《分子生物学实验指南》PDF下载

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  • 作  者:王慧中主编(杭州师范大学)
  • 出 版 社:北京:中国农业科学技术出版社
  • 出版年份:2009
  • ISBN:9787511600356
  • 页数:144 页
图书介绍:本书介绍DNA的提取、鉴定、酶切、制备,DNA重组子的构建和鉴定、植物DNA的转化,分子标记技术,分子杂交,基因文库构建和筛选,生物芯片技术等相关的实验操作和基本知识。

第一章 基因操作 1

实验一 植物DNA的提取及凝胶电泳分析 1

实验二 质粒DNA的制备和纯化 4

实验三 DNA酶切及鉴定 8

实验四 基因组DNA的纯化与回收 10

实验五 植物组织总RNA的提取(Trizol试剂) 12

实验六 植物mRNA的分离与纯化 15

实验七 RNAi实验 17

实验八 目的基因的PCR扩增 23

实验九 逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) 26

实验十 DNA序列测定分析(银染色法) 29

第二章 DNA重组技术 35

实验十一 大肠杆菌感受态细胞制备和转化 35

实验十二 用核酸内切酶构建亚克隆 38

实验十三 DNA重组子的构建和鉴定 40

实验十四 植物基因转化——农杆菌介导法 45

第三章 分子标记技术 48

实验十五 PCR-RFLP标记技术 48

实验十六 RAPD标记技术 50

实验十七 ISSR标记技术 52

实验十八 AFLP标记技术 54

实验十九 SSR标记技术 58

实验二十 SCAR标记技术 60

第四章 分子杂交 62

实验二十一 核酸探针标记 62

实验二十二 Southern杂交 64

实验二十三 Northern杂交 68

实验二十四 Western免疫印迹 72

实验二十五 DNA、RNA斑点杂交 75

第五章 文库构建和筛选 79

实验二十六 基因组文库构建和筛选 79

实验二十七 cDNA文库构建和筛选 88

第六章 蛋白质组学 104

实验二十八 植物总蛋白的提取与纯化 104

实验二十九 蛋白质技术——双向电泳 106

实验三十 蛋白质在原核生物中的表达 111

实验三十一 原核生物蛋白质的提取与纯化 114

实验三十二 表达蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 116

第七章 生物芯片技术 119

实验三十三 生物芯片概述 119

实验三十四 用DNA芯片技术检测基因的表达 123

附录 128

附录一 常用缓冲液配制 128

附录二 常用酶的配制 132

附录三 常用贮存液的配制 134

附录四 常用抗生素溶液 141

附录五 内切酶活性表 142

附录六 常规质粒信息基本数据库 143

参考文献 144