第四篇 符合GLP原则的遗传毒理学试验 1
第二十七章 遗传毒理学试验概述 1
第一节 遗传毒理学评价 1
第二节 遗传毒理学试验原则 6
第三节 OECD GLP原则在体外实验中的应用简介 8
第四节 遗传毒理学试验的生物安全及防护问题 12
第二十八章 体外遗传毒性试验通用标准操作程序 14
第一节 体外致突变试验的操作与安全性规程 14
第二节 体外毒理学试验供试品处理、称重和处置 16
第三节 体外毒理学试验放射性供试品的储存、操作和管理 18
第四节 微生物材料的贮存、操作和处理 18
第五节 组织培养材料的贮存、操作和处理 19
第六节 生物安全柜的使用 21
第七节 高压灭菌器及灭菌锅的使用 22
第八节 菌落计数仪的校正和使用 23
第九节 体外毒理学试验结果的记录及归档 23
第十节 培养基和玻璃器皿的灭菌 24
第十一节 肝匀浆和S9混合物的制备 25
第十二节 肝S9制剂质量控制试验 29
第十三节 组织培养细胞的培养液的制备、质量控制和贮存 34
第二十九章 Ames试验相关的标准操作程序 38
第一节 Ames标准试验程序 38
第二节 试验菌株的维护和保存 48
第三节 Ames试验指示菌株的特性鉴定程序 51
第四节 Ames试验质量控制 54
第五节 Ames试验菌落计数及其评价 55
第六节 Ames试验试剂的配制及储存 62
第七节 Ames试验方案、报告、QAU审查 80
第三十章 使用大肠杆菌作为指示菌的致突变试验 92
第一节 简介 92
第二节 大肠杆菌TRP+回复突变试验 92
第三节 大肠杆菌DNA修复试验 96
第四节 大肠杆菌TRP+回复试验培养液制备、质量控制和贮藏 98
第五节 大肠杆菌DNA修复试验培养液的制备、质量控制和贮存 100
第三十一章 酵母菌基因突变试验 103
第一节 酵母菌D5重组试验及结果分析 103
第二节 酵母菌D5的质量控制、维持和贮存 105
第三节 酵母菌D5的有丝分裂重组试验 106
第四节 酵母菌D5重组试验中培养液的制备、质量控制和贮藏 107
第三十二章 符合GLP原则的微核试验技术 110
第一节 啮齿类动物体内骨髓细胞微核试验程序 110
第二节 体外细胞微核试验 111
第三节 微核试验的标准操作规程 116
第四节 微核试验的试验方案、报告及审核 117
第三十三章 符合GLP原则的染色体畸变试验 127
第一节 体内染色体畸变实验方法学 127
第二节 体外染色体畸变试验程序 130
第三节 体内外染色体畸变试验常用程序 140
第四节 体外细胞遗传学代谢活化系统的应用 160
第五节 染色体畸变试验方案和报告的起草及审查 164
第三十四章 DNA的损伤与修复检测——彗星试验及UDS试验 176
第一节 DNA损伤的检验——彗星试验程序 176
第二节 应用程序外DNA合成（UDS）试验检测大鼠肝细胞DNA修复 178
第三节 人细胞DNA修复试验 182
第四节 用［3H］—脱氧尿苷分析DNA修复试验 184
第五节 放射自显影DNA修复实验 185
第六节 与UDS相关SOP 186
第七节 UDS实验试剂配制 207
第三十五章 哺乳动物细胞基因突变试验标准操作程序 223
第一节 哺乳动物细胞致突变试验概述 223
第二节 L5178Y小鼠淋巴瘤TK基因正向突变试验 225
第三节 L5178Y／TK+／-小鼠淋巴瘤试验方案的起草 253
第四节 V79和V79衍生HPRT-／GPT+G12细胞致突变试验 256
第五节 CHO HGPRT正向突变试验方案 259
第三十六章 细胞转化试验方法学 265
第一节 叙利亚地鼠胚胎细胞体外恶性转化试验 265
第二节 BHK（幼年地鼠肾细胞）细胞转化试验 268
第三节 实验瓶皿的气体调节和维持 269
