第一篇 昆虫生物化学实验技术 1
实验一 Bradford法(考马斯亮蓝法)测定蛋白质含量 1
实验二 双缩脲法(Biuret法)测定蛋白质含量 2
实验三 Folin-酚试剂法(Lowry法)测定蛋白质含量 5
实验四 微量凯氏(Micro-Kjeldahl)定氮法测定蛋白质含量 7
实验五 紫外吸收法测定蛋白质含量 10
实验六 血淋巴提取及体积测定 14
实验七 血淋巴中血糖含量测定 16
实验八 血淋巴中氨基酸薄层层析分析 18
实验九 昆虫组织粗脂肪含量的测定 21
实验十 昆虫组织不饱和脂肪酸测定 23
实验十一 体壁几丁质定性定量分析 24
实验十二 酶的基本特性 26
实验十三 正交法测定几种因素对酶活性的影响 30
实验十四 羧酸酯酶米氏常数(Km)测定 35
实验十五 有机磷杀虫剂对羧酸酯酶抑制作用 37
实验十六 乙酰胆碱酯酶双分子速率常数(Ki)测定 39
实验十七 细胞色素P450活性测定 40
实验十八 细胞色素P450和b5含量测定 47
实验十九 羧酸酯酶活性测定 48
实验二十 谷胱甘肽-S-转移酶活性测定 50
实验二十一 乙酰胆碱酯酶活性及有机磷抑制作用比较 53
实验二十二 磷酸酯酶活性测定 55
实验二十三 酚氧化酶活性测定 57
实验二十四 谷胱甘肽过氧化物酶活性测定 58
实验二十五 过氧化氢酶活性测定 61
实验二十六 超氧化物歧化酶活性测定 62
实验二十七 几丁质酶活性测定 63
实验二十八 几丁质合成酶活性测定 65
实验二十九 昆虫中肠蛋白酶活性测定 66
实验三十 昆虫中肠消化酶定性分析 68
实验三十一 羧基酰胺酶活性 70
实验三十二 聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离血淋巴和组织蛋白及酶类 72
第二篇 昆虫基础分子生物学实验技术 75
实验一 昆虫基因组DNA提取 75
实验二 琼脂糖凝胶电泳检测DNA 77
实验三 昆虫总RNA提取 79
实验四 cDNA第一链的合成(RT反应) 81
实验五 聚合酶链式反应(PCR) 83
实验六 质粒DNA的微量制备(碱裂解法) 87
实验七 质粒DNA与目的DNA的双酶切和连接 90
实验八 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 94
实验九 外源基因在大肠杆菌中的表达 96
实验十 实时荧光定量PCR技术 99
实验十一 Southern杂交技术(用Dig标记探针) 106
实验十二 Northern印迹杂交(用Dig标记探针) 111
实验十三 Western印迹分析 114
实验十四 随机引物扩增多态性DNA技术(RAPD) 117
实验十五 扩增片段长度多态性(AFLP) 120
附录 126
参考文献 139