第一章 水体富营养化与蓝藻水华 1
第一节 蓝藻概述 1
第二节 水体富营养化 2
一、水体富营养化的概念 2
二、富营养化的评价标准 3
三、富营养化水体的特征 4
四、富营养化的产生机理 5
五、水体富营养化的危害 6
六、水体富营养化与蓝藻水华 9
七、富营养化研究的意义与展望 10
第三节 蓝藻水华的污染现状 10
第四节 蓝藻毒素的种类、结构及毒性机理 11
一、蓝藻神经毒素 12
二、蓝藻肝毒素 13
三、其他毒素 15
主要参考文献 15
第二章 微囊藻毒素概述 17
第一节 微囊藻毒素简介 17
一、概述 17
二、微囊藻毒素的结构 18
三、微囊藻毒素的理化性质 19
第二节 微囊藻毒素的产生、分布和变迁 21
一、微囊藻毒素的产生机制 21
二、微囊藻毒素的分布 23
三、微囊藻毒素在水体中的迁移 24
第三节 微囊藻毒素和环境因子之间的关系 25
一、光照对微囊藻毒素的影响 25
二、温度对微囊藻毒素的影响 26
三、不同形态氮对微囊藻毒素的影响 26
四、不同形态磷对微囊藻毒素的影响 26
五、痕量金属对微囊藻毒素的影响 27
第四节 微囊藻毒素对水环境的影响 27
一、微囊藻毒素对水生细菌的影响 27
二、微囊藻毒素对浮游动物的影响 27
三、微囊藻毒素对底栖动物的影响 28
第五节 微囊藻毒素的污染现状 29
一、欧洲水体微囊藻毒素的情况 29
二、美洲水体微囊藻毒素的情况 30
三、亚洲水体微囊藻毒素的情况 30
四、我国淡水水体微囊藻毒素的情况 31
第六节 微囊藻毒素的危害和毒性机理 32
一、MC-LR对动植物的危害 32
二、MC-LR对人类健康的危害 33
三、MC的毒性机理 33
第七节 微囊藻毒素的稳定性和去除方法 34
一、微囊藻毒素的一般稳定性和去除研究 34
二、化学方法对微囊藻毒素的分解和去除 34
三、生物法对微囊藻毒素的分解和去除 37
四、物理方法对微囊藻毒素的去除 39
第八节 微囊藻毒素标准制订 41
主要参考文献 42
第三章 微囊藻毒素的提取分离技术 47
第一节 原材料的来源 47
一、自然水域蓝藻水华 47
二、实验室培养产毒铜绿微囊藻 48
第二节 提取方法 48
一、细胞破碎 48
二、提取方式的选择 49
三、提取溶剂的选择 50
第三节 分离技术 51
一、色谱分离技术 51
实例3-1微囊藻毒素的提取和提纯研究 55
实例3-2大孔吸附树脂分离纯化微囊藻毒素 55
实例3-3薄层色谱法检测蓝藻和天然水中微囊藻毒素 56
二、过滤与膜分离技术 58
实例3-4超滤膜去除微囊藻毒素-LR的机理和影响因素研究 59
三、超临界流体萃取技术 60
实例3-5超临界流体萃取蓝藻中的微囊藻毒素 61
第四节 样品的保存 61
第五节 纯度鉴定 62
主要参考文献 63
第四章 微囊藻毒素的化学分析检测方法 65
第一节 样品的采集与前处理 65
一、样品采集 65
二、样品的前处理 68
实例4-1水样的富集和洗脱 71
实例4-2蓝藻及动物样品的富集和净化 71
第二节 高效液相色谱法 72
一、液相色谱分析条件的选择 72
二、检测器的选择 73
三、MC的液相色谱定性定量分析 74
实例4-3水中微囊藻毒素的液相色谱分析 75
实例4-4螺及鱼体内MC的液相色谱分析 76
第三节 液相色谱／质谱联用分析法 77
一、液相色谱／质谱联用技术概述 77
二、MC的液相色谱-质谱联用定性定量分析 78
实例4-5高效液相色谱-质谱联用方法测定背角无齿蚌体内微囊藻毒素 79
实例4-6超高效液相色谱-飞行时间质谱快速检测饮用水及藻类制品中的微囊藻毒素 81
实例4-7水样中MC的LC-MS／MS法检测 81
第四节 气相色谱法 86
一、气相色谱技术概述 86
二、MC的气相色谱法定性定量分析 86
实例4-8用M MPB法分析沉淀物中的MC 87
第五节 薄层色谱法 88
一、薄层色谱法概述 88
二、MC的薄层色谱法分析 89