第四节 琼脂糖中克隆生长情况的计算 270
第五节 细胞转化数据的评价 271
第六节 细胞转化试验标准操作规程实例 272
第七节 细胞转化试验试剂配制 284
第五篇 在GLP条件下的生殖毒理学试验 291
第三十七章 生殖毒理学试验概述 291
第一节 生殖毒理学试验方法学进展 291
第二节 GLP要求 293
第三节 ICH推荐的研究方案——联合研究 293
第四节 方法学问题 296
第三十八章 符合GLP法规的生殖毒理学方法 303
第一节 啮齿类产前发育毒性体内评估 303
第二节 体外致畸试验——中面部组织和继发腭的器官培养 316
第三节 雄性生殖毒理学体内模型 323
第四节 啮齿类交配指导原则 330
第五节 雄性生殖系统组织病理学技术 335
第六节 睾丸精子头计数程序 344
第七节 体外致畸研究中大鼠胚胎的培养 348
第八节 致畸试验操作程序——大鼠 355
第九节 致畸试验操作程序——兔子 358
第十节 剔除胎鼠和胎兔内脏进行骨骼检查程序 361
第十一节 对胎兔和胎鼠进行茜素染色 362
第十二节 胎兔和胎鼠的骨骼检查程序 364
第十三节 Bouin’s液固定胎鼠的观察程序 365
第十四节 Bouin’s液固定胎兔的观察程序 366
第十五节 大（小）鼠显性致死试验程序 367
第十六节 大小鼠一代繁殖试验程序 368
第十七节 啮齿类胎儿的形态学和行为学观察程序 370
第十八节 阴道涂片以判定是否交配成功程序 372
第十九节 繁殖试验：生产和泌乳 373
第二十节 胎儿性别辨别与称重（啮齿类）程序 374
第二十一节 胎儿的断奶、随机分组、编号及处理（啮齿类）程序 375
第二十二节 阴道涂片确定动情周期——大鼠 375
第三十九章 生殖毒理学试验质量控制与审查 377
第一节 简介 377
第二节 发育和生殖毒性试验的质量保证 377
第三节 质量关注和质量控制措施 382
第四节 结论 385
第五节 生殖和发育毒理学研究的审查——实例 386
第四十章 生殖发育毒理学术语 395
第六篇 体外细胞毒理学 406
第四十一章 体外毒理学在药物安全性评价中的应用简介 406
第一节 概述 406
第二节 体外试验的证实程序 407
第三节 体外试验加入管理要求中的程序 408
第四节 体外试验被考虑接受的领域 408
第五节 对于医学产品临床前开发的一般指导 409
第六节 欧洲替代方法证实中心 409
第七节 体外毒理学实验的优缺点比较 409
第八节 人体肝组织培养材料在代谢、毒理学研究中的应用 410
第九节 研究肾脏毒性体外模型的进展 412
第十节 心血管细胞培养技术在药理、毒理学中的应用 415
第十一节 肝细胞制备实例—实验动物原位灌流分离完整肝细胞 418
第十二节 肝细胞制备——切除肝脏的灌流 420
第十三节 肝细胞冻存 421
第十四节 肝细胞培养在药物安全性评价中的应用 422
第四十二章 哺乳动物细胞组织培养技术 424
第一节 概述 424
第二节 无菌技术 424
第三节 单层细胞的胰酶消化和传代程序 427
第四节 悬浮培养基中细胞的传代程序 428
第五节 在单层培养基中生长的人体细胞的冻存程序 429
第六节 悬浮培养基中生长细胞的冻存程序 430
第七节 冻存细胞的解冻和复苏程序 430
第八节 细胞计数及存活率测定程序 431
第九节 支持试验程序 432
第十节 评论 434
第四十三章 检测细胞毒性的体外方法 436
第一节 细胞毒性试验总则 436
第二节 细胞存活率测定标准操作程序 437
第三节 检测细胞毒性的试剂和溶液 447
第四节 评论 448
第五节 细胞毒性试验SOP实例 455
第六节 细胞毒性试验基本操作规程 457
第七篇 毒理统计学 467
第四十四章 统计学在毒理学安全性评价中的应用 467
