第一章 基因操作 1
实验一 植物DNA的提取及凝胶电泳分析 1
实验二 质粒DNA的制备和纯化 4
实验三 DNA酶切及鉴定 8
实验四 基因组DNA的纯化与回收 10
实验五 植物组织总RNA的提取(Trizol试剂) 12
实验六 植物mRNA的分离与纯化 15
实验七 RNAi实验 17
实验八 目的基因的PCR扩增 23
实验九 逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) 26
实验十 DNA序列测定分析(银染色法) 29
第二章 DNA重组技术 35
实验十一 大肠杆菌感受态细胞制备和转化 35
实验十二 用核酸内切酶构建亚克隆 38
实验十三 DNA重组子的构建和鉴定 40
实验十四 植物基因转化——农杆菌介导法 45
第三章 分子标记技术 48
实验十五 PCR-RFLP标记技术 48
实验十六 RAPD标记技术 50
实验十七 ISSR标记技术 52
实验十八 AFLP标记技术 54
实验十九 SSR标记技术 58
实验二十 SCAR标记技术 60
第四章 分子杂交 62
实验二十一 核酸探针标记 62
实验二十二 Southern杂交 64
实验二十三 Northern杂交 68
实验二十四 Western免疫印迹 72
实验二十五 DNA、RNA斑点杂交 75
第五章 文库构建和筛选 79
实验二十六 基因组文库构建和筛选 79
实验二十七 cDNA文库构建和筛选 88
第六章 蛋白质组学 104
实验二十八 植物总蛋白的提取与纯化 104
实验二十九 蛋白质技术——双向电泳 106
实验三十 蛋白质在原核生物中的表达 111
实验三十一 原核生物蛋白质的提取与纯化 114
实验三十二 表达蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 116
第七章 生物芯片技术 119
实验三十三 生物芯片概述 119
实验三十四 用DNA芯片技术检测基因的表达 123
附录 128
附录一 常用缓冲液配制 128
附录二 常用酶的配制 132
附录三 常用贮存液的配制 134
附录四 常用抗生素溶液 141
附录五 内切酶活性表 142
附录六 常规质粒信息基本数据库 143
参考文献 144