第六节 毛细管电泳法 89
一、毛细管电泳法概述 89
二、MC的毛细管电泳法分析 89
第七节 其他化学分析方法 90
一、极谱伏安分析 90
二、红外法 91
三、核磁共振法 92
主要参考文献 93
第五章 微囊藻毒素的生物检测方法 96
第一节 小鼠法 96
第二节 盐水虾法 97
实例5-1藻毒素的盐水虾法分析 97
第三节 发光细菌法 99
一、原理 99
二、发展 99
三、检测实例 100
实例5-2水产品中藻毒素的发光细菌法分析 100
第四节 其他生物方法 103
一、动物法 103
二、植物法 103
主要参考文献 104
第六章 微囊藻毒素的生物化学分析检测方法 105
第一节 蛋白磷酸酶抑制分析法 105
一、原理与分类 105
二、特点 105
三、微囊藻毒素的蛋白磷酸酶抑制分析法 106
实例6-1蛋白磷酸酶抑制法——荧光法检测微囊藻毒素的影响因素研究 108
第二节 2-甲基-3-甲氧基-4-苯基丁酸法 109
一、原理 109
二、方法的发展与改进 110
三、特点 110
四、最新研究进展与应用 111
第三节 蛋白磷酸酯酶竞争性结合法 112
第四节 组织培养细胞毒性法 112
第五节 其他生物化学方法 113
主要参考文献 113
第七章 微囊藻毒素的分子生物学检测方法 115
第一节 全细胞聚合酶链式反应法 115
一、聚合酶链式反应的发展 115
二、原理 116
三、PCR反应体系与反应条件 117
四、PCR反应特点 120
五、PCR扩增产物分析 120
六、微囊藻毒素的全细胞PCR分析法 120
实例7-1微囊藻毒素合成酶基因的PCR检测方法 123
第二节 实时定量PCR法 125
一、实时定量聚合酶链式反应原理与特点 125
二、实时定量PCR研究进展 125
三、微囊藻毒素的实时定量PCR检测法 129
第三节 生物传感器 129
主要参考文献 130
第八章 微囊藻毒素的免疫学检测方法 133
第一节 酶联免疫吸附分析法 133
一、酶联免疫吸附分析法概述 133
二、微囊藻毒素-LR完全抗原的制备及鉴定 134
三、微囊藻毒素-LR抗体的制备与鉴定 137
四、微囊藻毒素-LR高灵敏ELISA检测方法的建立 141
五、微囊藻毒素-LR高灵敏 ELISA酶免试剂盒的研制 143
第二节 胶体金免疫色谱法 147
一、胶体金免疫检测技术概述 147
二、微囊藻毒素-LR单抗胶体金结合物的制备及鉴定 150
三、微囊藻毒素-LR“金标”试纸条的研制及验证 153
第三节 微囊藻毒素的放射免疫分析法 157
一、基本原理 157
二、标记技术 158
三、放射免疫分析实验注意事项及常见问题 162
四、微囊藻毒素的放射免疫检测 164
第四节 微囊藻毒素的时间分辨荧光免疫分析 168
一、时间分辨荧光免疫分析介绍 168
二、时间分辨荧光免疫分析方法的建立 172
三、时间分辨荧光免疫分析的注意事项 181
四、微囊藻毒素时间分辨荧光免疫分析的方法 182
实例8-1微囊藻毒素直接竞争时间分辨荧光免疫分析法 182
实例8-2微囊藻毒素间接竞争时间分辨荧光免疫分析法 184
第五节 免疫亲和色谱法 185
一、原理 185
二、特点 187
三、分类 187
四、亲和吸附剂 188
五、亲和色谱的基本操作 193
六、免疫亲和色谱柱的工作原理 195
七、微囊藻毒素-LR免疫亲和色谱柱的研制 196
实例8-3水中微囊藻毒素-LR的免疫亲和色谱-高效液相法检测 199
实例8-4藻样中微囊藻毒素的免疫亲和色谱-液质联用法检测 204
第六节 免疫传感器法 209
一、原理、特点与分类 209
二、免疫传感器的固定方法 211
三、检测步骤 213
四、免疫传感器在藻毒素检测中的应用进展 214
实例8-5藻样中微囊藻毒素的免疫传感器检测 214
主要参考文献 219
第九章 展望 222
附录 225
附录一 主要缩略语表 225
附录二 蓝藻水华照片 227