第一节 前言 467
第二节 选择统计学方法的原则 468
第三节 假设检验：单因素参数检验 471
第四节 分类和分级资料的假设检验 484
第五节 在毒理学中数据分析的应用 492
第六节 综合评价实验结果的统计学意义和生物学意义 495
第四十五章 毒理学安全性评价中毒理统计学问题 497
第一节 毒理统计学中的常见文体及术语 497
第二节 常用统计学问题 502
第四十六章 发育生殖毒理学试验与致癌试验的统计分析问题 530
第一节 发育生殖毒理学试验与致癌试验的统计分析问题 530
第二节 啮齿类动物致癌试验统计学分析 540
第八篇 符合GLP原则的供试品管理 544
第四十七章 在GLP原则下供试品与对照品的管理 544
第一节 供试品管理的概述 544
第二节 供试品管理标准操作程序模版 549
第九篇 符合GLP原则的仪器设备管理 563
第四十八章 符合GLP原则的仪器设备管理总论 563
第一节 仪器设备管理的GLP要求 563
第二节 仪器设备管理校准与维护的SOP的起草指导 567
第三节 仪器校准与维护的SOP 569
第四节 仪器校准与维护的SOP-SOP开发的流程图 572
第五节 仪器校准与维护的SOP-SOP撰写的细节部署 575
第四十九章 计算机的安全与管理 578
第一节 计算机安全1——逻辑安全 578
第二节 GLP条件下计算机系统的数据备份和恢复 583
第三节 计算机安全3——系统归档和还原 587
第五十章 仪器设备SOP实例 591
第十篇 质量保证与质量控制 600
第五十一章 质量保证部门及其职责 600
第一节 质量保证部门及其职责概述 600
第二节 如何建立质量控制与质量保证体系 605
第三节 OECD一种符合性实验室检查和审核操作指导原则简介 609
第五十二章 毒理学具体试验的审查 617
第一节 GLP符合性非临床研究机构的质量保证部的职责 617
第二节 一般毒理质量控制 620
第三节 免疫毒理学质量控制考虑 626
第四节 遗传毒理学研究的质量控制 628
第五节 如何审核病理学数据 630
第六节 啮齿动物致癌研究的病理学质量保证 632
第七节 临床病理学实验室质量控制及检查 638
第八节 确定符合GLP标准要求的核查 638
第五十三章 非临床安全性评价机构人员考核内容 647
第一节 专题负责人的管理和职责 647
第二节 试验机构人员考核考虑的问题 653
第十一篇 符合GLP原则的研究资料归档 658
第五十四章 符合GLP原则的资料归档程序 658
第一节 概述 658
第二节 原始资料的归档 660
第三节 符合GLP原则的电子资料归档的指导原则 665
第五十五章 归档的标准操作规程范例 671
第十二篇 毒理学试验设计方案模板 681
第五十六章 毒理学试验方案模版 681
第一节 GLP法规对试验方案的要求 681
第二节 一般毒性试验方案模版 683
第三节 局部毒性试验方案模版 688
第四节 遗传毒理学试验方案模版 705
第五节 啮齿类长期致癌试验 708
第七节 体外细胞毒理学试验方案 714
第八节 安全性药理学研究模板 718
第十三篇 毒物动力学 724
第五十七章 毒物动力学在药物非临床安全性评价中的基本原理和应用 724
第一节 毒物动力学概述 724
第二节 毒代动力学研究指标 726
第三节 生理毒物动力学（PBTK） 730
第四节 毒物动力学的应用 731
第五节 小结 743
第十四篇 新技术新方法 744
第五十八章 在现代毒理学研究中的新技术应用 744
第一节 PCR的标准程序及优化 744
第二节 在凝胶和印迹中放射标记蛋白的检测及定量 752
第三节 Northern斑点分析 758
第四节 单向蛋白质SDS凝胶电泳 766