lac,Ap)裂解液的制备 118

方法14 MudI(lac,Ap)的转导作用 119

方法15 MudI(lac,Ap)溶源菌转变为λ溶源菌 120

方法16 λcI+融合菌向λcI+ts857溶源菌的转变 121

方法17 Tn10由λNK561转移到E·coli染色体和一种随机Tn10库的制备 123

方法18 染色体缺失突变体的分离和随后的λ诱导 124

方法19 用EDTA平板选择λ缺失突变体 125

方法20 λ中含有一个Dam等位基因缺失突变体的分离 129

方法21 亚硝基胍突变 131

方法22 用紫外光突变λ 132

方法23 噬菌体的羟胺诱变 134

方法24 λ的mutD突变 135

方法25 从细菌细胞中抽提DNA 137

方法26 λ DNA的大量分离 140

方法27 λ DNA的快速分离 142

方法28 质粒DNA的大量分离 143

方法29 质粒DNA的快速分离法 146

方法30 构建λ杂种 151

方法31 构建杂种质粒 153

方法32 λ文库的转导 154

方法33 根据CsCl密度筛选杂种噬菌体 158

方法34 制备细菌DNA的Sau 3A部分降解物 160

方法35 利用辅助噬菌体构建λD69杂种的溶源性细菌 164

方法36 与λDamsrIλ3共同构建选择的λ杂种噬菌体 165

方法37 氯化钙处理过的细胞的转化 167

方法38 氯化钙处理过的细胞的转染 168

方法39 λDNA的体外包装 170

方法40 酚/氯仿抽提DNA样品 174

方法41 乙醇沉淀DNA 176

方法42 DNA制备的滴透析法 178

方法43 DNA的限制性内切酶酶切及凝胶电泳 179

方法44 DNA吸印转移 182

方法45 DNA-DNA杂交的琼脂糖凝胶的脱水法 185

方法46 DNA-DNA杂交 187

方法47 噬菌斑杂交 191

方法48 DNA的缺口转移 194

方法49 用BND-纤维素纯化DNA 195

方法50 微型胶过滤柱的准备 197

方法51 核酸酶BAL-31酶切 198

方法52 SDS蛋白质抽提物的制备 201

方法53 蛋白质的电泳 202

方法54 特大细胞:质粒基因的表达 206

附录 208

附录A 培养基和标准溶液 208

附录B Escherichia coli的表现型和基因型 213

附录C 可转移的遗传元件 216

附录D Escherichia coli的生长和贮存注意事项 222

附录E λ生长和贮存注意事项 224

附录F λ的表现型和基因型 227

附录G 噬菌体裂解液的滴定 231

附录H 自发诱导和从λ溶源性细菌中释放噬菌体 233

附录I 克隆载体 236

附录J 利用重组从一个复制子到另一个复制子的移动突变 245

附录K 基因融合的遗传学鉴定 251

附录L λplacMu I的应用 253

附录M 乳糖操纵子 258

附录N Omp调节子 280

附录O 麦芽糖调节子 283

附录P 阿拉伯糖调节子 285

文献 288

英汉名词对照和索引 309