第一章 导言 1
一、生物技术主要概念及技术简介 1
二、生物技术实验室安全性、药品试剂配制及实验报告要求 3
三、生物技术常用实验仪器及其使用方法 7
参考文献 16
第二章 植物细胞工程实验技术 17
实验一 培养基的配制、消毒与接种 17
实验二 植物愈伤组织诱导及分化培养 24
实验三 花药培养 28
实验四 细胞悬浮培养 31
实验五 原生质体的游离、培养与融合 34
实验六 植物细胞的生长计量技术 39
实验七 植物快速无性繁殖 42
实验八 细胞大规模培养及人工种子制备 46
实验九 农杆菌介导的植物遗传转化 50
参考文献 53
第三章 微生物工程实验技术 54
实验一 培养基的配制及灭菌 54
实验二 菌种的分离纯化 60
实验三 微生物形态的观察和革兰染色法 62
实验四 稀释平板计数法和细菌生长曲线的测定 64
实验五 发酵罐的构造与实罐灭菌 67
实验六 谷氨酸发酵工程系列实验 71
Ⅰ谷氨酸菌种的制备 72
Ⅱ谷氨酸的中糖发酵及控制 74
Ⅲ谷氨酸发酵过程还原糖含量的测定 75
Ⅳ谷氨酸含量的测定与等电回收 77
实验七 啤酒发酵工程系列实验 78
Ⅰ协定法糖化试验 79
Ⅱ啤酒酵母纯种分离 80
Ⅲ啤酒酵母的计数 81
Ⅳ啤酒酵母的质量检查 83
Ⅴ啤酒酵母的扩大培养 85
Ⅵ麦芽汁的制备 85
Ⅶ糖度的测定 87
Ⅷ啤酒主发酵 88
Ⅸ酸度和pH值的测定 89
Ⅹ酒精度的测定及原麦芽汁浓度的计算 90
Ⅺ色度的测定 93
Ⅻ苦味质的测定 94
ⅩⅢ啤酒质量品评 95
参考文献 98
第四章 蛋白质、核酸的提取与分离 99
实验一 酪蛋白的分离提取 99
实验二 溶菌酶的提纯与结晶 101
实验三 植物基因组DNA提取 103
实验四 质粒DNA的分离提取 104
实验五 植物RNA提取 106
参考文献 108
第五章 色谱及电泳技术 110
实验一 薄层层析法进行转氨酶活性鉴定 110
实验二 气相色谱内标法测定丁醇的含量 112
实验三 高效液相色谱法（HPLC）分析多维片或饮料中Vc和VB的含量 114
实验四 DNA琼脂糖凝胶电泳 116
实验五 SDS-PAGE测定蛋白质的相对分子量 118
实验六 非同位素银染DNA测序技术 122
实验七 纤维素薄膜电泳分离血清蛋白及永久胶片制作 129
参考文献 133
第六章 聚合酶链式反应（PCR） 135
实验一 常规PCR法扩增目的潮酶素基因片段 135
实验二 PCR法制备潮酶素基因探针 138
实验三 逆转录PCR（RT-PCR） 139
实验四 随机引物PCR 141
参考文献 143
第七章 分子杂交技术 144
实验一 核酸分子杂交技术 144
实验二 Western杂交 147
参考文献 149
第八章 基因重组及基因文库构建 150
实验一 DNA酶切、片段回收与重组连接 150
实验二 重组体DNA遗传转化与克隆筛选 153
实验三 真核生物基因组文库的构建 155
实验四 cDNA文库的构建 158
参考文献 165
附录 167
附录一 常用激素的溶解 167
附录二 常用消毒剂的使用和效果 167
附录三 植物组织培养常用的培养基配方 168
附录四 Kao和Michayluk的KM8P培养基 169
附录五 细胞筛孔径（μm）与目换算表 169
附录六 GUS染色方法 169
附录七 主要溶液（母液）及缓冲液配制 170
附录八 常见市售酸碱的浓度 172
附录九 基因组文库载体的种类和特征 172
附录十 生命科学常用实验仪器名称中英文对照表 173
附录十一 几种主要的限制性核酸内切酶及其作用位点 174
附录十二 几种主要的质粒载体的酶切位点及其选择标记 175
附录十三 实验报告参考式样 178
附录十四 有关警告标志 181