1菰属植物研究进展 1
1.1菰属植物分类及其生物学特性 1
1.2菰属植物与水稻育种应用研究现状 8
1.3菰属植物分子水平研究状况 11
2植物抗病基因研究进展 17
2.1植物病害的种类及相关概念 17
2.2植物抗病反应 19
2.3植物抗病基因种类 19
2.4 NBS-LRR类抗病基因 20
2.5植物抗病基因作用机理 23
2.6植物抗病基因的克隆 25
3基因组文库 28
3.1基因组文库概述 28
3.2人工染色体的种类及特征 29
3.2.1酵母人工染色体(YAC) 29
3.2.2细菌人工染色体(BAC) 30
3.2.3源于P1的人工染色体(PAC) 31
3.2.4双元细菌人工染色体(BIBAC) 31
3.2.5可转化人工染色体(TAC) 33
4菰基因组TAC文库的构建及筛选 36
4.1材料 37
4.1.1主要材料 37
4.1.2主要试剂 38
4.1.3主要仪器 38
4.2方法 38
4.2.1菰HMW DNA的制备 39
4.2.2 TAC克隆载体的制备 40
4.2.3感受态细胞的制备 41
4.2.4连接转化 41
4.2.5收集与保存 42
4.2.6菰基因组TAC文库的鉴定 42
4.2.7菰基因组TAC文库的筛选 43
4.3结果与分析 44
4.3.1菰HMW DNA的制备 44
4.3.2预酶切条件的确定 45
4.3.3大量酶切后分离基因组DNA 45
4.3.4连接转化 46
4.3.5菰基因组TAC文库克隆保存 46
4.3.6菰基因组TAC文库的鉴定 47
4.3.7菰基因组TAC文库的筛选 51
4.4讨论 55
4.4.1构建TAC文库的优势 55
4.4.2构建菰基因组TAC文库条件的优化 55
4.4.3菰基因组TAC文库的鉴定 56
4.4.4菰基因组TAC文库的保存和筛选 57
4.4.5菰基因组TAC文库的应用 57
4.5结论 58
参考文献 59
附录 GenBank已公布的菰(Zizania latifolia)基因序列 69
缩略语 111
致谢 112